梅毒初筛试验临床应用探讨

梅毒(Syphilis)曾一度绝迹，近年来呈蔓延趋势．发病率成倍增长，为了探讨本地区梅毒发病情况，快速准确诊断梅毒及梅毒初筛试验3种方法的优劣，我们收集了1990-1995年所分离的梅毒151种，现就其试验方法、检验结果报告如下。     

合肥地区产超广谱β-内酰胺酶菌株的分布及药敏分析

目的：了解合肥地区产超广谱β-内酰胺酶（ESBL）的肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌分布及耐药特点。方法：应用纸片扩散法对合肥地区4家较大的综合性医院从临床标本中分离的254株肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌进行ESBL的确诊试验。结果：254株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌共检出69株产ESBL菌株（27.2%）,其中,血液感染ESBL检出率为54.5%（6/11）、烧伤科ESBL的检出率为48.6%(18/37）。亚胺硫霉素对产ESBL的大砀埃希菌和肺炎克雷伯菌的敏感率分别为94.5%和80%。头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦和头孢西丁对产ESBLs的大肠埃希菌和产ESBLs的肺炎克雷伯菌的敏感率在40%-70%之间,阿米卡星对产ESBL的大肠埃希菌的敏感率为69.2%。结论：ESBL在血液感染的烧伤科标本中的检出率较高。治疗产ESBL菌株引起的感染可首选亚胺硫霉素,其次,选含酶抑制剂的复方制剂和头霉素类。对产ESBL的大肠埃希菌也可选阿米卡星。     

男性生殖道支原体感染与精浆抗精子抗体关系

目的 观察男性不育症患者生殖道解脲支原体感染（UU）与精浆抗精子抗体（AsAb)的关系。方法 对124例男性不育患者的生殖道进行UU培养和AsAb检测,对其中87例UU阳性的精液常规结果进行分析。结果 UU与（26／37）,总符合率66．9％（83／124）。不育组UU感染率70．16％,生育组感染率为16．41％（P＜0．01）,不育组感染率明显高于生育组。87例UU感染不育患者精液常规分析,至少有2项以上指标不正常,68例AsAb阳性。结论 UU感染与AsAb关系非常密切,是引起男性免疫性不育的一个重要因素。     

前列腺液三酰甘油、胆固醇含量与炎症

目的：探讨前列腺液三酰甘油三酯（ＴＧ）、胆固醇（ＣＨ）浓度与前列腺炎的关系。方法：用酶法检测前列腺液ＴＧ、ＣＨ浓度。结果：细菌性前列腺炎的前列腺液ＣＨ浓度低于对照组（Ｐ〈０．０５）,而ＴＧ浓度差异无显著性（Ｐ〉０．０５）。结论：前列腺液ＣＨ浓度可以作为判断前列腺炎症程度的辅助指标,并作为了解前列腺分泌功能的参数之一。     

AmpCβ-内酰胺酶的产生机制及检测方法学进展

AmpCβ-内酰胺酶存在于许多革兰氏阴性菌中,最初由染色体介导,目前已转移到质粒上。它与超广谱p一内酰胺酶(EsBLs)的最主要表型区别是耐药谱的扩大且不能被克拉维酸抑制。诱导表达是染色体AmpC酶表达的典型模式,受染色体amp操纵子调控。基因突变造成的高产表达和新型质粒AmpC酶的不断出现威胁着感染性疾病的治疗。目前检测AmpC酶的方法有纸片诱导、抑制剂协同、三维试验、等电聚焦、基因检测等。需要发展简便、快速、准确的检测技术应用于临床实验室,指导合理正确使用抗生素,以控制AmpC酶所致耐药性的蔓延。     

Chinese 1基因型弓形虫棒状体蛋白 ROP16的基因克隆表达及生物信息学分析

目的：构建弓形虫Chinese 1基因型TgCtWh3（以后均简称Wh3）株棒状体蛋白（ rhoptry protein ,ROPs）16的原核和真核重组表达质粒及其3D结构。方法参照ROP16序列分别设计引物,采用PCR从弓形虫Chinese 1基因型Wh3株基因组DNA中扩增出编码ROP16的基因片段,克隆至pMD18-T载体;经PCR及测序分析鉴定;阳性克隆的质粒分别亚克隆至原核表达载体pET-28a和真核表达载体pEGFP-C2,分别转化大肠杆菌BL21和DH5α,PCR和酶切鉴定转化菌落插入的序列;将构建的原核表达菌株经IPTG诱导,SDS-PAGE和免疫印迹分析融合蛋白的表达;将构建的真核重组质粒经脂质体转染293T细胞,观察其在细胞中表达;采用生物信息学方法分析构建了蛋白的3 D结构。结果各组均PCR扩增出约2．1 kb ROP16基因的特异片段,序列检测结果均正确;分别亚克隆到原核表达载体pET-28a和真核表达载体pEGFP-C2中,成功构建了Chinese 1基因型弓形虫棒状体蛋白ROP16的原核表达质粒和真核表达质粒;原核表达质粒在大肠杆菌中表达了ROP16的融合蛋白;真核表达质粒在293T细胞中成功表达,成功构建出ROP16基因的3D结构图。结论以pET-28a和pEGFP-C2为载体,分别成功构建并表达了ROP16的原核和真核重组质粒,并构建出其3D结构图。     

