基因治疗性血管生成在下肢缺血性疾病中的研究进展

目的 总结基因治疗性血管生成在下肢缺血性疾病治疗中的研究进展,旨在为下肢缺血性疾病的无创治疗提供新的方法。方法 收集近年来关于基因治疗性血管生成在下肢缺血性疾病治疗中研究的相关文献并加以综述。结果 外周动脉疾病发病率逐年升高,如何有效降低严重下肢缺血患者的截肢率与病死率,仍是当前亟需解决的临床问题。大量国内外基础与临床研究结果表明,基因治疗性血管生成能够有效诱使下肢缺血组织内的血管新生与侧支循环建立,从而改善缺血区域的血流灌注。此外,多种类的新型非病毒类基因递送载体的构建也能在一定程度上提高基因治疗的安全性与有效性。结论 基因治疗性血管生成已经取得了十分不错的成果,为下肢缺血性疾病的治疗带来了新的思路与策略,但是仍存有部分问题尚未解决。     

国内外药品信号检测和评价的比较研究

目的 分析国内外药品信号管理的定义、信号来源、检测方法和评价原则,为规范药品上市许可持有人开展药物警戒活动提供参考。方法 对美国、欧盟、日本等国家及世界卫生组织（WHO）的药品信号管理制度进行分析提炼,总结信号检测和评价方法。结果 各国对药品信号均有明确的定义,设有较为规范的信号检测和评价流程,并结合各国监管强度及特点制定了相对应的实践指南。信号检测的方法均基于对更多相关信息的搜集,信号验证强调更多相关信息的搜集,强调对药品特征、患者特点、相似案例的考虑,从而做出更全面的判断;为提高信号检测效率,在信息性质判断过程中强调有目的性的优先排序,以期将资源倾斜在可能影响风险-获益比的潜在风险。结论 我国药物警戒中信号检测工作起步较晚,需要加强与国际交流合作,稳步提升我国信号检测工作的人员基础与水平。     

《P2Y12受体拮抗剂用于急性冠状动脉综合征或经皮冠状动脉介入治疗患者精准治疗快速建议指南》临床问题与结局指标的确定

目的 确定《P2Y12受体拮抗剂用于急性冠状动脉综合征或经皮冠状动脉介入治疗患者精准治疗快速建议指南》(简称指南)纳入的临床问题和结局指标.方法 通过专家咨询、文献检索起草拟纳入临床问题与结局指标初稿,并征询一线医师和药师意见.最终,由指导委员会确定16个临床问题和19个结局指标在专家会上采取德尔菲法调查.通过积极系数...     

《中华全科医师杂志》：全科与专科的学术交流平台

1993年11月, 中华医学会全科医学分会第一届委员会正式成立, 一个新的学科—全科医学在中国大地诞生了。全科医学分会成立之初, 一切工作都是探索性的。1998年, 在第二届委员会成立之前, 所有委员达成了一个共识:全科医生/家庭医生是临床医生, 其核心岗位胜任能力是健康维护与疾病防治。因此, 全科医生有必要准确掌握和熟练应用医学专科知识技能。中华医学会全科医学分会第二届委员会成立, 我有幸以神经内科专科医生的身份成为其中一员, 并先后担任中华医学会全科医学分会青年委员、委员、常委兼秘书长。通过参加全科医学分会的学术工作, 我逐渐认识到了全科医学的特殊性以及全科医生的重要性, 但最核心的要素仍然是全科医生必须提高准确掌握和熟练应用医学专科知识技能, 为此有必要搭建一个全科与专科进行学术交流的平台。2002 年 9 月, 由中华医学会主办的《中华全科医师杂志》应运而生, 我也有幸被聘为第一届编辑委员会委员, 并在2015年被聘为副总编辑至今, 一直以来秉承全科医学前辈们的教诲, 积极参与杂志的各项工作, 不仅更加深刻地了解了全科医学的理论、技能, 同时对自己的神经病学专科工作也有很大的促...     

