小鼠CXCR4基因慢病毒载体构建与真核表达

本研究旨在克隆小鼠CXC型趋化因子受体4（CXCR4）基因,构建携带增强型绿色荧光蛋白（EGFP）的CXCR4重组慢病毒载体并在真核细胞中表达。采用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）以C57BL／6小鼠骨髓细胞为模板克隆全长型CXCR4基因,连接至克隆载体pCR-Blunt,经限制性内切酶酶切后亚克隆至慢病毒转移载体,构建携带EGFP及CXCR4双顺反子结构的自身失活型重组慢病毒表达质粒;同时构建LV-IRES-EGFP作为对照质粒;通过脂质体转染法与包装质粒及包膜蛋白质粒共转染包装细胞293FT,超速离心浓缩病毒颗粒后转染293FT细胞,采用荧光显微镜和流式细胞术（FCM）检测EGFP的表达,Western blot鉴定CXCR4蛋白表达。结果表明,成功克隆小鼠CXCR4基因,构建重组慢病毒转移质粒LV-IRES-EGFP-CXCR4及对照质粒LV-IRES-EGFP,三质粒系统共转染293FT细胞后获得病毒滴度可达到10^8TU／ml。以重组慢病毒颗粒感染293Fr细胞后第3天,在荧光显微镜下观察到较强绿色荧光表达,FCM检测显示感染效率可达95％,FCM及Western blot结果显示感染后293Fr细胞表达CXCR4蛋白。结论：成功构建自身失活型慢病毒载体LV-IRES-EGFP-CXCR4,并在真核细胞中获得表达。     

胎儿脐带绕颈时静脉导管及大脑中动脉的血流变化

目的探讨胎儿脐带绕颈时静脉导管、大脑中动脉的血流变化。方法应用彩色多普勒超声检查288例28~40孕周胎儿的静脉导管、大脑中动脉的血流波形并测定血流参数,其中无脐带绕颈125例,绕颈1周136例、2周24例、3周及3周以上3例,测定静脉导管的前负荷指数（PLI）、搏动指数（PIV）、S/a值、静脉导管分流率（QDV/QUV）,大脑中动脉的阻力指数（RI）、搏动指数（PI）、胎儿脐动脉收缩压与舒张压比值（S/D）。结合胎儿心电监护（ECG）,比较静脉导管及大脑中动脉各血流阻力指标预测胎儿宫内缺氧的敏感性、特异性。结果脐带绕颈组比正常对照组静脉导管的PLI、PIV、S/a值增高,差异有统计学意义（P〈0.05）,ODV/QUV增加,差异无统计学意义（P〉0.05）,大脑中动脉的RI、PI降低,差异有统计学意义（P〈0.05）,S/D值降低,差异无统计学意义（P〉0.05）。静脉导管的PLI、PIV、S/a值均可对胎儿宫内缺氧作出预测,ROC曲线下面积分别为0.776、0.784、0.776。大脑中动脉各血流阻力指标诊断价值不大。结论脐带绕颈组比正常组静脉导管的血流阻力指标增加,大脑中动脉血流阻力指标降低。在预测胎儿宫内缺氧中,静脉导管比大脑中动脉诊断价值高。静脉导管血流阻力指标的测定可以用来判断脐带绕颈的松紧性。     

微创开放切口肾切除术治疗儿童多房性肾囊性变

目的总结微创开放切口肾切除术治疗小儿多房性肾囊性变(MCDK)的初步经验。方法回顾性分析2008年5月-2010年10月本院连续开展的微创开放切口肾切除术治疗小儿MCDK 15例的临床资料。患儿均为单侧MCDK,均经CT、放射性核素显像和超声检查确诊。对侧功能肾脏未发现异常。男12例,女3例;右侧5例,左侧10例。手术均经腹膜后间隙完成。取腰肋部开放切口,长度1.5～2.0 cm(平均1.7 cm)。手术时年龄3个月～5.6岁(平均2.4岁)。手术时间30～45 min(平均34.6 min)。所有手术术中估计出血量<5 mL。术后静脉予抗生素预防感染2～4 d。结果本组手术均成功。患儿术后住院2～4 d(平均2.8d)。全部患儿术后随访未发现术后并发症。结论微创开放切口肾切除术治疗儿童MCDK可以达到通过开放切口实现微创治疗的目的。本方法手术时间短,美容效果好,术后住院时间短,且安全、有效,容易开展。     

