椎管内麻醉后麻醉平面客观指标的临床研究

目的利用热成像技术，对比20例临床择期下肢手术麻醉前后的皮肤温度变化，探讨以皮肤表面温度变化作为确定麻醉区域客观指标的临床意义。方法随机选取20例择期下肢手术病人，分别观察麻醉区域内同一点麻醉施行前后的皮肤表面温度及红外线扫描图像的变化。结果麻醉区域内麻醉施行后皮肤表面温度显著升高，红外线图像有明显变化，可将皮肤温度作为确定麻醉区域的客观指标。结论基于人体细胞新陈代谢产生热量不一，利用红外线热成像技术，对麻醉平面提供定性依据。     

N-甲基-D-天门冬氨酸受体2B亚基抗原表位DNA疫苗免疫大鼠的效应

目的 采用N-甲基-D-天门冬氨酸受体2B亚基抗原表位(eNg2B)插人质粒载体pDC515中制备的DNA疫苗(pDC515/eNR2B)免疫大鼠,评价其免疫效应.方法 成年雄性SD大鼠40只,体重200～250 g,随机分为4组:对照组(C组)、PBS组、pDC515组和pDC515/eNR2B组,每组10只.PBS组、pDC515组和pDC515/eNR2B组分别肌肉注射PBS 100 μl、pDC515 100 μg和pDC515/eNR2B 100 μg进行免疫,1周后以等剂量再次免疫.于第1次免疫前、第2次免疫后8、14、21 d时,截尾法采集尾静脉血,分离血清,ELISA法检测NR2B抗体水平.于第2次免疫后21 d时处死大鼠取脊髓,分别采用免疫组织化学法和Western blot法检测NB2B抗体与自身腰段脊髓组织NR2B特异性结合情况.结果 第2次免疫后8 d,pDC515/eNR2B组血清中可检测到NR2B抗体,14 d时达高峰,并高滴度持续至21 d(P＜0.05);C组、PBS组和pDC515组均未检测到相应NR2B抗体;免疫组织化学法和Western blot法检测到pDC515/eNR2B组血清NR2B抗体可与自身脊髓组织NR2B结合.结论 pDC515/eNR2B可诱导SD大鼠产生体液免疫反应,所产生的自身抗体在血液中可高滴度存在一定时间.     

丙泊酚对大鼠缺血再灌注肾NF-κB、TNF-α表达的影响

目的 研究丙泊酚对大鼠肢体缺血再灌注损伤后肾组织中肿瘤坏死因子-α（tumornecrosisfactor-α,TNF-α）、核因子-κB（nuclear factor-κxB,NF-κB）表达的影响。方法 24只SD雄性大鼠,随机分为假手术对照组（A组）,肢体缺血再灌注组（B组）和丙泊酚干预组（C组）,每组8只。采用免疫组织化学方法检测TNF-α、NF-κB的表达,行图像分析半定量。结果 B组大鼠肾组织中TNF-α、NF-κB的表达明显高于A组（P〈0．05）,C组明显低于B组（P〈0．05）。结论 肢体缺血再灌注后有明显肾损伤,丙泊酚对肢体缺血再灌注肾损伤有一定程度的保护作用,其机制可能与下调大鼠肢体缺血再灌注损伤肾组织中TNF-α、NF-κB的过度表达有关。     