老年人跌倒损伤发生现状及危险因素分析

目的 利用我国广西壮族自治区南宁市的跌倒老年人调查数据,描述社区年龄在60岁及以上的老年人跌倒损伤的流行特征,分析社区老年人跌倒损伤的风险因素,为预防老年人跌倒损伤提供理论依据。方法 选取广西南宁市作为调查单位。采用整群抽样的方法,调查对象是在广西南宁的社区中抽取年龄在60岁及以上的老年人,于2014年7月到2015年6月间通过问卷采集调查对象的个人信息、日常生活活动能力、老年人跌倒风险评分。最终得到有完整跌倒损伤信息的样本1188例。通过秩和检验及χ²检验初步分析各因素与跌倒损伤之间的关系,并通过Logistic回归方法进一步分析被调查人群跌倒损伤可能的风险因素。结果 跌倒损伤的发生率为33.9%,发生损伤人群与未发生损伤人群相比,有统计学意义的危险因素包括衰老、文化程度低、长期居住于城市、失能、使用助行器、饮酒、缺乏户外运动、运动持续时间低于1小时、运动频率减少。同时不同跌倒风险评估等级的人群之间跌倒损伤率的差异也具有统计学意义。将上述危险因素进行logistic回归分析,长期居住地为城市(OR=1.399,95%CI 1.127～1.736)、饮酒(OR=1...     

《中华人民共和国药典》（2020年版）中含土鳖虫成方制剂的归纳分析

目的 归纳分析《中华人民共和国药典》（2020年版）（以下简称《药典》）中含土鳖虫的成方制剂,以期为土鳖虫制剂的临床应用、深度开发及剂型改良提供参考。方法 查阅《药典》,搜集其中含有土鳖虫的成方制剂,整理分析中药味数及剂量、药物剂型、制备方法、药物配伍、临床主治及注意事项等。结果 《药典》中收载含土鳖虫的成方制剂共34种,除参松养心胶囊外,其余33种制剂均列出味数,出现频率最多的含11～15味中药,6～10味和16～20味中药次之。剂型以胶囊剂（11种）为主,服用方式几乎均为口服用药。制备方法大部分以粉碎成细粉（包含最细粉、极细粉）直接入药。临床主要用于跌打损伤。与土鳖虫配伍组成方剂的中药较多,共171种,包括植物药139种、动物药24种、矿物药8种。注意事项中出现最多的禁忌是妊娠患者用药。结论在应用含土鳖虫成方制剂的过程中应关注其不同剂型、制备方法、配伍关系对病症作用效果的差异。     

角蛋白18与剪切因子PSF相互作用介导PSF的膜易位并维持髓系白血病细胞的化疗敏感性

目的 鉴定多嘧啶结合蛋白相关的剪切因子(polypyrimidine tract-binding protein-associated splicing factor, PSF)在髓系白血病细胞内的伴侣蛋白,探讨PSF在敏感HL60细胞和耐药的HL60/DOX细胞中易位细胞膜的模式和机制.方法: 通过脂质体瞬时转染PSF真核表达载体过表达PSF,进一步结合流式细胞术在转染后24 h,48 h,72 h检测PSF在细胞膜上的表达水平.构建链亲和素结合肽(streptavidin binding peptide,SBP)和PSF的融合表达载体,转染载体,过表达SBP-PSF融合蛋白.通过链亲和素磁珠共沉淀法和质谱分析,鉴定PSF在细胞内的伴侣蛋白.在慢病毒载体中插入角蛋白18 (cytokeratin 18,K18)干扰序列,转染293T细胞制备病毒液.用慢病毒感染HL60和HL60/DOX细胞,获得稳定干扰K18的细胞株.结合流式细胞术检测干扰K18的HL60和HL60/DOX细胞中细胞膜上PSF的表达水平,由此证实CK18在HL60和HL60/DOX细胞中协同转运PSF易位细胞膜机制的异同.结果: 瞬时过表达PSF后的24 h,48 h,72 h连续3 d检测细胞膜PSF表达水平,HL60敏感株细胞膜上PSF表达率分别为22.4%±3.5%, 37.9%±6.0%, 58.3%±8.8%;耐药株HL60/DOX细胞膜上PSF的表达率分别为4.7%±0.5%, 3.9%±0.6%, 2.9%±0.6%;各时间点下敏感株和耐药株的差异有统计学意义,P<0.01.免疫共沉淀和质谱证实K18为PSF在细胞内的伴侣蛋白.干扰K18的表达后,再次分析细胞膜PSF表达,发现PSF在敏感株细胞膜上的表达水平由原来的48.9%±5.4% 降至6.2%±1.0%;在耐药株细胞膜上的表达水平由9.11%±1.2%降至2.21%±0.51%.结论: K18是PSF在细胞内的伴侣蛋白,在敏感细胞中,K18与PSF相互作用可帮助PSF向细胞膜转运;而在耐药株中,由于该功能障碍导致PSF在胞内发生积累从而介导耐药性.     