血管迷走性晕厥患儿无症状期间心率变异性分析

目的分析血管迷走性晕厥(VVS)患儿无症状期间的心率变异。方法选择本院45例临床诊断VVS的患儿为研究组,其中直立倾斜试验(HUTT)阳性者38例、阴性7例;匹配20例健康儿童为健康对照组。分析2组24 h心率变异时域及频域指标的变化。结果 1.研究组与健康对照组比较:时域指标SDNN(R-R间期)(121.82±33.0 vs 152.95±31.66,P<0.01)、SDANN(24 h内5 min节段平均心动周期的标准差)(114.42±33.41 vs 134.7±27.43,P<0.05)明显下降;频域指标低频功率/高频功率(LF/HF)(1.67±0.54 vs 1.25±0.20,P<0.01)明显升高。2.HUTT阳性组与阴性组时域及频域指标比较无明显差异(P>0.05)。3.血管抑制型(VD)与心脏抑制型(CI)患儿比较,SDNN(100.61±23.02 vs 150.5±29.46,P<0.01)、SDANN(96.78±28.77 vs 141.25±29.06,P<0.05)、rMSSD(相邻正常R-R间期差值的均值)(29.22±19.56 vs 53.75±23.08,P<0.05)、PNN50(全部NN间期中相邻的NN间期之差>50 ms的心搏数占所有NN间期个数的百分数)(11.29±9.31 vs 23.96±12.54,P<0.05)明显下降;LF(39.61±8.45 vs 19.68±4.17,P<0.01)、LF/HF(2.12±0.55 vs 1.09±0.11,P<0.01)明显升高。与混合型(MX)比较,VD患儿rMSSD(29.22±19.56 vs 52.57±18.54,P<0.05)、PNN50(11.29±9.31 vs 22.96±11.13,P<0.05)明显下降;LF(39.61±8.45 vs 29.72±9.87,P<0.05)、LF/HF(2.12±0.55 vs 1.38±0.30,P<0.01)则明显升高。CI型与MX型比较各指标之间无显著差异(P>0.05)。4.VD患儿与健康对照组比较:rMSSD(29.22±19.56 vs 49.55±14.10,P<0.05)、PNN50(11.29±9.31 vs 21.3±9.82,P<0.05)明显下降,LF(39.61±8.45 vs 25.49±5.03,P<0.05)显著升高。结论 VVS患儿无症状期间自主神经功能存在变化;rMSSD、PNN50及LF对预测VD型VVS可能具有参考价值。     

心理干预对手足口病患儿家长心理的影响

目的:探讨手足口病患儿家长面对应激事件的心理特征,以及心理干预对缓解家长心理危机的作用。方法:将48例手足口病患儿家长随机分为实验组和对照组,实验组进行心理干预,对照组仅进行一般护理,分别于入院心理干预前和干预后采用SCL-90评定两组患儿家长的心理状况。结果:实验组经心理干预后与对照组比较,焦虑抑郁等因子评分均明显下降,而对照组没有差异,个别因子评分甚至升高。结论:心理干预对手足口病患儿家长的心理状况有明显的改善作用。     

住院患儿护患沟通的路径化管理

目的:应用临床护理路径落实住院患儿护患沟通专项工作。方法:随机抽取8个住院病区为路径组,8个住院病区为普通组,普通组采用普通护患沟通;路径组依据临床护理路径,以住院患儿的疾病种类为基础,制定并使用护患沟通路径表,实行护患沟通责任制及患儿认证制。对两组住院患儿各沟通条目的结果、护理质控得分、护士对科室护患沟通工作的满意度进行比较。结果:8项沟通条目包括患儿熟悉住院须知(责任护士、制度、安全)、护士熟悉患儿病情及时告知相关治疗、护士主动指导所做检查项目、患儿对护士的操作技术满意、护士主动热情、护士会询问和关心患儿的感受、患儿对护士的信任度、护患沟通结果等两组比较差异有统计学意义(P<0.01);两组护理质控得分比较差异无统计学意义(P>0.05);护士对本科室护患沟通工作的满意率路径组为94.74%,普通组为87.77%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:实施护患沟通路径化管理是落实护患沟通工作的有效管理手段。     

