建立苯磺酸左旋氨氯地平片给药制剂的分析方法

目的建立与验证苯磺酸左旋氨氯地平片的分析方法。方法用高效液相色谱法测定药物浓度,色谱柱为Agilent HC-C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-10 mmol·L^-1磷酸二氢钾溶液(75∶25),流速1.0 mL·min-1,检测波长238 nm,进样量10μL。结果苯磺酸左旋氨氯地平在5.39~172.60μg·mL^-1内浓度与峰面积的线性关系良好(r=1.0,n=6)。主峰峰面积的RSD为0.32%,保留时间的RSD为0.16%,系统适用性良好;重复性实验的RSD为1.46%,平均回收率为99.95%~103.70%(n=3)。苯磺酸左旋氨氯地平片供试品溶液在6 h内稳定。结论建立的苯磺酸左旋氨氯地平片给药制剂的分析方法具有较高的准确度、精密度和专属性。     

亚低温对急性辐射损伤小鼠的保护作用及其机制研究

目的 探讨亚低温对急性辐射损伤小鼠的辐射防护作用及其机制.方法 105只雄性BALB/c小鼠按随机数字表法分为3组,即单纯照射组、亚低温干预组和健康对照组,每组35只.单纯照射组和亚低温干预组小鼠均接受6 Gy ⁶⁰Co γ射线单次全身照射,亚低温干预组在照后即刻进行亚低温干预并维持6 h,观察照后1、3、7、14、21和28 d小鼠外周血白细胞数、骨髓有核细胞计数,骨髓病理组织学变化,照后6和24 h, 检测小鼠血清中丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)和超氧化物歧化酶(SOD)活力,采用流式细胞术检测骨髓细胞周期.结果 与单纯照射组比较,亚低温干预组小鼠外周血白细胞数和骨髓有核细胞数在照后早期较高(t=-2.63、-3.41,P<0.05),且提前1周恢复;同时,小鼠骨髓细胞衰减较晚,恢复较早.受照后6 h与其他组相比,亚低温干预组小鼠血清MDA含量较低(t=3.83,P<0.05),SOD活力较高(t=-6.57,P<0.05),骨髓S期细胞比例较高(t=-4.67,P<0.05),G₂期细胞较低(t=3.04, P<0.05);受照后24 h与其他组相比,亚低温干预组小鼠血清GSH-px活力较高(t=-3.13, P <0.05),骨髓S期细胞比例较单纯照射组降低(t=7.19,P<0.05).结论 照后亚低温干预对急性辐射损伤有较好的保护作用,机制与亚低温可增强机体抗氧化力、抑制骨髓细胞周期进程有关.     

不同防腐措施收集大鼠尿液对其内源性代谢物的影响

目的:在大鼠尿液代谢组学研究中需要对尿液样本的采集过程采取必要的防腐措施,针对尿液收集过程中常用的几种防腐措施,研究其对尿液内源性代谢物的影响。方法:在大鼠尿液样本采集时采用冰上收集、加入叠氮化钠以及两者合用进行防腐,利用核磁共振代谢组学技术分析不同防腐措施的差异。结果:核磁共振代谢组学结果显示,冰组和叠氮化钠+冰合用组的主成分分析结果重合较多,且二者与空白组、叠氮化钠组均有较高的分离度;叠氮化钠组和空白组有小部分重叠,但是有分离的趋势。提示冰组与叠氮化钠+冰合用组的防腐效果相近,与空白组相比尿液中的缬氨酸、甜菜碱、马尿酸上升,丙氨酸和2-酮戊二酸下降。结论:在大鼠尿液代谢组学研究中,尿液样本采集时一定要有低温防腐措施,在有防护条件时加入一定量叠氮化钠有助于提高防腐效果。     

