胰腺癌CFPAC1细胞增殖诱导配体基因shRNA慢病毒表达载体的构建

目的 构建针对人胰腺癌细胞株CFPAC1增殖诱导配体(a proliferation-inducing ligand,APRIL)基因的shRNA慢病毒表达载体.方法 应用基因工程技术,筛选出针对APRIL基因的RNAi靶序列,与pGCL-GFP载体连接,构建慢病毒表达载体LV-shAPRIL;将连接产物转化到DHSα感受态细胞,经PCR筛选阳性克隆、测序鉴定.再用LV-shAPRIL、pHelper 1.0、pHelper 2.0共转染293T细胞,包装产生慢病毒颗粒.重组慢病毒感染CFPAC1细胞,实时定量PCR和Western blotting检测CFPAC1细胞APRIL mRNA和蛋白的表达.结果 PCR和测序结果与构建的慢病毒载体的预期结果一致,经包装产生的病毒滴度为5×107TU/ml.构建的慢病毒载体感染CFPAC1细胞后第4天、第4周和第8周,APRIL mRNA表达量较空载体慢病毒感染组分别下降了73%、70%和71%;APRIL蛋白表达量分别下降了66%、63%和62%(P＜0.05).而各时间段未感染慢病毒的细胞组与空载体组相比无明显差异(P＞0.05).结论 成功构建了APRIL基因的shRNA慢病毒表达载体LV-shAPRIL.     

正交试验法优选五味子种子中木脂素类成分提取工艺

目的优选五味子种子中木脂素类成分提取工艺。方法紫外分光光度法测定总木脂素含量,以五味子总木脂素提取量为指标,采用L9（34）正交试验考察回流次数（1、2、3次）、回流时间（30、45、60 min）、乙醇体积分数（75%、85%、95%）、乙醇用量（4、5、6倍量）对五味子总木脂素提取量的影响。结果浓度在0.438~8.760μg/mL范围内,五味子乙素的吸光度与浓度有良好的线性关系（r=0.9928）。优选的工艺为5倍量95%乙醇,回流提取3次,每次60 min。结论优选的提取工艺稳定可行,可用于为五味子种子中木脂素类成分的提取。     

基于数据仓库技术发掘中医古文献医案哮喘证治规律

目的:探讨哮喘中医古文献医案的数据仓库构建技术,挖掘哮喘中医证治规律.方法:收集历代哮喘中医文献医案,将医案四诊信息、用药按最小知识单位进行分解标注、规范,构建哮喘文献医案数据仓库,采用频数分析、因子分析、关联规则分析、典型相关分析等方法对医案症-药相应规律进行挖掘分析.结果:共收集历代哮喘文献医案350例,构建了四诊信息、中药等哮喘证治主题数据仓库.因子分析结果提示,哮喘患者症状的出现具有明显的规律性,可概括为6组基本症状组合,分别反映了哮喘患者肺气郁闭、痰热蕴肺、肺阳虚弱、外邪侵袭、心肾两虚、痰浊阻肺等证候特征;哮喘治疗中药的组合可概括为7种,与小青龙汤、七味都气丸、定喘汤、解痉平喘方、麻杏甘石汤、玉屏风散、苏子降气汤的组方规律接近.关联规则分析提示哮喘的核心药物组合为甘草、麻黄、杏仁、半夏.症状-药物之间的典型相关分析结果显示,症状组合与中药组合相关.结论:采用数据仓库和数据挖掘技术能较好的挖掘出中医文献医案资料中潜藏的中医证治规律.     

内镜一次性治疗前列腺增生症合并膀胱结石体会

目的：观察分析内镜一次性治疗前列腺增生症合并膀胱结石的效果。方法：本组35例患者先行膀胱结石钬激光碎石,然后采用经尿道等离子体双极前列腺电切术（（PKRP）治疗前列腺增生症。结果：35例一次性治疗成功,术后结石无残留,排尿情况较前明显改善,IPSS评分均分由25.4分降到10.3分,尿流率由8.5ml/s上升到18ml/s,1例出现尿道外口狭窄,经尿道扩张后改善。结论：钬激光碎石及PKRP同期治疗前列腺增生合并膀胱结石是安全有效的方法。     

宫颈癌中Livin和PTEN蛋白表达与预后的相关性研究

目的：探讨宫颈癌组织中Livin和PTEN蛋白表达及其与临床病理因素以及预后的关系。方法：应用免疫组化Envision法检测65例宫颈浸润性鳞状细胞癌组织中Livin和PTEN蛋白表达,分析其表达与临床病理因素以及预后的关系。结果：宫颈癌组织中Livin的表达与肿瘤的临床分期、病理学分级和淋巴结转移情况显著相关（P＆lt;0.05）,和患者的年龄无关。 PTEN在宫颈癌和正常组织中的阳性表达率比较差异有统计学意义,与临床分期和淋巴结转移相关（P＆lt;0.05）,而与患者的年龄和宫颈癌病理学分级无相关性。Livin蛋白与PTEN蛋白两者表达呈负相关（P＆lt;0.05）。在死亡组中,Livin表达明显高于生存组（P＆lt;0.05）,而PTEN表达明显低于生存组（P＆lt;0.05）。结论：宫颈癌中Livin表达上调和PTEN蛋白表达缺失,与宫颈癌的发生、发展及转移、浸润密切相关;联合检测Livin和PTEN,有助于筛选出具有高复发及转移危险的宫颈癌患者,从而指导临床治疗。     