儿童角膜炎-鱼鳞病-耳聋综合征一例及GJB2基因突变检测

患儿男，4岁2个月，因全身皮肤干燥、粗糙伴反复感染4年，于2017年11月13日就诊。患儿出生时发育正常，听力筛查无异常。1个月时头部、颈部、腹股沟出现红斑、丘疹并长期不愈，先后诊断为鱼鳞病、湿疹、间擦疹等……     

注意缺陷多动障碍儿童家庭环境特征和行为问题与社会功能损害关系的研究

目的 分析注意缺陷多动障碍(ADHD)儿童家庭环境特征和行为问题与社会功能损害之间的关系,为ADHD的临床诊断和治疗提供科学依据。 方法 选取2017年9月-2018年11月徐州市儿童医院140名ADHD儿童作为观察组,同时招募120名健康儿童作为对照组。采用自行设计的问卷、中文版家庭环境量表(FES-CV)、Conners父母评定量表(CPRS)、Conners教师评定量表(CTRS)和Weiss功能缺陷量表父母版(WFIRS-P)、现场行为观察法对儿童进行评估。采用Logistic回归模型预测ADHD风险因素。 结果 随着母亲受教育程度(OR=1.16,8.80,9.20)、职业地位(OR=0.89,2.24,2.35,5.90)和情绪稳定程度(OR=1.74)的降低,儿童ADHD风险呈上升趋势;父亲职业和教育水平、情绪状态与上述结果相似。ADHD儿童中文版家庭环境量表(FES-CV)中仅矛盾性分量表差异具有统计学意义(t=4.342,P<0.001)。ADHD儿童在所有6个Weiss功能缺陷量表父母版(WFIRS-P)的分量表测试中均表现出损伤[最低维度得分(0.19±0.22)分,健康儿童最高维度得分为(0.19±0.20)分,P<0.001)]。Conners父母评定量表(CPRS)和Conners教师评定量表(CTRS)除心身障碍维度外,其余差异均有统计学意义(P<0.001)。 结论 ADHD儿童与健康儿童相比,较差家庭环境、父母较低教育水平、更糟的职业状况和父母情绪不稳定可能会增加儿童的ADHD风险,且与儿童行为问题和社会功能损害相互作用。因此,早期以折中因素为重点的干预有助于改善ADHD儿童的社会行为功能。     

婴儿痉挛症患儿先天性代谢异常筛查

目的 探讨婴儿痉挛症(IS)患儿中不同先天性代谢异常情况,以利早期进行病因及对症治疗.方法 采用气相色谱-质谱法对30例IS患儿尿标本进行氨基酸、有机酸、脂肪酸、糖、核苷酸等代谢异常筛查,并进行尿常规、肝功能、血生化、脑部影像学及脑干听、视觉诱发电位等检查.结果 30例IS患儿中,23例(76.67％)尿筛查异常,其中甲基丙二酸尿症及酮性双羧酸尿症各4例(13.33％),非酮性双羧酸尿症3例(10.00％),苯丙酮尿症、戊二酸尿症、乳酸尿症和丙酸尿症各2例(6.67％),焦谷氨酸尿症、4-羟基苯丙酮酸尿症、色氨酸尿症及乳糖和半乳糖代谢异常各1例(3.33％).23例尿筛查异常病例均有不同程度的智力运动发育落后或倒退(100％).其中头颅CT或MRI异常12例(52.17％),脑干诱发电位异常20例(86.96％),肝功能异常3例(13.04％),血生化异常4例( 17.39％),尿常规酮体阳性(+～++)3例(13.04％).结论 先天性代谢异常是IS重要致病原因,对IS患儿应尽早进行先天性代谢异常筛查和遗传咨询,以助早期治疗及改善预后.     

临床护理路径在手足口病合并病毒性脑炎患儿中的应用

目的:探讨临床护理路径在儿科手足口病合并病毒性脑炎中的护理应用.方法:将88例患儿随机分为对照组和实验组各44例.对照组采用儿科整体护理方法,实验组在整体护理模式基础上应用临床护理路径模式对患儿进行评估,针对评估情况应用不同的护理系统.结果:两组住院时间、护理质量评价得分及护患双方满意度有显著性差异(P<0.05).结论:临床护理路径模式应用于手足口病合并病毒性脑炎患儿中,可预防院内感染,缩短住院时间,提高护理质量及护患双方满意度.