富H2水对电离辐射所致认知功能损伤的保护作用

目的 探讨富H₂水对电离辐射所致大鼠认知功能损伤的保护作用。方法 将20只SD大鼠利用随机数表法分为对照组（C）、富H₂水组（HRW）、单纯照射组（IR）和富H₂水干预组（HRW+IR）4个组,每组5只。通过Morris水迷宫对各组大鼠空间记忆能力进行检测;对超氧化物歧化酶（SOD）、还原型谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）、8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）等氧化应激指标的变化进行检测;通过实时荧光定量PCR反应对凋亡相关基因表达情况进行研究。结果 大鼠逃避潜伏期4组间差异有统计学意义（F=6.003,P<0.05）,4组间的平台象限游泳距离差异具有统计学意义（F=3.850,P<0.05）。其中,与IR组相比,HRW+IR组第3、4和5天的逃避潜伏期明显缩短（P<0.05）,原平台象限游泳距离显著延长（P<0.05）。4组间的GSH、8-OHdG、MDA差异均具有统计学意义（F=6.450、5.033、4.113,P<0.05）,与IR组相比,脑组织中GSH浓度显著升高（P<0.05）,而MDA和8-OHdG浓度显著降低（P<0.05）。PCR结果显示,与IR组相比,HRW+IR组caspase-3、caspase-9基因表达水平均显著下降（t=2.956、3.087,P<0.05）,bcl-2基因表达水平显著升高（t=-3.640,P<0.05）,bax基因表达水平显著降低（t=5.246,P<0.05）。结论 富H₂水可能通过中和氧羟自由基,减少电离辐射的氧化损伤作用,从而影响细胞凋亡过程进而对大脑产生保护作用。     

The effect of magnolol on Ca2+ homeostasis and its related physiology in human oral cancer cells

ObjectiveMagnolol, a polyphenol compound from herbal medicines, was shown to alter physiology in various cell models. However, the effect of magnolol on Ca²⁺ homeostasis and its related physiology in oral cancer cells is unclear. This study examined whether magnolol altered Ca²⁺ signaling and cell viability in OC2 human oral cancer cells.MethodsCytosolic Ca²⁺ concentrations ([Ca²⁺]_i) in suspended cells were measured by using the fluorescent Ca²⁺-sensitive dye fura-2. Cell viability was examined by 4-[3-[4-lodophenyl]-2-4(4-nitrophenyl)-2H-5-tetrazolio-1,3-benzene disulfonate] water soluble tetrazolium-1 (WST-1) assay.ResultsMagnolol at concentrations of 20–100 μM induced [Ca²⁺]_i rises. Ca²⁺ removal reduced the signal by approximately 50%. Magnolol (100 μM) induced Mn²⁺ influx suggesting of Ca²⁺ entry. Magnolol-induced Ca²⁺ entry was partially suppressed by protein kinase C (PKC) regulators, and inhibitors of store-operated Ca²⁺ channels. In Ca²⁺-free medium, treatment with the endoplasmic reticulum Ca²⁺ pump inhibitor 2,5-di-tert-butylhydroquinone (BHQ) abolished magnolol-evoked [Ca²⁺]_i rises. Conversely, treatment with magnolol abolished BHQ-evoked [Ca²⁺]_i rises. Inhibition of phospholipase C (PLC) with U73122 partially inhibited magnolol-induced [Ca²⁺]_i rises. Magnolol at 20–100 μM decreased cell viability, which was not reversed by pretreatment with the Ca²⁺ chelator 1,2-bis(2-aminophenoxy)ethane-N,N,N',N'-tetraacetic acid-acetoxymethyl ester (BAPTA/AM).ConclusionsTogether, in OC2 cells, magnolol induced [Ca²⁺]_i rises by evoking partially PLC-dependent Ca²⁺ release from the endoplasmic reticulum and Ca²⁺ entry via PKC-sensitive store-operated Ca²⁺ entry. Magnolol also caused Ca²⁺-independent cell death. Therefore, magnolol-induced cytotoxicity may not be involved in activation mechanisms associated with intracellular Ca²⁺ mobilization in oral cancer cells.     

