大鼠心肌多巴胺受体在缺氧-复氧时的表达变化及其意义

目的： 观察大鼠心肌多巴胺受体在缺氧-复氧时的表达，初步探讨其与心肌缺氧-复氧损伤的关系。方法: 采用Langendorff离体灌流装置复制大鼠心肌缺氧-复氧模型。用RT-PCR和Western blotting结合图像分析系统，分别检测缺氧-复氧心肌多巴胺受体DR1、DR2 mRNA和蛋白质的表达变化；用紫外分光光度计测定大鼠冠脉流出液中LDH活性；透射电镜观察心肌超微结构的变化。结果: 大鼠心肌组织在缺氧40 min时的DR1、DR2 mRNA和蛋白表达高于正常对照组(P<0.05)，缺氧40 min后复氧1h显著高于正常对照组(P<0.01)，2 h达高峰，3 h、4 h后降低，但仍高于正常组(P<0.01)；同时随复氧时间延长，冠脉流出液中LDH活性增加，心肌超微结构损伤加重。结论: 大鼠心肌多巴胺受体DR1、DR2表达在缺氧-复氧过程中呈先升高后降低的特点，可能参与心肌缺氧-复氧损伤的发生。     

二氟甲基鸟氨酸对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞肥大与凋亡的影响

目的探讨二氟甲基鸟氨酸(difluoromethylornithine,DFMO)对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导的心肌细胞肥大和凋亡的影响。方法实验分为4组:Control组、ISO组、ISO+DFMO组和ISO+DFMO+Pu组。利用ISO建立心肌细胞肥大模型,0.5 mmol·L-1DFMO和0.5 mmol·L-1腐胺预处理后检测ANP基因表达和心肌细胞表面积;检测各组细胞培养液中LDH活性和MDA含量,Annexin V/PI法检测心肌细胞凋亡率,real time-PCR和Western blot检测Bcl-2和Bax基因及蛋白表达。结果与ISO组相比,DFMO预处理后心肌细胞表面积和ANP基因表达降低(P<0.05),培养液中LDH和MDA释放量均下降(P<0.05),心肌细胞凋亡率降低(P<0.05);同时,DFMO上调Bcl-2基因和蛋白水平(P<0.05),上调Bcl-2/Bax比值(P<0.05),下调Bax基因和蛋白水平(P<0.05)。结论 DFMO对ISO诱导的心肌细胞肥大和凋亡有保护作用,其机制可能与Bcl-2和Bax表达有关。     

miR-580对乳腺癌细胞系中Twist1的调节作用

目的：探讨miR-580在MCF-10A细胞系中对Twist1的调节。方法：本实验利用生物信息学方法预测Twist1的靶miRNA是miR-580。首先,采用qPCR法检测在MCF-10A系列细胞系中Twist1及miR-580的表达。然后,在MCF-10A细胞系中分别转染miR-580类似物和miR-580抑制物后,利用RT-PCR、Western blot、t检验分析Twist1的表达及细胞迁移能力的变化。最后利用荧光素酶实验验证miR-580通过结合在Twist1的3'UTR调节其表达。结果：1)在MCF-10A细胞系中Twist1与miR-580的表达呈负相关;2)在MCF-10A细胞系中转染miR-580类似物后,Twist1的表达下调;在MCF-10A细胞系中转染miR-580抑制物后Twist1的表达上调;3)在MCF-10A细胞系中引入miR-580类似物后细胞迁移能力降低;4)miR-580直接结合在Twist1的3'UTR。结论：miRNA-580在MCF-10A细胞系中通过结合在Twist1的3'UTR负向调节Twist1的表达从而克制细胞的迁移。     

热休克蛋白70抑制c-Jun氨基末端激酶通路对H2O2诱导心肌细胞凋亡的保护作用

目的观察热休克蛋白70(HSP70)对H_2O_2诱导乳鼠心肌细胞凋亡的保护作用及其机制。方法培养大鼠心肌细胞,随机分为5组:对照组、H_2O_2组、热休克组、c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制剂组、热休克 JNK抑制剂组。生化法测定各组细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、肌酸激酶(CK)活性和丙二醛(MDA)水平,流式细胞仪分析心肌细胞凋亡,噻唑蓝(MTr)法测定心肌细胞相对活力,Western blot法检测JNK的表达。结果H_2O_2组LDH、MDA水平和CK活性明显高于其他组(P<0.01),而SOD活性则明显低于其他组(P<0.01)。细胞凋亡率H_2O_2组明显高于其他各组(P<0.01)。细胞活力H_2O_2组明显低于对照组(P<0.01),而热休克组、JNK抑制剂组、热休克 JNK抑制剂组的细胞活力明显高于H_2O_2组(P<0.01)。JNK只在H_2O_2组有表达。结论HSP70对H_2O_2诱导的心肌细胞凋亡具有保护作用,其机制可能是HSP70大量表达后抑制了JNK信号的转导。     