孤啡肽对大鼠离体心脏功能的调节作用及其对去甲肾上腺素诱发心脏功能变化的影响

Objective To investigate the effects of orphanin FQ (OFQ) on simple and norepinephrineactivated cardiac function in isolated rat heart.Methods Male SD rats aged 3-4 months weighing 250-280 g were anesthetized with intraperitoneal 25% urethane 1.4-1.8 ml.Their hearts were excised and passively perfused with K-H solutionin a Lanngendorff apparatus.A fluid-filled latex balloon was inserted into left ventricle for measurement of developed pressure.Left ventricular systolic pressure(LVSP),left ventricular end-diastofic pressure(LVEDP),left ventricular developed pressure(LVDP=LVSP-LVEDP),HR and±dp/dtmax were measured.Sixty isolated rat hearts were randomly divided into 10 groups(n=6 each):Ⅰ control group (group C);Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ OFQ1,OFQ2,OFQ3 group--OFQ 10-6,10-7,10-8 mol/L were administered via perfusion system respectively;Ⅴ OFQ+UFP group--OFQ 10-6 mol/L+UFP-101 (all OFQ antagonist) 10-6 mol/L were administered;Ⅵ NE group--norepinephrine 10-5 mol/L;Ⅶ,Ⅷ,Ⅸ NE+OFQ groups--NE 10-5 mol/L+OFQ 10-6,10-7,10-8 mol/L were administered respectively;Ⅹ NE+OFQ+UFP group--NE 10-5 mol/L+OFQ 10-6mol/L+UFP-101 10-6mol/L.Results LVSP,LVDP and±dp/dtmax were significantly increased while HR was significantly decreased in the 3 OFQ groups as compared with control group.LVSP,LVDP±dp/dt max and HR were significantly increased in the 3 NE+OFQ groups as compared with NE group.Conclusion OFQ has positive inotropic action and negative chronotropic effect on the isolated rat heart.OFQ Can enhance the positive inotropic and chronotropic effect of NE on the heart.     

心肌及蛛网膜下腔NGF基因转染对1型糖尿病大鼠心脏损伤的保护作用

目的 探讨以重组腺相关病毒（rAAV）为载体,评价心肌点注射和蛛网膜下腔注射转导神经生长因子（NGF）基因对1型糖尿病大鼠心脏损伤的保护作用。方法 全实验包括两个子实验。实验一：将12只SPF级雄性SD大鼠采用随机数字表法分为2组（n=6）：对照组、糖尿病（DM）组,DM组大鼠通过注射链脲佐菌素（STZ）建立1型糖尿病模型,2组大鼠于注射STZ前1 d及后第1、2、4、6、8、9周测甩尾反射潜伏期,并在第9周时通过酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组织中的NGF、降钙素基因相关肽（CGRP）含量。实验二：24只SPF级雄性SD大鼠随机分为4组（n=6）：糖尿病心脏转染对照组（MC）组、糖尿病心脏转染（ME）组、糖尿病脊髓转染对照（SC）组、糖尿病脊髓转染（SE）组,采用2×2析因设计,4组糖尿病模型建模方法同DM组,成模后第4周,MC组和ME组以心脏点注射分别转染滴度为0.8×1013 μg/L携带绿色荧光蛋白（GFP）基因的重组腺相关病毒（rAAV9-GFP）和相同滴度的携带NGF基因的rAAV-GFP（rAAV9-NGF-GFP）,各100 μL;SC组和SE组以蛛网膜下腔注射分别转染滴度为0.8×1012 μg/L的rAAV2-GFP和相同滴度的rAAV2-NGF-GFP,各25 μL。5周后,测各组大鼠心功能指标。取心肌、T1-T5段脊髓及背根神经节组织,荧光显微镜下观察GFP的表达情况;采用ELISA测各组织中的NGF、CGRP含量。结果 实验一中,与对照组相比,DM组的甩尾反射潜伏期在第4周后明显延长（P＜0.05）,心肌组织中的NGF、CGRP明显下调（P＜0.05）。实验二中,心肌点注射法转染rAAV9-NGF-GFP可改善大鼠的各项心功能指标（P＜0.05）,上调心肌组织中NGF、CGRP蛋白含量（P＜0.05）;且实验过程中的转染物与转染途径之间存在交互效应,两者联用改善心功能和上调心肌组织中NGF、CGRP的效果更显著（P＜0.05）。结论 心肌点注射rAAV-NGF-GFP可以更有效地提高1型糖尿病大鼠心肌组织中NGF的表达,产生更有效的心脏保护作用。     

