手术治疗老年退变性腰椎管狭窄症早中期疗效分析

目的探讨手术减压治疗退变性腰椎管狭窄症的早中期疗效。方法筛选35例经保守治疗无效、退变性腰椎管狭窄症患者。25例行全椎管彻底减压和神经根松解,应用椎弓根内固定,植骨融合;10例行单纯后路减压。结果全组随访12-36月,平均16月。术前Oswestry评分,平均（61.56±3.66）分;术后随诊Oswestry评分,平均（16.25土5.26）分,相比有明显改善（P〈0.001）。结论严格掌握手术指征,手术减压治疗老年退变性腰椎管狭窄症早中期疗效满意,远期疗效待观察。     

人骨形态发生蛋白2与血管内皮生长因子165双基因真核表达质粒的构建及体外表达

目的：构建人骨形态发生蛋白2与血管内皮生长因子165双基因真核表达质粒。方法：实验于2005-03／2005—10在华中科技大学同济医学院公共实验平台完成。①通过聚合酶链反应对pcDNA3．1-BMP2及pUC-CAGGS-VEGF165的目的基因片段亚克隆并引入新的酶切位点，将其分别定向连人真核双表达载体pIPES，构建同时表达两个目的基因的双顺反子，通过聚合酶链反应、酶切分析及DNA序列测定鉴定重组质粒。②重组质粒经脂质体介导体外转染小鼠骨髓基质细胞，通过反转录-聚合酶链反应检测骨形态发生蛋白2及血管内皮生长因子165mRNA的表达。结果：①pIRES-BMP2-VEGF165双基因表达质粒的构建和鉴定：将重组质粒pIRES-BMP2-VEGF165分别作XhoⅠ／MluⅠ和Xba Ⅰ／NotⅠ双酶切，经10g／L琼脂糖凝胶电泳可见1．2kbp的人骨形成蛋白2条带和592bp的血管内皮生长因子165条带，酶切条带与聚合酶链反应产物电泳带处于相同位置。经聚合酶链反应、酶切分析及DNA序列测定证实，目的基因插入片段方向正确，DNA序列无突变。②骨形成蛋白2、血管内皮生长因子165mRNA的表达：以转染pIPES空质粒为阴性对照，48h后提取转染细胞的RNA分别用P1，P2和P3，P4作为引物进行反转录一聚合酶链反应。结果表明转染pIPES-BMP2-VEGF165的小鼠骨髓基质细胞扩增出1．2kbp及592bp两条带。证实该重组质粒能在体外同时表达骨形态发生蛋白2及血管内皮生长因子165 mRNA。结论：成功构建了可同时表达骨形态发生蛋白2及血管内皮生长因子165的双基因真核表达质粒，为进行联合基因治疗骨缺损的实验研究奠定了基础。     

汉防己甲素预防椎板切除术后硬膜外粘连

目的：观察汉防己甲素对预防椎板切除术后硬膜周围瘢痕粘连的作用。方法：实验于2005—08／10在贵阳医学院动物实验中心完成动物实验，光镜观察完成于贵州省人民医院病理科，电镜观察在贵州师范大学电镜中心完成。①30g/L汉防己甲素制备：用0．1mol／L的HCl30mL将3．0g980g／L汉防己甲素（杭州中香化学有限公司）充分溶解，再以0．1mol／L的NaOH反滴定至pH值5．5，最后以生理盐水（pH=5．5）定容至100mL，4℃保存备用。②40只成年大白兔采用随机数字法分为4组，每组10只。将兔行L3节段椎板切除术，形成一处10mm&;#215;5mm的硬脊膜裸露区。生理盐水组：予0．5mL生理盐水覆盖；明胶海绵组：予明胶海绵覆盖；汉防己甲素组：予0．5mL汉防己甲素覆盖；汉防己甲素＋明胶海绵组：予浸湿汉防己甲素的明胶海绵覆盖。③术后2，4，8周取材作大体、光镜、透射电镜观察；8周行硬膜外粘连分级及计算机图像分析。结果：40只大白兔全部进入结果分析。①瘢痕生长情况：大体、光镜、电镜观察生理盐水组及明胶海绵组硬膜外瘢痕粘连日趋明显。汉防己甲素组及汉防己甲素＋明胶海绵组炎性细胞渗出较少，成纤维细胞较少，胶原纤维形成较少，硬膜外瘢痕无粘连。②瘢痕面积和粘连长度／硬膜周长比值测定：生理盐水组两项指标均大于汉防己甲素组、汉防己甲素＋明胶海绵组[（0.237&;#177;0．004），（0.087&;#177;0.004），（0.099&;#177;0．006）mm。；0．201&;#177;0．006，0．059&;#177;0．024，0．063&;#177;0．008；P〈0.01]；明胶海绵组上述两指标也大于汉防己甲素组、汉防己甲素＋明胶海绵组（P〈0．01）；而生理盐水组和明胶海绵组，汉防己甲素组和汉防己甲素＋明胶海绵组间则差异无显著性（P〉0．05）。结论：汉防己甲素可以有效地预防椎板切除术后硬膜外瘢痕粘连的形成。     

