Time-effect of adaptive response of mouse thymocyte apoptosis and cell cycle progression induced by low dose radiation

目的 :观察低剂量辐射 (LDR)诱导胸腺细胞凋亡及细胞周期进程适应性反应的基本规律。方法 :用 X射线照射昆明系雄性小鼠 ,其诱导剂量 (D1)及其后攻击剂量 (D2 )分别是 75m Gy和 1.5Gy。D1和 D2 间隔时间分别是 3、6、12、2 4和 6 0 h。D2 照射后 18h胸腺细胞培养 4、2 0和 4 4 h用流式细胞仪检测胸腺细胞凋亡小体 (TAB)和细胞周期进程的变化。结果 :当 D1和 D2 间隔 3、6和 12 h,在 D2 照射后胸腺细胞培养 4和 2 0 h,D1+ D2 组 TAB百分数明显低于 D2 组 (P<0 .0 5) ,G0 / G1和 G2 + M期细胞百分数也不同程度地低于 D2 组 ,而 S期细胞百分数却明显高于 D2 组 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1)。结论 :D1和D2 分别是 75m Gy(剂量率 ,12 .5m Gy/ min)和 1.5Gy(剂量率 ,0 .2 87Gy/ min) ,D1和 D2 间隔 3～ 12 h,在小鼠全身照射后其胸腺细胞培养 4和 2 0 h可诱导细胞凋亡和细胞周期进程的适应性反应。     

低剂量辐射对小鼠胸腺细胞成熟、分化、凋亡和激活的影响

目的研究低剂量辐射对胸腺细胞成熟、分化、激活和细胞凋亡及有关基因蛋白表达的影响，以揭示低剂量辐射免疫增强效应的发生机理。方法采用双参数直接免疫荧光和间接免疫荧光流式细胞术，检测了低剂量辐射小鼠全身照射后胸腺细胞ＣＤ４、ＣＤ８、ＴＣＲ、ＣＤ３、ＩＬ－２Ｒ、［Ｃａ２＋］ｉ、Ｂｃ１－２、Ｂａｘ的表达和细胞凋亡。结果实验结果表明：低剂量辐射全身照射未引起ＴＳ减少和ＴＨ／ＴＳ比值上调；低剂量辐射未增加胸腺细胞凋亡，这与Ｂｃｌ－２／Ｂａｘ比值上调有关；低剂量辐射促进了胸腺细胞的成熟分化和信息传递过程。结论以上结果提示：低剂量辐射促进胸腺细胞的成熟、分化和激活，使胸腺向外周输送成熟的具有功能活性的效应性Ｔ细胞的储备增强，可能是低剂量辐射免疫增强效应的重要机理。     

X射线对小鼠胸腺细胞凋亡的影响

采用荧光分光光度法对裂解ＤＮＡ进行定量，并用琼脂糖凝胶电泳法定性研究Ｘ射线全身照射后小鼠胸腺细胞凋亡。结果表明，４ＧｙＸ射线照后２小时胸腺细胞凋亡开始增加，于照后１４小时达峰值，尔后呈下降趋势。ＤＮＡ裂解率在照后２４小时降至１４小时的５０％，这可能是内环境中巨噬细胞吞噬凋亡小体所致。在照射后１４小时研究其剂量－效应关系发现，高剂量照射使ＤＮＡ裂解明显增多，形成１８０ｂｐ（ｂａｓｅｐａｉｒｓ）左右或其整倍数的ＤＮＡ断片，电泳呈现＂梯形图谱＂；而低剂量辐射可使ＤＮＡ裂解率降低。剂量－效应曲线呈Ｊ型。     

