肿瘤和间质细胞相互作用对肺癌MMP-2和MMP-9表达的影响

 目的 研究三维立体培养中肺癌H460细胞、胚肺成纤维细胞和单核细胞相互作用对MMP-2、MMP-9 表达的影响。 方法 活性胶原三维立体培养分为：H460细胞和胚肺成纤维细胞共同培养组;H460细胞和单核细胞共同培养组;胚肺成纤维细胞和单核细胞共同培养组;H460细胞、胚肺成纤维细胞和单核细胞共同培养组4组。明胶酶谱法测定各组培养基中MMP-2、MMP-9活性。 结果 H460细胞和胚肺成纤维细胞、胚肺成纤维细胞和单核细胞共同培养时MMP-2酶原和活化酶活性和表达均增强,H460细胞和单核细胞共同培养时MMP-2酶原和MMP-9活性和表达增强,H460细胞、胚肺成纤维细胞和单核细胞共同培养MMP-2活化酶和MMP-9活性和表达明显增强。 结论 肺癌H460细胞、胚肺成纤维细胞和单核细胞相互作用能通过上调MMP-2、MMP-9的表达促进肺癌的侵袭和转移。     

表达谱芯片筛查非小细胞肺癌细胞系A549放疗抵抗差异基因

目的 建立非小细胞肺癌（NSCLC）A549放疗抵抗模型,表达谱芯片技术筛查放疗抵抗差异基因。 方法 A549细胞系长期间歇照射诱导建立的放疗抵抗细胞模型;表达谱基因芯片筛查放疗抵抗细胞株与敏感株全基因组RNA表达差异;分析2倍以上差异的基因（P<0.05）,分别进行生物学信息基因分类(GO)和信息通路（Pathway）分析。 结果 表达谱芯片显示,抵抗株与敏感株相比,差异表达基因为1410个（733个上调,677个下调）;GO分析显示,主要与细胞周期、DNA修复有关;通路显著性富集分析显示,丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）和磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）等多条信号通路激酶出现显著性差异。 结论 多种基因和信号通路参与了放疗抵抗过程。     

冷冻保存对正常和不育症精子PH-20表达和凋亡的影响

目的探讨冷冻保存对人精子膜蛋白PH-20表达和精子凋亡的影响。方法 14例正常生育力精液标本(A组)和20例不育症精液标本(B组)行冷冻保存。Western blotting检测PH-20蛋白在人精子中的表达,免疫荧光用来观察PH-20蛋白在人精子上的定位,应用末端脱氧核苷酸转移酶(Td T)介导的原位末端标记(TUNEL)法检测精子凋亡情况。结果解冻后正常生育组和不育组的PH-20/β-actin平均吸光度与冷冻前比较均有显著性下降(P0.05);解冻后正常生育组和不育组的PH-20阳性率与冷冻前比较均有显著性下降(P0.05)。解冻后正常生育组的精子凋亡率与冷冻前的比较差异无显著性意义(P0.05)。而解冻后不育组的精子凋亡率与冷冻前的比较均显著性下降(P0.05),且不育组的降低程度大于正常生育组。结论冷冻-解冻过程可引起精子PH-20蛋白表达减少和精子PH-20阳性率降低,但冷冻保存对正常生育者的精子凋亡率无显著影响。     

变应性鼻炎大鼠模型的建立

目的：建立变应性鼻炎（AR）Wistar大鼠模型,探讨呼吸道变应性炎症的发病机制,为临床治疗AR提供实验依据。方法：将30只Wistar大鼠随机分成模型组、正常组和地塞米松(DEX)组,每组10只。模型组大鼠经腹腔注射卵清蛋白(OVA)变应原,鼻腔滴入OVA鼻内激发;正常组大鼠以生理盐水替代OVA;DEX组大鼠激发成AR后再用DEX(0.2 mL/kg)后肢肌肉注射,观察大鼠行为学症状;采用HE染色和免疫组织化学染色法检测大鼠鼻黏膜组织学变化、嗜酸性粒细胞计数及其鼻黏膜免疫球蛋白E（IgE）的吸光度(A)值。结果：模型组大鼠均出现鼻痒、喷嚏和流清涕等AR的临床特征,大鼠鼻黏膜可见大量的嗜酸性粒细胞、淋巴细胞浸润,黏膜水肿增厚、腺体增生、分泌旺盛和鼻黏膜表面纤毛破坏等组织形态学变化。正常组大鼠仅轻度抓鼻,且喷嚏少。DEX组Wistar大鼠小血管无明显扩张,黏膜厚度较模型组明显降低,炎性细胞浸润程度减轻。模型组和DEX组大鼠嗜酸性粒细胞计数及其A值均高于正常组(P<0.05),DEX组大鼠鼻黏膜中嗜酸性粒细胞计数及A值均低于模型组(P<0.05)。结论：成功建立OVA变应原致敏的AR Wistar大鼠模型。     