60Co γ射线急性照射对比格犬外周血淋巴细胞基因表达谱的影响

目的 探讨急性照射后比格犬外周血淋巴细胞基因表达谱的变化。方法 将20只雄性成年比格犬用单纯随机数字表法均衡分为4组：空白对照组和0.5、2.0、5.0 Gy 3个照射组,⁶⁰Co γ射线急性照射相应剂量,照后6 h采集外周血,分离淋巴细胞进行总RNA提取和基因芯片杂交以开展差异表达基因筛选,并对差异表达基因进行基因本体（GO）分析,以及京都基因与基因组百科数据库（KEGG）通路分析,以实时定量PCR（qRT-PCR）进行结果验证。结果 与空白对照组相比,3个剂量组受照后6 h共有308条基因差异表达2倍以上,其中61条表达上调,247条表达下调,主要涉及免疫反应、肿瘤发生等。共同差异表达基因的GO富集分析涉及细胞连接、信号转导、氧化还原及物质代谢等,共同涉及的KEGG通路包含肿瘤途径、p53信号通路和JAK-STAT信号通路、酪氨酸代谢等。通过qRT-PCR验证,凋亡增强核酸酶（AEN）和促分裂原活化蛋白激酶13（MAP3K13）基因表达结果与基因芯片结果一致。结论 不同剂量的γ射线急性照射均对比格犬外周血淋巴细胞的基因表达谱产生明显影响,共同差异表达基因涉及免疫系统、物质代谢及致癌效应等多项生物学功能及相关通路。     

60Co γ射线对雄性比格犬睾酮分泌及睾丸组织病理学的影响

目的：探讨⁶⁰Co γ射线急性照射对雄性比格犬睾酮分泌的影响及对睾丸的损伤。方法：检疫30 d的15只雄性比格犬,随机分为3组：空白对照组、0.5 Gy γ射线照射组和5.0 Gy γ射线照射组,照射组比格犬接受⁶⁰Co γ射线一次性全身照射,吸收剂量率为0.5 Gy/min,分别于照射后第4、7、14、28、60天采用竞争性抑制酶免疫分析法测定血清睾酮含量,照射后60 d取犬睾丸和附睾,观察脏器是否出血或坏死并进行睾丸的组织结构病理学检查。结果：γ射线照射后10~13 d,5.0 Gy γ射线照射组动物全部死亡,并出现睾丸及附睾出血;照射后60 d,0.5 Gy γ射线照射组动物体质量与空白对照组间的差异无统计学意义（P>0.05）,其睾丸平均质量为空白对照组的69%,两组间的睾丸/体质量比差异无统计学意义（P>0.05）;在照射后第4、7、14、28、60天,0.5和5.0 Gy γ射线照射组与空白对照组血清睾酮含量间的差异无统计学意义（P>0.05）;2个照射组比格犬睾丸生精细胞有不同程度坏死脱落,其中5.0 Gy γ射线照射组睾丸内无精子生成。结论：0.5和5.0 Gy ⁶⁰Co γ射线急性照射均对雄性比格犬生殖系统造成损伤,其中血清睾酮变化不明显,睾丸结构受到破坏,生精细胞及精子生成受到严重损伤。     

烟气暴露30天对大鼠心脏基因表达谱的影响

目的：利用基因芯片技术研究烟气暴露30 d对大鼠心脏基因表达的影响。方法：6只雄性SD大鼠分为对照组和烟气暴露组。烟气暴露组经主流烟气暴露,对照组不进行干预,30 d后取大鼠心脏,应用基因芯片技术进行差异表达基因筛选,利用基因本体（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）数据库对差异基因进行生物信息学分析。结果：与对照组比较,烟气暴露组筛选出差异表达2倍以上的基因86个,其中上调表达60个,下调表达26个。差异表达基因富集于292种生物过程,72种细胞成分和96类分子功能以及61个信号通路。主要涉及促分裂原活化蛋白激酶结合、α-βT细胞受体复合物、细胞外渗的正调节、络氨酸代谢等相关基因通路。结论：烟气暴露30 d所致大鼠心脏的异常表达基因与信号通路主要涉及分子结合、细胞周期、信号转导等多个方面。