低剂量辐射对小鼠睾丸生精细胞中细胞色素c和caspase-3表达的影响

目的 研究低剂量电离辐射对小鼠睾丸生精细胞细胞色素c（Cytc）和caspase-3蛋白表达的影响。方法 采用免疫组化法（SABC法），观察低剂量X射线照射后，小鼠睾丸各类生精细胞Cytc和caspase-3表达的剂量与时程效应关系。结果 0、0.025、0．05、0．075、0．1和0.2Gy照射后12h，小鼠睾丸各类生精细胞不同程度表达Cyt c和caspase-3，以精原细胞和精母细胞表达为主，精于细胞和精于则表达相对较少，而且，随着剂量的增加，表达也增多。0．075Gy照射后。两种蛋白的表达开始随时间推移而增强，12h达到峰值，然后下降，但仍高于正常组。结论低剂量电离辐射诱导小鼠睾丸生精细胞Cytc和caspase-3蛋白的表达具有一定的剂量和时程效应规律性。     

精神分裂症与染色体22q11的连锁不平衡研究

目的 探讨染色体22q11泛有素融合降解1型蛋白基因(UFD1L)和腭心面综合征缺失的核定位信号基因(NLVCF)多态性与精神分裂症的关系。方法 在138例吉林省汉族精神分裂症患者及其健康父母双亲的核心家系中，以聚合酶链反应(PCR)和限制性片段长度多态(RFLP)方法对UFDlL基因rs1547931(G／C碱基改变)和NLVCF基因rs1473109(C／T碱基改变)单核苷酸多态性(SNPs)进行检测。应用基于家系的连锁不平衡方法，包括单体型相对风险分析(HRR)，传递不平衡检验(TDT)及Transmit双位点单体型分析，分析基因型数据。结果 (1)HRR显示UFDlL基因rs1547931与精神分裂症有关联(χ^2=4．260，ν=1，P=0．039)，NLVCF基因rs1473109与精神分裂症无关联；(2)TDT显示UFDlL基因rs1547931与精神分裂症有连锁和关联(χ^2=5．333，ν=1，P=0．021)，NLVCF基因rs1473109与精神分裂症无连锁及关联；(3)Transmit双位点单体型分析显示rs1547931-rs1473109单体型与精神分裂症有关联(χ^2=9．723，ν=3，P=0．021)，rs1547931(C)-rs1473109(T)单体型与精神分裂症呈负相关(χ^2=6．607，ν=1，P=0．01)。结论 精神分裂症患者UFD1L基因本身或其附近的基因可能与精神分裂症的易感性相关。     

含金属硫蛋白蛋奶粉对辐射损伤的防护作用

目的研究含金属硫蛋白（metallothionein，MT）蛋奶粉对小鼠电离辐射损伤的防护作用。方法受试小鼠连续灌胃含MT蛋奶粉14d后给予2．5GyX射线照射，24h后处死小鼠，检测其外周血白细胞数、淋巴细胞增殖率、股骨骨髓细胞DNA含量、胸腺细胞周期进程以及血液、肝脏和肾脏丙二醛（MDA）含量和抗氧化酶（SOD、CAT和GSH—Px）活性。结果受照射小鼠给予含MT蛋奶粉后，外周血白细胞数、淋巴细胞增殖率、股骨骨髓细胞DNA含量和肝脏、肾脏、血浆SOD、CAT和GSH—Px活性明显高于辐照对照组，而血液、肝脏和肾脏MDA含量明显降低。含MT蛋奶粉加照射组明显减轻了胸腺细胞G1期阻滞，促进其DNA合成。结论含MT蛋奶粉对小鼠辐射损伤具有防护作用。     

