下丘脑室旁核经迷走神经复合体对哮喘大鼠的神经调控研究

为探讨下丘脑室旁核对哮喘大鼠的神经调控途径,取健康雄性SD大鼠制备哮喘模型并诱发哮喘发作,运用WGA-HRP逆行追踪法与免疫组织化学染色法(ABC法)相结合的双重标记方法,在光镜下观察向迷走神经复合体(DVC)发出投射的下丘脑室旁核(PVN)神经元内Fos蛋白的表达情况。结果显示:PVN内有三种阳性细胞,即HRP逆行标记神经元、Fos样免疫阳性神经元和HRP/Fos双标神经元。这些神经元主要见于PVN小细胞部的内侧亚核和外侧亚核,散在分布于背侧亚核,在前小细胞亚核内未见阳性反应;Fos样免疫阳性细胞呈双侧分布,且HRP逆标神经元,HRP/Fos双标神经元也为双侧分布,但以注射区同侧占优势。HRP/Fos双标神经元占HRP标记细胞的44.22%。本研究结果提示,哮喘大鼠发作时中枢内包括下丘脑PVN、延髓DVC的多个脑区内神经元兴奋,且两者之间通过直接投射联系参与哮喘的调控。     

TUNEL法原位检测肿瘤组织细胞凋亡的改进

原位末端标记技术是当今较为流行的一类定量凋亡细胞评判方法,以脱氧核苷酸末端转移酶(TdT) 介导的核苷酸(dUTP) 缺口末端标记法(TUNEL )应用最为广泛.在对各种组织进行凋亡研究时,多数采用从各种试剂公司购买的试剂盒.虽然试剂盒使用方便,但是有时结果并不理想,如非特异性染色过多,背景染色深.对动物组织的研究更是如此.我们在TUNEL染色过程中如何更好地利用试剂盒,在避免假阳性、消除非特异性反应、降低背景染色等方面进行了探索和改进,获得了满意的实验结果,现介绍如下.     

6号染色体杂合性丢失和肿瘤

6号染色体是肿瘤杂合性丢失好发的染色体之一 ,是参与肿瘤发生发展机制的重要染色体。本文通过对几种不同肿瘤中 6号染色体杂合性丢失的分析 ,阐述了几个频繁丢失的“热点”区域 ,并探讨了它们与肿瘤发生发展的关系     

靶向ANG-2的shRNA重组载体抑制人子宫内膜癌Ishikawa生长和侵袭的研究

目的 探讨采用RNA干扰(RNA interference,RNAi)抑制血管生成素-2(angiopoietin-2,ANC-2)基因的表达对人子宫内膜癌细胞Ishikawa细胞的影响.方法 采用脂质体LipofectamineTM 2000介导的方法将针对ANG-2基因的短发卡状RNA(short hairpin RNA,ahRNA)表达载体转染到人子宫内膜癌Ishikawa细胞中,逆转录聚合酶链反应及Western印迹法检测ANG-2 mRNA及蛋白的表达;噻唑蓝比色法检测Ishikawa细胞的增殖;荧光显微镜观察细胞形态;流式细胞仪检测细胞周期及凋亡;侵袭实验检测其对侵袭能力的影响.结果 人子宫内膜癌Ishikawa细胞ANG-2 mRNA及其蛋白质表达水平均显著降低;增殖被抑制,抑制率63.11%;细胞凋亡增加,细胞凋亡率与空白对照组和阴性对照组相比明显增高;细胞生长减慢,阻滞于G1期的增多,S期细胞减少;侵袭能力明显下降.结论 靶向ANG-2的shRNA能成功下调ANG-2基因的表达,抑制人子宫内膜癌Ishikawa细胞生长和侵袭.     

骨组织工程种子细胞的研究进展

随着骨组织工程研究的进展 ,选择什么细胞作为其种子细胞成为近年来研究的热点。目前 ,骨组织工程应用中种子细胞有五种来源 :骨、骨膜、骨髓、骨外组织和早期胚胎。本文介绍了五种来源种子细胞的研究状况 ,并对种子细胞各自存在的问题及应用前景进行了分析。     

线粒体DNA突变与人类肿瘤

线粒体是哺乳动物核基因组外唯一有自主复制能力的细胞器 ,它通过氧化磷酸化 (oxidative phosphorylation,OX-PHOS)过程产生机体所需的能量 ,并且以 ATP的形式储存起来。有关报道认为线粒体 DNA突变与细胞凋亡、肿瘤的形成与发展以及人类衰老过程都是紧密联系的。本文就线粒体 DNA突变与大肠癌、乳腺癌、胃癌、卵巢癌等实体瘤以及血液系统恶性肿瘤之间的关系做一简单的介绍     