人骨形成蛋白2真核表达载体的构建和体外表达

背景：骨形态发生蛋白2（bone morphogenetic protein2，BMP-2）是已知的所有生长因子中对骨的形成作用最强的生长因子，被认为是最具有前途的骨诱导物质。目的：构建人骨形成蛋白2真核表达载体并观察其体外表达情况。设计、时间及地点：自身对照实验，于2005-07／2006-05在华中科技大学同济医学院分子生物中心实验室完成。材料：pcDNA3．1（＋）载体由华中科技大学同济医学院左石博士惠赠；成骨肉瘤组织由华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科提供。方法：从人成骨肉瘤细胞中提取细胞总RNA，利用反转录．聚合酶链反应方法扩增获得人BMP-2基因cDNA，将基因片断重组到pGEM-T质粒中构建pGEM．T-hBMP-2重组质粒载体，转化到大肠杆菌DH5n后筛选阳性克隆，利用限制性酶切和DNA序列分析鉴定重组质粒。分别用RcoRI和NotI双酶切pGEM-T-hBMP-2质粒和pcDNA3．1真核表达载体，将克隆载体中人骨形成蛋白2基因重组到pcDNA3．1真核表达载体，提取质粒作酶切电泳、聚合酶链反应鉴定及DNA测序后，用脂质体体外转染小鼠骨髓基质细胞，反转录-聚合酶链反应检测BMP．2的表达。主要观察指标：①人骨肉瘤细胞总RNA反转录-聚合酶链反应结果。②重组质粒pGEM．T-hBMP-2和pcDNA3．1-hBMP-2的构建和酶切鉴定。③BMP-2在小鼠骨髓基质细胞内的表达。结果：人骨肉瘤细胞总RNA经反转录-聚合酶链反应扩增后，获得1．2kb条带。经酶切电泳、聚合酶链反应鉴定及DNA测序证实实验成功克隆BMP-2基因，重组质粒pcDNA3．1-hBMP-2构建正确；该重组质粒能在体外培养的小鼠骨髓基质细胞中有效表达BMP-2。 结论：实验成功克隆人骨形成蛋白2基因并构建了此基因的真核表达载体。     

人工膝关节置换治疗重症膝关节病118例

选择2000-06/2007-01贵州省人民医院骨科收治的行人工全膝关节置换患者118例(138膝),男45例,女73例;年龄52～81(61±8)岁;类风湿性关节炎28例(34膝),创伤性关节炎6例(6膝),严重骨性关节炎84例(98膝),其中合并外翻畸形14例(18膝),合并内翻畸形25例(28膝).所选假体类型Link Gemini假体38膝,Zimmer Nexgen 68膝,Depuy pfc sigma旋转平台32膝.全部患者均获得随访,随访时间10个月～6 年(平均28个月).置换前膝关节HSS评分(34.00±7.65)分,末次随访时 (81.00±6.89)分,其中优87膝(63%),良43膝(31%),可8膝(6%),优良率94%.118例患者中发生感染4例,3例单膝置换后下肢发生深静脉血栓形成,经抗凝及对症处理痊愈.3例(4膝)置换后2个月发生膝关节疼痛,检查膝关节无红肿,无压痛,活动度基本正常,摄X射线平片示假体位置良好,行股神经封闭后症状缓解.提示全膝关节置换是治疗重症膝关节疾病的有效方法.     

