一维和二维电泳分析斯氏狸殖吸虫成虫可溶性抗原

人不是斯氏狸殖吸虫的适宜宿主，幼虫寄生后可引起多种肺外型感染，病原学检查困难［1］，临床诊断主要依靠免疫学检查，除检测方法外,诊断用抗原的特异性是影响检测效果的关键因素。故分析和检测并殖吸虫的特异抗原组分，在并殖吸虫病的免疫诊断和抗原的分离纯化方面均具有重要意义。本文采用一维、二维电泳和免疫印迹技术分析斯氏狸殖吸虫成虫可溶性抗原，试图鉴别特异的、高免疫原性斯氏狸殖吸虫蛋白和多肽，为开发特异、敏感的免疫学诊断方法、研制抗斯氏狸殖吸虫药物和疫苗提供参考资料。     

斯氏狸殖吸虫成虫可溶性抗原蛋白质分析

目的分析和检测斯氏狸殖吸虫成虫可溶性抗原的特异抗原组分,为建立特异、敏感的免疫学诊断方法、研制抗斯氏狸殖吸虫药物和疫苗提供理论基础。方法用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、双向电泳(Two-dimension-al gel electrophoresis,2-DE)和免疫印迹(Western blot)等方法,对斯氏狸殖吸虫成虫可溶性抗原进行分析。结果SDS-PAGE分离出22条蛋白带,其中主带8条,分子质量单位为13~64 ku,未见65 ku以上条带。Western blot显示20条显色带,主带6条,分子质量单位分别为13、18、22、28、35和64 ku。2-DE电泳分离出斯氏狸殖吸虫成虫可溶性抗原48个多肽斑点,分子质量单位为14~70 ku,绝大部分分布于pI 3.10~7.14,少数分布于pI 8.78~9.85,在pI 7.14~8.78之间几乎未见多肽斑点。Western blot分析出其中的10个主要多肽斑点能被斯氏狸殖吸虫病患者血清识别,大部分为集中在酸性区域的小分子多肽。结论斯氏狸殖吸虫成虫可溶性抗原经SDS-PAGE电泳分离出的22条蛋白带中,有6条蛋白含量较高,能被斯氏狸殖吸虫病患者血清识别。2-DE电泳分离出的48个多肽斑点中,有10个含量较高,能被斯氏狸殖吸虫病患者血清识别,大部分为偏酸性的小分子多肽。     

疟原虫动合子入侵按蚊中肠激活的先天性免疫防御反应

在观察疟原虫 -蚊媒相互作用的过程中 ,发现一些很有趣的现象。经遗传选育的两个冈比亚按蚊抗性株 ,一个株系可通过黑化包被反应杀死入侵按蚊中肠上皮细胞的疟原虫动合子 ,另一个株系可将入侵中肠的动合子溶解。在疟原虫易感蚊株中也可见到通过尚未明白的机制使移行发育的疟原虫明显减少 [1,2 ]。摄入中肠的配子体细胞中仅有少部分可发育为成熟的动合子 ,只有少部分动合子能穿过中肠上皮细胞后继续发育为卵囊。当卵囊发育成熟破裂时 ,最终仅有少部分子孢子释放出来进入唾液腺 [3,4 ]。出现以上这种情况的原因 ,很可能是通过激活蚊的先天性免…     

以问题为基础的学习在专科《病原生物学与免疫学》教学中的应用

目的 探讨以问题为基础的学习（problem-based learning,PBL）在专科学生《病原生物学与免疫学》教学中的效果.方法 以漯河医学高等专科学校2012级3年制临床医学专业1班为PBL实验组,2班为以授课为基础的学习（lecture-based learning,LBL）对照组,每组100人.分别采用PBL和LBL对“肝炎病毒”这一章节进行授课.利用章节测试和问卷调查评估教学效果,比较2种教学法的效果差异.采用SPSS 13.0软件进行统计学分析,结果以百分率表示,行X2检验.结果 从考试成绩显示,PBL实验组优秀率和及格率均明显高于LBL对照组（P=.000）,PBL实验组不及格率明显低于LBL对照组（P=0.000）.问卷调查的结果显示,80％以上的实验组学生认为PBL可以调动学习积极性、培养合作意识、提高语言表达能力等.结论 PBL应用于专科层次《病原生物学与免疫学》教学效果良好,值得推广.     