miR-503对辐射诱导U937细胞CD40表达的调控作用

目的 探讨miR-503在U937细胞中与CD40的靶向关系,并观察其对辐射诱导U937细胞CD40表达的调控作用。方法 将miR-503序列插入载体pcDNA-DEST-47中构建真核表达质粒;同时构建CD40基因3’-UTR-荧光素酶报告质粒,与pcDNA-DEST-miR-503质粒共转染至U937细胞,分析miR-503对其调控作用;同时用miR-203和miR-29b作为对照,观察miR-503对CD40的靶向作用。采用Western blot方法,证实miR-503对CD40蛋白表达的抑制作用及照射后U937细胞CD40蛋白表达变化;采用Real-Time PCR方法检测 5 Gy电离辐射照射后U937细胞miR-503表达量。结果 psiCHECK2-CD40和pcDNA-DEST-miR-503两种质粒共转染组的荧光素酶表达明显低于单独转染的空载体和靶基因CD40组(t=3.16,P<0.05),miR-203和miR-29b不能抑制CD40荧光素酶活性,而miR-503明显抑制CD40荧光素酶活性(t=5.25,P<0.01);转染pcDNA-DEST-miR-503质粒后在U937细胞中,靶基因CD40蛋白的表达受抑制。5 Gy电离辐射照射后,U937细胞中miR-503表达量上调(t=3.63~17.00,P<0.01),而CD40蛋白表达下降。结论 miR-503与CD40可能是靶向关系,并参与其调控作用。辐射上调人急性白血病细胞株U937细胞的miR-503的表达量,而且抑制CD40蛋白表达,说明miR-503可能参与辐射对肿瘤细胞CD40蛋白表达的调控作用。     

电离辐射对松果腺细胞功能的影响

目的研究电离辐射对松果腺细胞凋亡、cAMP和褪黑素(MLT)含量的变化规律及特点。方法采用流式细胞术检测松果腺细胞凋亡。采用放免分析法检测松果腺细胞中cAMP含量。采用高效液相色谱分析法检测松果腺细胞中MLT含量。结果小鼠受0．5～6Cy X射线全身照射12h，随剂量增加松果腺细胞凋亡百分率增加；照射后24h，随剂量增加松果腺细胞中cAMP含量降低。小鼠受1～6Cy照射后12h，随剂量增加松果腺细胞合成和分泌MLT功能减弱。结论高剂量电离辐射对松果腺细胞功能有抑制作用．     

枸杞抗辐射损伤作用

目的探讨枸杞抗辐射损伤的作用。方法将30只昆明小鼠随机分成3组,每组10只,正常对照组、辐射对照组生理盐水灌胃,枸杞组进行枸杞溶液灌胃,1次/d,连续7d。除正常对照组外,另2组动物均在灌胃结束后进行全身一次性照射,总剂量2.0Gy,然后检测外周白血细胞数、骨髓微核率和骨髓细胞增殖活性。结果枸杞组小鼠外周血白细胞（WBC）为（8.10±0.88）×10^9/L,骨髓嗜多染红细胞微核率为（2.61±0.34）‰,骨髓细胞增殖活性A值为0.34±0.07,各项指标与辐射对照组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论枸杞可以升高外周血白细胞数,降低微核率,提高骨髓细胞增殖活性,具有抗辐射损伤作用。     

蝎毒组分Ⅰ对卵巢癌细胞SKOV3生长的抑制作用

目的：观察蝎毒组分Ⅰ(SV-Ⅰ)对卵巢癌细胞SKOV3生长的抑制作用。方法：卵巢癌细胞SKOV3分为空白对照组和SV-Ⅰ处理组(终浓度分别为200、400、800 mg•L^-1)，采用MTT法检测SV-Ⅰ对卵巢癌细胞SKOV3生长抑制率，集落形成法检测肿瘤细胞增殖，流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡的变化。结果：200、400和800 mg•L^-1-1组, SKOV3细胞集落数分别为57.00±6.16和48.00±4.11，明显低于对照组（84.00±5.29）(P<0.01)；与空白对照组比较，400 mg•L^-1组SKOV3细胞S期细胞数明显减少（P<0.01），G₂+M期细胞明显增多 (P<0.01)， 800 mg•L^-1组SKOV3细胞G₂+M期细胞数明显减少（P<0.01），G₁期细胞数有增多趋势；与空白对照组比较，400 和800 mg•L^-1组SKOV3凋亡细胞数明显增加（P<0.01）。结论：在一定浓度范围内蝎SV-Ⅰ可明显抑制卵巢癌细胞SKOV3的生长，其机制与SV-Ⅰ抑制SKOV3细胞DNA合成、诱导SKOV3细胞发生G₂+M和G₁期阻滞及诱导SKOV3细胞凋亡有关。