PIAS3过表达对肺腺癌细胞A549增殖的影响及意义

目的：探索活化型信号转导子和转录激活子3蛋白抑制剂(PIAS3)对肺腺癌A549细胞增殖的影响及相关意义，为进一步研究利用辐射应答基因启动子驱动的PIAS3腺相关病毒载体联合放射治疗肺腺癌提供基础。方法：利用MTT比色试验和克隆形成率实验检测转染pCMV-Sport6-PIAS3后对肺腺癌细胞A549存活和增殖的影响；利用免疫荧光染色实验检测共转染pCMV-Sport6-PIAS3、PRC-CMV、PRC-STAT3及PRC-STAT3-CT后对p-STAT3入核的影响。结果：PIAS3过表达导致A549细胞生长显著抑制，克隆形成能力显著降低；免疫荧光染色实验结果表明，转染pCMV-Sport6-PIAS3后，STAT3入核被显著抑制，通过共转染表达STAT3和STAT3-CT后，STAT3入核仍显著受到抑制。结论：PIAS3过表达可抑制STAT3的入核，继而阻断其功能，从而降低肺腺癌细胞A549的生长和增殖能力。     

电离辐射对人肺腺癌A549细胞中STAT3靶基因表达的影响

目的 探讨γ射线照射对人肺腺癌A549细胞中促血管生成基因VEGF以及抗凋亡基因bcl-2和存活素(survivin)表达的影响及其与转录因子STAT3的关系。方法 利用RT-PCR和Western blot检测2和4 Gy γ射线照射后24 h A549细胞中VEGF、Bcl-2和Survivin表达水平以及STAT3抑制后VEGF和Survivin的表达变化。结果 2和4 Gy γ射线照射后,VEGF和Survivin的表达均显著升高,而Bcl-2的表达不受γ射线照射的影响。利用抑制剂AG490阻断γ射线照射诱导的STAT3激活后,辐射诱导的VEGF和Survivin的表达升高被抑制。结论 γ射线照射可通过激活STAT3上调A549细胞中Survivin和VEGF的表达,Survivin蛋白的上调在一定程度上抑制了辐射诱导的肿瘤细胞凋亡,而VEGF的表达升高则有助于肿瘤血管生成。     

不同种类细胞株对UVB紫外线的耐受性初探

目的： 探索几种细胞株对UVB紫外线的耐受性。方法：0、20和50 mJ/cm2紫外线照射后,利用MTT、荧光素酶报告基因检测和克隆形成率实验,检测人表皮细胞HaCaT、人黑色素细胞A875、人肺腺癌细胞A549和H322、人肝癌细胞HepG2的存活及增殖能力。结果：MTT实验结果表明HaCaT、A875、A549、H322和HepG2细胞在受到20和50 mJ/cm2紫外线照射后第1天,细胞活力均显著降低(P<0.05),到照射后第3天,细胞活力仍显著低于未照射组(P<0.05)。克隆形成率实验结果表明,HaCaT、A875和HepG2细胞在照射后,细胞增殖能力受到显著抑制。荧光素酶活性检测实验结果表明,A549细胞在受到20和50 mJ/cm2紫外线照射后第5和第10天,细胞活力显著低于未照射组(P<0.05)。结论：UVB紫外线对表皮细胞、肺腺癌细胞和肝癌细胞的存活和增殖能力均产生影响,其中正常表皮细胞HaCaT细胞对UVB紫外线的耐受性大于肿瘤来源的A875、A549、H322和HepG2细胞。     

60Coγ射线诱导人外周血淋巴细胞核质桥的剂量-效应关系研究

目的 确定核质桥判定标准,建立 ⁶⁰Co γ 射线诱导正常人外周血淋巴细胞中核质桥（NPB）的剂量-效应曲线。 方法 用 ⁶⁰Co γ 射线照射3名健康男性离体外周血,照射剂量分别为0、1、2、3、4、5和6 Gy,剂量率为1 Gy/min,采用胞质分裂阻滞微核（CBMN）法进行细胞培养、收获、制片、染色。在光学显微镜下分析双核细胞中NPB及微核（MN）。 结果 在0~6 Gy ⁶⁰Co γ 射线照射后,人外周血双核淋巴细胞中的NPB符合泊松分布,且NPB频率随吸收剂量增加而增加（H=19.51,P<0.01）,拟合回归方程为线性平方模式y=（1.39×10^-3）x² + （4.94×10^-3）x （R²=0.981,P < 0.01）。 结论 成功建立 0~6 Gy ⁶⁰Co γ 射线诱导正常人外周血淋巴细胞中NPB的剂量-效应曲线。