2011年南阳市结核病一线抗结核药物的耐药监测结果分析

目的:了解2011年南阳市结核分枝杆菌对四种一线抗结核药物的耐药情况,为南阳市结核病的防治提供科学依据。方法:依据耐药结核病规划管理指南(WHO),将2011年南阳市结核病防治所痰培养阳性的肺结核患者做为研究对象,对分离的结核分枝杆菌进行INH、RFP、SM、EMB四种一线抗结核药物敏感性测试。结果:共测定322株结核分枝杆菌的耐药性,其中196株有不同类型的耐药,对4种抗结核药物的耐药率由高到低依次为:RFP 41.3%,SM 36.6%I,NH 34.8%,EMB 23.3%,MDR-TB率为27.6%。结论:南阳市结核分枝杆菌耐药程度比较严重,必须采取有效措施控制耐药和耐多药结核病。     

重组腺病毒介导的HBV核心蛋白和hEDN融合蛋白基因在小鼠肝脏的表达

目的：使HBc-hEDN基因重组腺病毒载体(AdHBc-hEDN)及其对照载体AdhEDN在小鼠肝脏获得表达．方法：将体外扩增获得的高滴度AdHBc-hEDN和AdhEDN经尾静脉注射感染小鼠，并用免疫组化的方法检测AdHBc-hEDN和AdhEDN在小鼠肝脏中的表达．结果：重组腺病毒AdHBc-hEDN和AdhEDN在小鼠肝脏均获得了阳性表达．结论：HBc-hEDN基因重组腺病毒裁体在正常小鼠肝脏的成功表达为其在乙型肝炎小动物模型体内的抗病毒功能研究奠定了良好的基础．     

约氏疟原虫红外期相关蛋白识别及质谱分析

目的对混和于宿主蛋白的约氏疟原虫红外期蛋白进行初步研究。方法制备针对疟原虫唾液腺子孢子的免疫血清,通过免疫印迹识别肝细胞内疟原虫裂殖体的相关蛋白,并对识别的蛋白进行肽指纹图谱分析。结果通过免疫印迹成功地识别了疟原虫相关的蛋白,经MALDI-TOF-MS获得肽指纹图谱,以Mascot软件分析并在疟原虫蛋白数据库中检索到了相匹配的多肽。结论应用免疫印迹与肽指纹图谱相结合的方法,可以对存在于复杂混和物中的红外期疟原虫蛋白进行初步分析。     

按蚊感染疟原虫免疫应答的信号通路及活化因子

按蚊是传播人类疟疾的重要媒介，通过对果蝇免疫模型的研究了解按蚊感染疟原虫后免疫应答的信号通路主要为Toll和1md信号通路，Imd／Relish通路主要产生体液免疫反应，Toll/Dif通路主要活化血细胞和诱导产生抗菌肽，两种信号通路在功能上可以互相补充，而按蚊感染后的免疫活化因子主要为抗菌肽，多种活化因子协同作用杀伤病原体。     

TLR4在肺炎致病菌感染中的作用

细菌性肺炎是最常见的肺炎,也是最常见的感染性疾病之一.致病菌类型很多,因此与之对应的临床表现变化也较大.常见的症状为发热、咳嗽、咳痰.近年来,在肺炎致病菌感染过程中对细菌表面分子的识别过程研究取得了一定进展.本文就细菌性肺炎中Toll样受体4（Toll like receptor,TLR4）的作用机制简述如下.