改良法制备异种脱蛋白骨体内植入修复骨缺损的免疫学分析

背景:在支架材料选择中,目前尚未完全解决异种骨的免疫原性问题.目的:观察改良法制备异种脱蛋白骨作为组织工程支架材料修复骨缺损后机体的免疫学改变.方法:SPF级青山羊18只,随机分为3组,正常骨组不截骨,自体骨组、异种脱蛋白骨组在羊右侧胫骨中下段造成胫骨总长度20%骨膜和骨缺损.自体骨组在缺损处植入羊自体骨;异种脱蛋白骨组培养收集羊自体骨髓间充质干细胞,调整细胞数为1×109L-1,将2 mL细胞悬液接种于以猪股骨为原料改良制备的猪脱蛋白骨上,再加入重组人骨形成蛋白2,半环槽外固定.采用流式细胞仪进行CD4+及CD8+T淋巴细胞、血清抗体IgG免疫学检测,以双能X射线测量仪分析骨缺损修复效果.结果与结论:异种脱蛋白骨组植入后3,7,14,28 d外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞的含量基本正常(P>0.05),血清抗体IgG水平略高于自体骨组(P>0.05);植入后24周骨密度、骨矿物含量与自体骨组基本相似(P>0.05),表现为骨缺损区两断端之间高密度钙化影.3组抗压缩压强及极限压强、抗弯曲载荷及极限载荷、抗扭转转矩及极限转矩均基本相似(P>0.05).植入后24周与自体骨组比较,异种脱蛋白骨组的成骨能力无明显差异(P>0.05).提示改良法制备的异种脱蛋白骨不引起明显的细胞和体液免疫反应,有良好的组织相容性,不影响自体骨髓间充质干细胞成骨,新骨生物力学性能与自体骨相当.     

应用Nexgen LPS-Flex人工膝关节置换治疗重度膝关节退行性骨关节病126例的早期效果

背景:以往膝关节置换后患者不能获得高度屈曲度,这与假体及患者因素有关。目的:观察为膝关节高度屈曲而设计的Nexgen-LPS-Flex人工膝关节置换治疗重度膝关节退行性骨关节病的早期疗效。方法:回顾性分析重度退行性膝关节骨关节病126例(173膝)接受Zimmer高屈曲后稳定(Nexgen-LPS-Flex)人工膝关节置换的相关数据。结果与结论:126例173个膝关节置换时间为(78.2±13.5)min。股胫角为外翻5°～7°,关节活动范围置换前为(78.4±10.6)°,置换后为(112.8±18.6)°。置换前HSS评分为(32.4±12.0)分,出院时为(87.9±10.9)分(P<0.01)。4例(4膝)切口愈合障碍;确诊下肢深静脉血栓3例,均行介入治疗康复出院;1例出现伸膝滞缺,无神经血管损伤发生,无感染、骨折、假体松动、脱位等并发症。结果表明,Nexgen LPS-Flex人工膝关节置换治疗重度膝关节退行性骨关节病早期未发现有骨溶解、假体松动及衬垫严重磨损等并发症。     

应用Nexgen LPS-Flex人工膝关节置换治疗重度膝关节退行性骨关节病126例的早期效果

背景：以往膝关节置换后患者不能获得高度屈曲度,这与假体及患者因素有关。目的：观察为膝关节高度屈曲而设计的Nexgen-LPS-Flex人工膝关节置换治疗重度膝关节退行性骨关节病的早期疗效。方法：回顾性分析重度退行性膝关节骨关节病126例（173膝）接受Zimmer高屈曲后稳定（Nexgen-LPS-Flex）人工膝关节置换的相关数据。结果与结论：126例173个膝关节置换时间为（78.2±13.5）min。股胫角为外翻5°～7°,关节活动范围置换前为（78.4±10.6）°,置换后为（112.8±18.6）°。置换前HSS评分为（32.4±12.0）分,出院时为（87.9±10.9）分（P〈0.01）。4例（4膝）切口愈合障碍;确诊下肢深静脉血栓3例,均行介入治疗康复出院;1例出现伸膝滞缺,无神经血管损伤发生,无感染、骨折、假体松动、脱位等并发症。结果表明,Nexgen LPS-Flex人工膝关节置换治疗重度膝关节退行性骨关节病早期未发现有骨溶解、假体松动及衬垫严重磨损等并发症。     

多孔聚乙烯醇/明胶软骨组织工程支架复合材料的制备及其生物相容性☆

背景：以明胶为基体制备的组织工程支架材料具有良好的生物相容性和生物降解性能,但存在力学性能低,降解速率难以控制的缺陷。 目的：制备一种软骨组织工程支架材料多孔聚乙烯醇/明胶复合物,并检测其理化性能和生物相容性。 方法：采用乳化发泡法制备聚乙烯醇/明胶多孔支架,并通过电镜分析、力学测试、皮下植入实验,检测材料孔径和孔隙率、IR光谱、力学性能和生物相容性。 结果与结论：多孔材料内部呈三维网状多孔结构,孔径均匀,有相似的孔隙率61.8%,含水率44.6%,抗拉强度为(5.01± 0.03) MPa,抗压强度为(1.47±0.36) MPa,有较好的力学性能,IR光谱分析表明材料内部结构均匀。皮下植入后,炎症反应逐渐减轻,囊壁逐渐变薄,并趋于稳定,提示多孔聚乙烯醇/明胶支架材料具有较好的生物相容性和力学性能。