FPSA/TPSA比值对前列腺疾病诊断的应用价值探讨

目的探讨血清游离前列腺特异性抗原(FPSA)与总前列腺特异性抗原(TPSA)比值FPSA/TPSA(F/T)在前列腺良恶性疾病鉴别诊断中的应用价值。方法采用电化学发光法测定78例未经治疗的前列腺癌(PCa)患者和106例良性前列腺增生(BPH)患者血清中的TPSA和FPSA,并计算FPSA/TPSA比值(F/T)。结果在106例BPH患者中,39例TPSA<4.0μg·L-1,38例4.0μg·L-1≤TPSA<10.0μg·L-1,29例10.0μg·L-1≤TPSA<100μg·L-1;在78例PCa患者中,2例TPSA<4.0μg·L-1,10例4.0μg·L-1≤TPSA<10.0μg·L-1,28例10.0μg·L-1≤TPSA<100μg·L-1,38例TPSA≥100μg·L-1。在TPSA<4.0μg·L-1时,BPH与PCa患者的TPSA及F/T值差异均无统计学意义(P>0.05);在4.0≤TPSA<10.0μg·L-1时,TPSA差异无统计学意义(P>0.05)而F/T值差异有统计学意义(P<0.05﹚;在10.0μg·L-1≤TPSA<100μg·L-1时,TPSA及F/T值差异均有统计学意义(前者P<0.05,后者P<0.01﹚。结论 F/T比值对前列腺良、恶性疾病的鉴别诊断有一定价值,尤其TPSA在4.0～10.0μg·L-1范围内更为显著。     

碳青霉烯类耐药粘质沙雷菌β-内酰胺类耐药基因研究

目的 探讨碳青霉烯类耐药粘质沙雷菌β-内酰胺类耐药基因携带情况.方法 收集242株临床分离的粘质沙雷菌,采用Vitek-2 Compact全自动微生物系统对其鉴定并进行药敏试验,筛选出对亚胺培南耐药18株、中介1株;再用K-B法检测19株细菌对厄他培南和美罗培南的药物敏感性,确认均为耐药;采用改良Hodge试验及EDTA协同试验检测碳青霉烯酶;PCR检测碳青霉烯酶基因blakpc、blanmc、blaimp、blagim、blavim、blaoxa-23及超广谱β-内酰胺酶基因blaveb、blaper、blatem、blashv、blactx-m-1、blactx-m-2、blactx-m-9,阳性结果进行DNA测序,BLAST比对确定基因型.结果 药敏结果显示,19株细菌对美罗培南、厄他培南、氨曲南、环丙沙星、头孢唑林、头孢曲松、头孢噻肟全部耐药,对亚胺培南18株耐药、1株中介;对阿米卡星全部敏感;对庆大霉素敏感率为57.9%;妥布霉素敏感率不到30%;对头孢替坦、头孢他啶、头孢吡肟敏感率均不足20%;左氧氟沙星、哌拉西林/他唑巴坦敏感率均不足10%;改良Hodge试验阳性18株,阴性1株;EDTA协同试验全部阴性;PCR扩增和DNA测序显示,7株含blakpc-2、6株含blactx-m-14、3株含blashv-11、2株含blashv-12、1株含blaoxa-23基因;19株细菌均未检出blanmc、blaimp、blagim、blavim碳青霉烯酶基因及blaveb、blaper、blatem、blactx-m-1、blactx-m-2超广谱β-内酰胺酶基因.结论 分离的碳青霉烯类耐药粘质沙雷菌,耐药现象较为严重,主要携带blakpc-2型、blactx-m-14型耐药基因.     

多重耐药鲍曼不动杆菌外排泵机制的初步研究

目的研究外排泵在多重耐药鲍曼不动杆菌中的存在情况,为进一步研究其耐药机制奠定基础。方法采用M-H琼脂稀释法,测定添加和不添加抑制剂苯丙氨酸-精氨酸-β-萘胺(PAβN)前后鲍曼不动杆菌对亚胺培南、美罗培南、庆大霉素、环丙沙星和头孢他啶5种药的最低抑菌浓度(MIC)。结果添加PAβN后,74株多重耐药鲍曼不动杆菌对5种药的MIC值下降4倍以上的菌株数分别为亚胺培南45(60.81%)株、美罗培南70(94.59%)株、庆大霉素0(0%)株、环丙沙星4(5.41%)株、头孢他啶45(60.81%)株。结论外排泵机制可能是引起鲍曼不动杆菌对亚胺培南、美罗培南、头孢他啶耐药的主要机制;外排泵机制对环丙沙星和庆大霉素耐药不起主要作用。