灯台叶总碱与氟康唑联用对耐药白念珠菌株CA23的协同抑菌作用

目的 探讨灯台叶总碱与氟康唑联用对耐药白念珠菌CA23毒力因子的作用和潜在机制。方法 微量稀释法、棋盘法及时间-杀菌曲线测定灯台叶总碱与氟康唑联用效果;荧光探针测定菌株外排泵功能,实时荧光定量PCR法检测耐药相关基因表达;倒置显微镜、扫描电镜观察菌丝诱导培养基中菌株形态转换,RT-qPCR法检测菌丝相关基因表达,添加外源性cAMP验证;卵黄琼脂平板法检测菌株胞外磷脂酶活性。结果 灯台叶总碱与氟康唑对耐药白念珠菌具有较强的协同抑菌作用;联用处理并不能显著抑制菌株的外排功能,与耐药相关基因表达结果一致;两药联用可以抑制在SD和Spider诱导培养基中菌丝生长,且下调菌丝相关基因CYR1、ALS3、RAS1、BCR1、ALS2、TPK2表达,添加外源性cAMP后,能恢复部分药物联用引起的菌株形态变化;两药联用能抑制胞外磷脂酶活性,且对灯台叶总碱存在剂量依赖性。结论 灯台叶总碱与氟康唑联用对氟康唑耐药株表现为协同抑菌作用,其机制与调节Ras1-cAMP-PKA信号通路抑制菌丝生长,并降低胞外磷脂酶活性从而影响耐药白念珠菌毒力因子有关。     

灯盏乙素对乳腺癌细胞中环状RNA OXNAD1与SMARCA5的影响

目的〓检测灯盏乙素对乳腺癌MDA-MB-231细胞中的环状RNA（Circular RNA,circRNA）的相对表达量的影响,进一步探索灯盏乙素对肿瘤的作用机制。方法〓采用实时荧光定量PCR的方法,检测对照组与不同剂量组的灯盏乙素处理后的乳腺癌细胞中circRNA OXNAD1与SMARCA5的相对表达量。结果〓灯盏乙素在低剂量（1、10、25μm）的情况下,使得乳腺癌MDA-MB-231细胞中circRNA OXNAD1的表达量显著降低（P<0.05）,在高剂量（100μm）时显著升高（P<0.05）。灯盏乙素在低剂量（1、10、25、50μm）的情况下,使得乳腺癌MDA-MB-231细胞中环状RNA SMARCA5的表达量显著降低（P<0.05）,在高剂量（100μm）时显著升高（P<0.05）。结论〓灯盏乙素影响circRNA OXNAD1与SMARCA5的表达,并且存在剂量反应关系,低剂量与高剂量呈现出相反的表达量变化。     

灯盏乙素、灯盏乙素苷元及四乙酰灯盏乙素苷元联合三氧化二砷对乳腺癌细胞的增殖抑制作用研究

目的 探讨灯盏乙素及其衍生物和三氧化二砷单独及联合用药对乳腺癌细胞的作用。方法 将体外培养的乳腺癌MDA-MB-231细胞分成对照组和用药组,每组设6个复孔。用药组为灯盏乙素及其衍生物（灯盏乙素苷元与四乙酰灯盏乙素苷元）单独用药,以及与5μM三氧化二砷一起联合用药。用MTT法测试它们对乳腺癌MDA-MB-231细胞的抑制作用。结果 灯盏乙素单独用药时,剂量为10μmol·L-1、50μmol·L-1、100μmol·L-1时,对MDA-MB-231细胞的抑制率分别为（0.01±5.56）%、（18.18±3.46）%、（35.72±5.27）%;灯盏乙素与5μM As2O3联合用药时,抑制率分别为（13.55±3.54）%、（32.6±5.09）%、（35.29±6.96）%。灯盏乙素苷元单独用药时,剂量为10μmol·L-1、50μmol·L-1、100μmol·L-1时,对MDA-MB-231细胞的抑制率分别为（1.13±5.46）%、（1.68±6.55）%、（3.86±5.51）%;与5μM As2O3联合用药时,抑制率分别为（17.90±2.41）%、（28.13±4.63）%、（34.94±2.41）%。四乙酰灯盏乙素苷元单独用药时,剂量为1μmol·L-1、5μmol·L-1、10μmol·L-1时,对MDA-MB-231细胞的抑制率分别为（0.76±5.07）%、（1.34±4.07）%、（-0.40±7.59）%;与5μM As2O3联合用药时,抑制率分别为（16.52±5.91）%、（17.25±3.89）%、（13.62±7.24）%. 结论 单独用药时,灯盏乙素对MDA-MB-231细胞的抑制作用大于灯盏乙素苷元及四乙酰灯盏乙素,糖基的去除和乙酰化使其作用减弱;与三氧化二砷联用时,灯盏乙素及灯盏乙素苷元对细胞有显著的抑制作用。其中,灯盏乙素苷元单独使用无抑制活性,却能显著增强三氧化二砷对细胞的抑制作用。灯盏乙素苷元与三氧化二砷联合用药具有治疗乳腺癌的应用前景。     