多胺代谢与大鼠心肌缺血再灌注损伤关系的实验研究

目的 观察缺血再灌注不同时期大鼠心肌多胺代谢变化规律,探讨多胺代谢与心肌缺血再灌注损伤的关系.方法 采用结扎冠状动脉方法复制大鼠在体心肌缺血再灌注损伤模型,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western免疫印迹(Western blot)方法分别测定正常、缺血再灌注2 h、6 h、12 h和24 h时心肌鸟氨酸脱羧酶(ODC)和精胺/精脒乙酰转移酶(SSAT)mRNA的转录和蛋白表达水平,并用高效液相色谱仪测定多胺含量变化.结果 心肌缺血再灌注后ODC和SSAT mRNA的转录和蛋白表达均上调,至再灌注24 h时,与假手术组比,ODC mRNA和SSAT mRNA转录分别增加了3.1倍和3.8倍(P＜0.01),ODC和SSAT的蛋白表达分别增加了3.1倍和2.9倍(P＜0.01).精胺、精脒和多胺总代谢池含量减少,至再灌注24 h时,分别比假手术组少了33.6%、35.3%和32.9%,而腐胺多了58.9%(P＜0.01).结论 心肌缺血再灌注损伤可导致多胺代谢失衡,二者密切相关.     

卵巢上皮癌血管内皮生长因子C、血小板内皮细胞粘附分子表达及其微血管密度的临床意义

目的 观察血管内皮生长因子C(VEGF-C)及血小板内皮细胞粘附分子(CD31)的表达在卵巢上皮性肿瘤血管形成中的作用,并计数微血管密度(MVD),以探讨对卵巢性上皮癌预后的影响.方法 采用免疫组织化学方法检测VEGF-C和CD31在卵巢上皮癌组织中的表达.结果 (1)VEGF-C表达:卵巢癌阳性率为67.5%(27/40).(2)CD31及MVD表达:卵巢癌为高表达(25.36±9.23).MVD在有淋巴结转移者大于无转移者(P＜0.05),在临床分期高的病例(Ⅲ、Ⅳ期)明显高于低的病例(Ⅰ、Ⅱ期),差异有统计学意义(P＜0.05).在发病年龄、组织学类型之间差异无统计学意义(P＞0.05).(3)VEGF-C和MVD在有转移者明显高于无转移者.结论 VEGF-C、CD31的表达及MVD与卵巢癌的转移及临床分期、病理分型有关,与患者的年龄无关.     

Nucleus人工耳蜗电极阻抗测试的研究

目的探讨NucleusCI24M与NucleusCI24R．（CS）型人工耳蜗电极阻抗的区别。方法应用神经反应遥测技术（NRT）监测I6例NucleusCI24M与I0例NucleusCI24R（CS）型人工耳蜗电极的阻抗。结果所有电极阻抗值正常，两种类型的人工耳蜗电极阻抗差异存在显著性，并且人工耳蜗电极植入后，其阻抗会发生规律性变化，在术中测试电极阻抗数值存在从蜗底到蜗顶逐渐上升的现象。结论NucleusCI24M与NucleusCI24R（CS）的电极阻抗存在明显差异，电极植入后，其阻抗值随时间发生的规律性变化与机体生理活动有关。在相同条件下NucleusCI24R（CS）比NucleusCI24M更加节能有效。     

As2O3治疗白血病的机制探讨

目的 探讨三氧化二砷（As2O3）治疗白血病的作用机制。方法 在K562细胞中表达带3蛋白膜段结构域，经Western Blot检定其表达；通过离子转运测定验证其生物学活性；应用As2O3诱导细胞凋亡，通过电镜观察、线粒体膜电位测定和凋亡片断DNA的提取，观察As2O3对表达带3蛋白膜段结构域的K562细胞凋亡的影响。结果 表达带3蛋白膜段结构域的K562细胞的凋亡特征比未表达带3蛋白的K562细胞明显。说明表达带3蛋白膜段结构域的K562细胞对As2O3更敏感。结论 带3蛋白参与了凋亡的过程，为探讨As2O3治疗白血病的机制提供一条新的线索。     

青蒿素对大鼠血管平滑肌肌张力的影响

青蒿素(artem isin in)是从菊科植物黄花蒿中提取分离到的一种具有过氧桥的倍半萜内酯类化合物。实验表明,该药具有抗疟、抗孕、抗纤维化、抗血吸虫、抗弓形虫、抗心律失常和肿瘤毒性等作用[1,2]。高血压病是指未查出明确病因而以非特异性循环动脉压持续升高为特点的病理过程,常伴有不同程度心、脑、肾的损害。传统的抗高血压药物主要有4个类型,即利尿剂、β-受体阻断药、血管紧张素转换酶(ACE)抑制剂和钙拮抗剂。研制高效、长效、多器官保护和低副作用的抗高血压药已成为人们关注的热点[3]。青蒿素是否有抗高血压作用,目前尚不清楚。本实…     

酪氨酸肼对着床前大鼠子宫胞浆雌二醇受体含量的影响

子宫内局部给酪氨酰肼１．５ｈ后，子宫胞浆雌二醇受体（ＥｃＲ）量明显下降，３ｈ下降最明显，５ｈ后这种作用基本消失。选择给药３ｈ后为最佳作用时间，观察到酪氨酰肼使子宫ＥｃＲ下降的作用是剂效关系。酪氨酰肼使妊娠ｄ１、ｄ３、ｄ５大鼠子宫ＥｃＲ含量下降。血清雌激素（Ｅ）和孕激素（Ｐ）浓度在给药前和给药３ｈ后无显著性差异。去卵巢１０ｄ大鼠，在给酪氨酰肼３ｈ后，子宫ＥｃＲ也降低。提示酪氨酰肼的这种作用是对子宫的直接作用，而不依赖卵巢内源性雌激素和孕激素。