吗啡胸段硬膜外给药对急性心肌缺血诱发大鼠肺组织肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的 观察急性心肌缺血大鼠肺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达变化以及吗啡硬膜外给药的干预效应.方法 将健康成年雄性SD大鼠18只随机分为假手术组(S组)、结扎冠状动脉(冠脉)缺血组(CAO组)和吗啡预处理组(M组),每组6只.S组动物仅开胸,不结扎左冠脉前降支;CAO组动物开胸后结扎左冠脉前降支;M组动物在结扎左冠脉前降支前15 min经硬膜外注射吗啡60μg/kg.各组在开胸或扎闭左冠脉前降支后3 h开胸取右肺下叶,采用免疫组化、酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺组织中TNF-α表达变化.结果 免疫组化结果显示,与S组比较(8.68±0.29,1.609±0.050),CAO组(24.55±6.25,1.844±0.027)和M组(11.60±1.21,1.733±0.027)气管TNF-α阳性单位及平均吸光度(A)值均明显升高,而M组较CAO组明显降低,差异均有统计学意义(P均<0.01).ELISA结果显示:CAO组[(221.58±5.23)ng/L]和M组[(103.45±4.56)ng/L3肺组织TNF-α阳性免疫反应物质的表达水平均高于S组E(47.14±1.36)ng/L),且M组显著低于CAO组(P均<0.01).结论 急性心肌缺血能通过神经机制介导肺脏TNF-α表达上调;阿片类物质及其受体机制参与了机体内心脏伤害性神经信号转导的调节.     

抗CD14单克隆抗体对脓毒症大鼠肺组织趋化因子和可溶性细胞间黏附因子-1表达的影响

目的探讨抗CD14单克隆抗体(Anti-CD14Mc Ab)治疗大鼠脓毒症急性肺损伤的保护机制。方法在体部分:18只雄性Wistar大鼠(200~250 g)随机均分为3组,假手术组(Sham组)、脓毒症组(CLP组)和抗CD14治疗组(Anti-CD14组),CLP组和Anti-CD14组采用盲肠结扎穿孔术建立脓毒症急性肺损伤模型,Sham组作为对照组,开腹后只翻动盲肠,不进行结扎穿孔。Anti-CD14组术后经股静脉注射Anti-CD14Mc Ab 0.2 ml(1μg/ml),Sham组、CLP组术后经股静脉注射等量生理盐水0.2 ml,6 h后经腹主动脉抽血,测定3组大鼠血浆中趋化因子(KC)和可溶性细胞间黏附因子-1(s ICAM-1)表达水平,右肺下叶HE染色,观察肺组织病理结构的改变。离体部分:将培养的NR8383一部分接种于24孔培养板,分为3组,对照组(Ⅰ组)、脓毒症模型组(Ⅱ组)和Anti-CD14干预组(Ⅲ组)。Ⅰ组加入正常血浆,Ⅱ组加入脓毒症血浆,Ⅲ组加入脓毒症血浆和Anti-CD14Mc Ab共同干预,37℃、5%CO2培养箱孵育1 h,刮取NR8383,采用Western blot测定NR8383内NF-κB(p65)蛋白的表达水平;另一部分接种在预先放入适当大小灭菌消毒的盖玻片的24孔板上,分组及干预措施同上,采用激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)检测NR8383内NF-κB(p65)蛋白入核情况。结果在体实验提示:(1)与Sham组[KC:(72.645±19.860)pg/ml;s ICAM-1:(252.766±19.921)pg/ml]相比,CLP组血浆KC、s ICAM-1水平[KC:(490.316±43.403)pg/ml;s ICAM-1:(686.952±36.411)pg/ml]和Anti-CD14组血浆KC、s ICAM-1水平[KC:(348.150±20.924)pg/ml;s ICAM-1:(411.050±47.170)pg/ml]明显升高,而Anti-CD14组KC、s ICAM-1水平明显低于CLP组,差异有统计学意义(P<0.05);肺组织病理结果提示CLP组肺间质明显增厚、肺间质及肺泡腔内有大量炎症细胞浸润,Anti-CD14组症状较CLP组明显减轻,但较Sham组有所增加;细胞实验Western blot检测显示:Ⅱ组(2.190 3±0.119 9)和Ⅲ组(1.365 8±0.101 8)NR8383的NF-κB(p65)入核量高于Ⅰ组(1.012 2±0.078 0),Ⅲ组的NF-κB(p65)入核量低于Ⅱ组,差别有统计学意义(P<0.05)。细胞实验CLSM检测结果提示:与Ⅰ组(0.131±0.009)相比,Ⅱ组(0.685±0.037)和Ⅲ组(0.210±0.008)NR8383 NF-κB(p65)蛋白入核明显升高,而Ⅲ组NR8383 NF-κB(p65)蛋白入核低于Ⅱ组(0.685±0.037),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Anti-CD14Mc Ab在脓毒症急性肺损伤时可能调控肺泡巨噬细胞NF-κB(p65)蛋白入核,使其KC表达减少,进而减少中性粒细胞浸润,起到肺保护作用;同时Anti-CD14Mc Ab能抑制内皮细胞表达s ICAM-1,减少中性粒细胞对内皮细胞的黏附作用,起到肺保护作用。     