屏边三七提取物协同氟康唑抗耐药白念珠菌的作用及机制研究

目的初步探讨屏边三七提取物联合氟康唑抗耐药白念珠菌的作用及其机制。方法采用倍比微量稀释法和时间-生长曲线绘制法于体外初步确定屏边三七与氟康唑的联合效果;通过建立系统性耐药白念珠菌感染小鼠模型,于体内验证屏边三七与氟康唑协同的作用;运用荧光检测法测定白念珠菌外排泵的外排功能,并通过q-PCR检测耐药相关基因的转录水平,最后运用荧光探针检测白念珠菌细胞内线粒体膜电位的变化水平。结果屏边三七与氟康唑联合具有协同作用并能明显提高系统性耐药白念珠菌感染小鼠的生存率,维持体质量,提高脾脏和胸腺的脏器系数,降低肺和肾的菌落数,改善脏器的病理状态;屏边三七处理耐药白念珠菌能明显降低细胞主动外排泵的外排功能,使耐药相关基因转录水平明显下调并降低细胞内线粒体膜电位水平。结论屏边三七提取物协同氟康唑有明显抗耐药白念珠菌的作用,其机制与降低主动外排泵相关蛋白的表达和抑制氧化磷酸化过程有关。     

云南菊状千里光地上部分挥发油的GC-MS分析及其抗真菌活性研究

目的菊状千里光(Senecio laetus Edgew.)为菊科(Compositae)千里光属(Senecio L)药用植物,具有活血、消肿、祛风、除湿等功效。研究旨在对云南菊状千里光挥发油的抗真菌活性评价及GC-MS化学成分分析。方法用水蒸气蒸馏法提取菊状千里光地上部分挥发油,用白色念珠菌抑菌实验评价挥发油的抑菌活性,用气相色谱-质谱联用(GC-MS)方法定性定量分析挥发油的化学成分。结果菊状千里光挥发油与氟康唑联合使用时,对白色念珠菌耐药株有极好地协同抑菌作用,通过GC-MS分析,鉴定出74种化合物,主要为萜类化合物、芳香族化合物和脂肪族化合物等,占色谱总馏出峰面积的73.3%。结论首次对云南产的菊状千里光地上部分进行GC-MS分析报道,菊状千里光挥发油74种化学成分,与其极好地协同抗真菌活性以及较多的药用功效与有一定联系,为今后菊状千里光药用价值进一步研究提供一定的科学依据。     