局灶性脑缺血大鼠皮质和尾壳核神经干细胞增殖分化与nNOS的表达

本研究旨在探讨局灶性脑缺血再灌注大鼠皮质和尾壳核神经干细胞的增殖分化与nNOS表达的关系。大脑中动脉线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,5溴脱氧尿核苷(BrdU)标记分裂增殖细胞,免疫组化单标和双标记技术检测各组大鼠缺血侧皮质和尾壳核BrdU阳性细胞和nNOS的表达。模型组大鼠皮质和尾壳核BrdU阳性细胞再灌注后3d开始增多,14d达高峰,nNOS阳性细胞再灌注后7d表达增强,28d达高峰,BrdU/nNOS双标细胞在14d达高峰,占皮质BrdU阳性细胞数的42.95%,尾壳核内占42.56%。新生细胞分化组BrdU阳性细胞和BrdU/nNOS双标细胞显著多于模型组(P<0.05),皮质双标细胞占BrdU阳性细胞数的54.08%,尾壳核内占47.84%。提示局灶性脑缺血可增强大鼠皮质和尾壳核的增殖能力,部分增殖细胞分化为nNOS阳性神经元,参与神经网络的重建。     

伴玻璃样间质的透明细胞癌二例

例1男,76岁。因双下肢浮肿2个月余,声嘶1周于2000年3月12日入院。体检:一般情况差,左颈部触及肿大淋巴结约2cm×2cm大小,血生化检查提示肾功能及呼吸功能衰竭,后因呼吸困难作气管插管时舌根部见一菜花状肿瘤约3.0cm×2.5cm大小,行颈淋巴结及舌根部肿瘤活检术。术后1个月患者死于慢性肾炎所致肾功能及呼吸功能衰竭。病理检查:切除淋巴结大小2cm×2cm,切面灰白色,质硬。舌根部肿瘤大小3.0cm×2.5cm,表面呈菜花状,切面灰白色,质硬。镜下观察:舌根部肿瘤细胞形态较一致,排列呈互相吻合的小梁状、岛状或片状。巢间有大量玻璃样变的纤维性间质。瘤…     

一个遗传性非综合征型耳聋家系的突变分析

目的分析一个遗传性非综合征型耳聋家系的突变，并探讨缝隙连接蛋白beta2(gap junction protein beta 2，GJB2)基因235delC突变是否会加重线粒体A1555G突变导致的非综合征型耳聋症状。方法对一个母系遗传性非综合征型耳聋核心家系72个成员取外周血提取DNA，经聚合酶链反应扩增后，利用Alw26Ⅰ限制性内切酶酶切及直接测序验证，对其线粒体DNA突变进行研究；利用ApaⅠ限制性内切酶酶切及直接测序验证，筛查核心家系中GJB2基因235delC突变情况，并对GJB2基因235delC和线粒体A1555G突变的关系进行研究。结果在27名母系成员中均发现具有线粒体A1555G突变，呈母系遗传；具有耳聋表型的为21人(77．8％)，家族外显率高；所筛查的包括配偶在内的72名个体中，仅3例具有GJB2基因235delC杂合子突变，且均出现在母系成员中，但3例的耳聋表型却不同。结论线粒体A1555G突变是本家系耳聋遗传易感性的基础，在该家系中GJB2基因的235delC杂合子突变未加重线粒体A1555G突变导致的非综合征型耳聋。     

多维分层反馈模式在医院内部质量评价中的应用效果

目的探讨多维分层反馈模式在医院内部质量评价中的应用效果。方法选择江苏省盐城市某三甲综合医院为样本医院,以职能部门、临床科室、医技科室共89个考核单元为研究对象,开展医院内部质量评价活动,应用多维分层理念建立质评反馈模式。结果应用多维分层反馈模式后,办公室、医务科、沟通办等职能部门月度质评现场管理成绩均有所提升（P＜0.05）;职能部门（台账资料）、临床医疗、医技科室及护理单元季度质评成绩均有所提高（P＜0.05）;危化品、不良事件、便携式血糖仪、知情同意及时间管理等专项质评追踪合格率均显著提高（P＜0.001）。结论将质评机制引入医院并形成科学化、常态化管理,是对外部评审的重要补充。而多维分层反馈模式的建立,有效地促进了部门、科室间的相互协作,提升了职能部门的管理成效,提高了医院整体的质量管理效能。