Nα-乙酰-精氨酰-甘氨酰-天冬氨酰-对甲氧基苯乙胺对血小板聚集的抑制

N^α-乙酰-精氨酰-甘氨酰-天冬氨酰-对甲氧基苯乙胺(W2002)是精-甘-天冬氨酸(Arg-Gly-Asp)肽类血小板聚集抑制剂. 为探讨其抗血小板聚集的活性, 分别用比浊法和血小板计数的方法测定二磷酸腺苷(ADP)及高剪切速率诱导的血小板聚集,并用放射性配体分析法测定血小板表面结合［¹²⁵I］纤维蛋白原(FGN)的含量, 以了解W2002竞争性抑制［¹²⁵I］FGN与血小板糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅱa结合的生物活性. 结果显示 : W2002有明显的抑制ADP诱导血小板聚集的活性, 除最低终浓度(9 μmol·L^-1)外, 其余各浓度点(270, 135, 45 μmol·L^-1)与生理盐水对照组比较差异均非常显著; 其对抗高剪切速率诱导的血小板聚集也有明确的量-效关系; 抑制［¹²⁵I］FGN与血小板结合的IC₅₀值为 (41.5±2.9)μmol·L^-1, 在老年人和青年人群中比较无明显差异. 研究提示W2002通过抑制FGN与血小板GPⅡb/Ⅲa的结合而发挥作用.     

原发性肝细胞癌患者Galectin-3和Galectin-9的表达及其与预后的关系

目的： 探讨原发性肝细胞癌(HCC)患者肿瘤组织及其瘤旁组织中半乳糖凝集素3（Galectin-3）和半乳糖凝集素9（Galectin-9）的表达及其与预后的关系,阐明Galectin-3和Galectin-9在HCC发生发展过程中的意义。方法： 采用免疫组织化学法检测197例HCC患者肿瘤组织和131例瘤旁肝组织中Galectin-3和Galectin-9的表达水平;分析2种蛋白的表达与患者临床病理特征和预后的关系。结果：Galectin-9表达阳性率在HCC肿瘤组织和瘤旁组织中差异无统计学意义（P>0.05）,高分化肿瘤组织中Galectin-9表达水平明显高于低分化肿瘤组织（P<0.05）,脉管浸润者Galectin-9表达水平低于无脉管浸润者（P<0.05）;Galectin-9高表达患者术后生存时间显著长于低表达和阴性表达患者（P<0.05）。肿瘤组织中Galectin-3表达阳性率显著高于瘤旁组织（P<0.01）,但其表达水平与患者各临床病理特征及术后长期生存无关联。调整影响因素后多因素分析,仅丙肝感染（RR=2.86,95%CI：1.13～7.30,P=0.027）、多发肿瘤（RR=2.38,95%CI：1.39～4.07,P=0.002）、肿瘤直径>5 cm（RR=2.13,95%CI：1.21～3.76,P=0.009）和脉管浸润（RR=1.96,95%CI：1.07～3.62,P=0.030）成为影响HCC患者术后长期生存的独立影响因素。结论：Galectin-9表达水平与HCC患者肿瘤组织分化程度和脉管浸润有关联,但Galectin-9和Galectin-3表达水平与HCC患者的预后无关联。     

肝星状细胞经趋化因子SDF-1/CXCR4轴途径促进肝癌细胞侵袭的作用及其机制

目的：探讨肝星状细胞（HSC）通过SDF-1/CXCR4轴对肝癌细胞侵袭的影响和可能机制,为研究肝癌的侵袭过程提供依据。方法: 采用Western blotting和RT-PCR检测HSC LX02和肝癌细胞MHCC97、SMMC7721、Hep3B、HepG2中SDF-1和CXCR4的表达。采用Transwell实验检测LX02共培养或外源性SDF-1干预对肝癌细胞HepG2以及CXCR4基因沉默后的HepG2侵袭的影响。Western blotting法检测上皮标志E-Cadherin和间质标志Vimentin的表达水平。结果：与肝癌细胞比较,LX02中趋化因子SDF-1呈高表达（P<0.05）。4株人肝细胞癌细胞均有CXCR4高表达。HSC或SDF-1均能促进肝癌细胞HepG2侵袭（P<0.05）,并诱导E-Cadeherin蛋白表达下调,Vimentin蛋白表达上调。通过RNA干扰技术靶向沉默肝癌细胞CXCR4基因后,HSC和SDF-1对肝癌细胞HepG2侵袭能力均无明显影响（P>0.05）,肝癌细胞E-Cadeherin、Vimentin蛋白及mRNA表达水平亦无明显变化。结论：HSC可通过SDF-1/CXCR4轴促进肝癌细胞侵袭,其机制可能与诱导肝癌细胞上皮-间质转化有关。     

时间和温度对硅橡胶塑化标本固化硬度的影响

目的 探讨标本固化硬度与固化温度、固化时间的关系。方法 取福尔马林固定的人肌、肝、肺、肠、脑组织块各6件,经同一塑化流
程中处理,仅在固化过程中设置不同的固化温度-固化时间处理系列,检测标本固化硬度。结果 在固化过程中,各标本硬度随着时间的延长而
升高。固化第3天肝标本达到中等硬度,脑标本需7d,肺标本、肠标本和肌标本需14d。肝标本除在室温外,硬度均增加较快;脑标本在高温时
硬度增加较快;肌标本硬化2周内在各温度条件下硬度差别不明显,在硬化2周后,在高温时硬度均增加较快。肠和肺标本在各温度条件下硬度
差别不明显。结论 肝、肠、肺宜采用低温固化（室温、30℃）,脑和肌肉需采用先低温固化（室温、30℃）,然后高温固化（45℃、60℃）。