基于HPLC指纹图谱及多指标成分分析的化学模式识别评价彝药紫丹活血片质量

目的基于HPLC指纹图谱与多成分含量测定,并结合化学模式识别法评价紫丹活血片(ZHT)的质量。方法采用ACE Neptune-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,体积流量1.0 mL/min,检测波长275 nm,柱温25℃,对18批ZHT进行分析,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统结合聚类分析与主成分分析(PCA)对ZHT质量进行评价。结果建立了ZHTHPLC指纹图谱,确定了26个共有峰,并指认了其中9个色谱峰(包含2号峰丹参素钠、8号峰迷迭香酸、9号峰紫草酸、10号峰丹酚酸B、12号峰丹酚酸A、21号峰二氢丹参酮I、22号峰隐丹参酮、23号峰丹参酮I、25号峰丹参酮IIA);18批ZHT HPLC指纹图谱的相似度在0.93～1.00;聚类分析和PCA结果与相似度结果基本一致。多指标成分定量分析方法学考察结果表面,8个指标成分的加样回收率在98.27%～103.42%,RSD为0.86%～2.53%;18批ZHT中丹参素钠、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、二氢丹参酮I、隐丹参酮、丹参酮I及丹参酮IIA的质量分数分别为0.149%～0.218%、0.179%～0.225%、0.222%～0.286%、3.570%～6.399%、0.048%～0.136%、0.122%～0.309%、0.061%～0.215%、0.093%～0.413%。结论不同批次ZHT存在一定的质量差异。通过指纹图谱与聚类分析、PCA等方法相结合可全面地评价ZHT的质量,此方法的建立可以为ZHT的质量控制及评价提供参考依据。     

肠道黏膜、肠道免疫和微生物群在肠源性白念珠菌感染中的作用

肠源性白念珠菌感染是指肠道内定植的白念珠菌在一定条件下发生易位,突破肠道,造成组织感染,甚至引发侵袭性白念珠菌感染。肠道黏膜作为念珠菌第一接触位点,是抵抗白念珠菌定植或侵入的第一道防线,常通过物理屏障和激活宿主免疫抑制感染。作为另一种防御机制,肠道内微生物群则通过调节pH, 分泌抗菌肽和竞争黏附点共同抵抗白念珠菌侵袭感染。本综述总结肠道黏膜、肠道免疫和微生物群这三个关键因素在肠源性白念珠菌感染中的作用, 为肠道定植引发侵袭性白念珠菌病的科学研究提供新思路。     

贡山三尖杉的化学成分研究

目的:研究贡山三尖杉Cephalotaxus lanceolata K. M. Feng的化学成分。方法:利用硅胶、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶、MCI gel、RP-C18等柱色谱方法进行化合物的分离纯化,根据理化性质和波谱方法进行结构鉴定。结果:从贡山三尖杉枝叶中分离得到30个化合物,分别鉴定为:三尖杉碱(1)、高三尖杉酯碱(2)、氧桥三尖杉碱(3)、诸葛菜碱D(4)、芹菜素(5)、槲皮素(6)、柯伊利素(7)、木犀草素(8)、芦丁(9)、牡荆素(10)、6-C-methylnaringeninp(11)、芹菜素-6-C-β-L-吡喃阿拉伯糖-8-C-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(12)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯(13)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(14)、穗花杉双黄酮-7-甲醚(15)、金松双黄酮(16)、银杏双黄酮(17)、熊果酸(18)、2α-hydroxyursolic acid(19)、常春藤皂苷元-28-O-β-D-葡萄糖酯苷(20)、邻苯二甲酸-二(2-乙基-己基)酯(21)、硬脂酸(22)、单棕榈酸甘油酯(23)、巨豆-7-烯-3β,4α...     

Gomisin M1协同氟康唑对耐药白念珠菌毒力因子的作用研究

目的 探讨gomisin M1(从五味子科植物中提取的木脂素类成分)联合氟康唑抗耐药白念珠菌的作用及其机制.方法 采用倍比微量稀释法检测gomisin M1联合氟康唑对白念珠菌的最小抑菌浓度;通过时间-生长曲线动态观察gomisin M1联合氟康唑对白念珠菌的抑制作用;采用倒置显微镜观察gomisin M1联合氟康唑在...     

HPLC法同时测定当归中8种成分

目的建立HPLC法同时测定当归中色氨酸、绿原酸、阿魏酸、洋川芎内酯Ⅰ、洋川芎内酯H、欧前胡素、Z-藁本内酯、丁烯基苯酞的含有量。方法当归70%甲醇提取物的分析采用Ultimate C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-0.085%磷酸溶液,梯度洗脱;体积流量1 mL/min;检测波长280 nm;柱温30℃。结果 8种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 6),平均加样回收率97.60%～101.22%,RSD 0.89%～2.51%。结论该方法准确稳定,重复性好,可用于当归的质量控制。