围术期糖尿病患者血清孤啡肽含量的变化

目的观察糖尿病患者围术期血清孤啡肽(N/OFQ)含量的变化。方法选取山西医科大学第二医院2019年5～8月在蛛网膜下腔阻滞下行单侧膝关节置换术的患者66例,分为糖尿病组(D组,n=33)与非糖尿病组(N组,n=33),纳入年龄60～69岁,性别不限, ASA分级Ⅰ或Ⅱ级。测定麻醉前30 min (T_0)、手术1 h (T_1)、手术结束24 h (T_2)血糖值、血清N/OFQ的浓度、中性粒细胞计数(NEUT)和中性粒细胞百分比(NEU%)。结果 D组T_0血糖值、血清N/OFQ浓度、 NEUT、 NEU%明显高于N组(P0.05)。D组T_0到T_1血糖及血清N/OFQ升高幅度比N组大, N组T_0到T_1血液NEUT及NEU%升高幅度高于D组(P0.05)。两组T_0到T_1血清N/OFQ分别与血糖、 NEUT、 NEU%变化趋势正相关(P0.05)。两组T_0到T_2血糖、血清N/OFQ浓度、 NEUT、 NEU%升高幅度差异无统计学意义(P0.05)。结论糖尿病患者血清N/OFQ含量升高可能与炎症有关。     

丙泊酚对奥沙利铂抗人胃癌BALB/c小鼠移植瘤作用的影响

目的 探讨丙泊酚对奥沙利铂在人胃癌BALB/c小鼠移植瘤模型中抗肿瘤作用的影响.方法 建立人胃癌MGC 803细胞BALB/c小鼠皮下移植瘤模型,随机分为对照组(n=6)、丙泊酚组(n=6,5 mg/kg丙泊酚)、奥沙利铂组(n=6,6 mg/kg奥沙利铂)与丙泊酚+奥沙利铂组(n=6,5 mg/kg丙泊酚+6 mg/...     

大鼠冠状动脉扎闭后丘脑束旁核神经元放电活性及脑啡肽表达的变化

心肌缺血引发的心绞痛在中枢神经系统的感受及其调制的机理尚未完全明了。丘脑是机体内重要的痛觉调制、整合中枢，与急性心肌缺血相关的丘脑束旁核神经元脑啡肽表达尚无定论。本研究旨在观察扎闭冠状动脉大鼠丘脑束旁核(Pf)痛敏神经元(PSN)的放电反应，并且以此为标志观察PSN脑啡肽表达的变化，探讨Pf脑啡肽对心肌缺血性伤害性感受(内脏痛)的调制作用。