棕榈酰化蛋白质组学分析揭示前列腺癌细胞中雄激素促进代谢相关蛋白棕榈酰化修饰

目的 筛选棕榈酰化修饰水平受雄激素诱导的蛋白,探索前列腺癌去雄激素治疗外其他潜在的治疗靶点.方法: 以LNCaP细胞为研究对象,雄激素(Methyltrienolone,R1881,5 nmol/L)或DMSO(dimethyl sulfoxide)处理LNCaP细胞24 h,同时利用人工合成的炔基棕榈酸Alk-C16 (100 μmol/L)对细胞进行代谢标记,收集细胞,裂解,提取总蛋白,加入标记有叠氮化物的琼脂糖珠 (1 mmol/L), 室温反应1 h,利用叠氮化物与Alk-C16末端炔基发生点击化学反应形成的共价键将棕榈酰化修饰蛋白富集在琼脂糖珠上,进行蛋白质谱非标记定量分析(label-free quantitation, LFQ), 比较R1881处理和非处理细胞蛋白棕榈酰化修饰变化情况,筛选棕榈酰化修饰水平受雄激素诱导的蛋白.结果: 实验共鉴定出907个潜在的棕榈酰化修饰蛋白(mascot score> 2, P<0.05), 其中有430个蛋白LFQ值至少有2次不为0.在这430个蛋白中有92个蛋白R1881处理与非处理样品LFQ比值大于 1.5(P<0.05), 说明雄激素能够显著促进该蛋白棕榈酰化修饰.利用Cytoscape软件对92个蛋白进行功能富集分类,发现已知功能蛋白可分为代谢相关,蛋白折叠相关和翻译起始相关3类,其中,代谢相关蛋白包括脂代谢(6个),糖代谢(7个)和呼吸电子传递链(8个)3部分,另外还有少量氨基酸代谢(2个)和其他代谢相关蛋白(2个).参与呼吸电子传递链的细胞色素b-c1复合体亚基2 (cytochrome b-cl complex subunit2, UQCRC2) 雄激素R1881处理和未处理样品LFQ比值最高(>3,P<0.05),说明该蛋白棕榈酰化修饰受雄激素诱导最为明显.LFQ比值最高为UQCRC2,其次为脂代谢相关的长链特异性酰基辅酶A脱氢酶(very long-chain specific acyl-CoA dehydrogenase, ACADVL)和糖代谢相关的6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-phosphogluconate dehydrogenase, PGD), 但其LFQ比值均未超过3.结论: 代谢尤其是呼吸电子传递链相关蛋白的棕榈酰化调控机制的研究可能将为前列腺癌的诊疗和靶向药的研发提供新的指导思路.     

CYP2C9新变异体A149V的发现及药物代谢活性研究

目的 研究中国汉族人群中发现的CYP2C9新变异体A149V的药物代谢活性。方法 随机采集2018年北京医院心内科住院患者血样并采用磁珠法抽提基因组DNA,PCR扩增CYP2C9基因启动子区及9个外显子区用于基因分型。体外构建双表达杆状病毒载体pFastBac-OR-CYP2C9,转染DH10Bac大肠杆菌获得杆粒,使用昆虫系统表达CYP2C9及CYPOR,并进行Western blot法验证。采用差速离心法制备CYP2C9微粒体,使用3种探针药物进行体外酶活性研究。结果 513例样本中检测到一种新的CYP2C9突变446C>T,可导致CYP2C9第149位氨基酸由丙氨酸被缬氨酸替换(A149V)。利用昆虫表达系统成功获得了新变异体A149V及典型CYP2C9变异体的微粒体,Western blot法检测结果显示,A149V的氨基酸替换并不会影响CYP2C9酶的表达水平。体外药物代谢活性数据显示,新变异体A149V对3种探针药物甲苯磺丁脲、双氯芬酸和氯沙坦的清除率分别是野生型的17.90%、24.73%和5.54%。结论 中国汉族人群中发现的CYP2C9新变异体A149V为慢代谢...