脑胶质瘤中血小板衍生生长因子和血管内皮生长因子表达的协同效应

目的：研究血小板衍生生长因子（PDGF）和血管内皮生长因子（VEGF）在脑胶质瘤中的表达及相关性,探讨其在人脑胶质瘤发生、发展和侵袭中的意义。方法：采用免疫组织化学S-P法,检测脑胶质瘤60例、正常脑组织10例中PDGF和VEGF的表达。结果：（1）PDGF在胶质瘤60例中表达30例（50．0％1,不同级别胶质瘤间的表达有差异,其表达与胶质瘤病理分级呈正相关（r=0．5807,P〈O．01）;（2）VEGF在胶质瘤中表达34例（56．7％）,不同级别胶质瘤表达与胶质瘤病理分级呈正相关（r=O．5373,P〈0．01）;（3）PDGF与VEGF在脑胶质瘤中的表达呈正相关fr=0．7715,P〈0．01）。结论：PDGF、VEGF的表达水平随着胶质瘤级别的增加而升高,与胶质瘤的病理学分级呈正相关,与胶质瘤进展密切相关,是恶性程度增高标志,两者在胶质瘤发生、发展中起协同作用。     

乳腺癌改良根治术后逆向调强放疗摆位误差的剂量学研究

目的:探讨乳腺癌改良根治术后逆向调强放疗的摆位误差对靶区内剂量的影响,为临床靶区勾画和计划设计提供参考.方法:采用电子射野影像系统对30例乳腺癌改良根治术后需要行放疗的患者进行摆位误差的测定.每周2次将治疗过程中的电子射野影像系统所拍摄的正位和侧位片,与数字化重建图像的验证片进行对比分析并计算误差.比较初次逆向调强放疗计划(对照组)和参考误差后制定的放疗计划(试验组)二者靶区剂量体积直方图差异.结果:经过290幅图像对比发现,身体前后方向(Z轴)的误差平均为(2.44±2.17) mm;头脚方向(Y轴)平均为(2.01±1.32) mm;左右方向(X轴)平均为(1.27±0.88) mm.对照组和试验组计划靶区体积的V95％分别为98.8％、98.1％;患侧肺的V20分别为28.4％、29.6％;平均剂量分别为1442.3cGy、1 490.2 cGy.心脏的V30分别为6.7％、7.1％;平均剂量分别为802.6 cGy、833.5 cGy.结论:乳腺癌改良根治术后采用调强放疗的摆位误差造成的靶区覆盖率和正常组织剂量变化,在临床可接受范围.     

Glypican3与肝癌关系的研究进展

肝癌是当今世界常见肿瘤之一,近年来,国内外肝癌的发病率呈上升趋势。传统的肝癌诊断及治疗都无法满足临床工作的需要,新近发现的磷脂酰肌醇蛋白3-Glypican3(Gpc3)与肝癌的发生密切相关,现就近几年对两者关系的研究作一综述。     

社区老年糖尿病患者的居家护理需求及社会支持特征研究

目的探究社区老年糖尿病患者居家护理需求和社会支持特征。方法 2019年2-5月,采用方便抽样法选取研究对象,在江苏25个社区实施调查。采用社区老年糖尿病患者个体特征情况调查表、居家护理需求问卷和社会支持量表(SSRS)进行调查,分析社区老年糖尿病患者居家护理需求和社会支持特征。结果 287份有效问卷显示,社区老年糖尿病患者居家护理需求总均分为(3.00±0.59)分,在健康指导、康复护理、心理护理、医疗护理和生活护理5个维度需求率分别为67.6%、59.2%、33.8%、24.0%和20.9%。社区老年糖尿病患者社会支持总分为(39.64±7.32)分,客观支持(8.95±2.51)分,主观支持(22.66±4.84)分,对支持的利用度(8.03±2.09)分。居家护理需求受并发症、自理能力影响;年龄、婚姻状况、与谁共同居住、家庭月均收入、并发症、自评健康状况及自理能力是社会支持的影响因素。相关分析结果显示,社区老年糖尿病患者自评健康状况与居家护理服务需求总分及对支持的利用度之间存在相关性(r=0.120,P0.05;-0.249,P0.01);社区老年糖尿病患者生活自理能力与居家护理服务需求总分及对支持的利用度之间存在相关性(r=0.136,P0.05;r=-0.133,P0.05)。结论社区老年糖尿病患者的对健康指导和康复护理需求率较高;社会支持处于中等水平;社区老年糖尿病患者个体特征影响其居家护理需求及对支持的利用度。对自理能力差的社区老年糖尿病患者,要注重提高患者及家属对支持的利用度,从而满足居家护理需求。