艾滋病痴呆综合征患者HIV-1B gp120基因的克隆及真核表达

目的 克隆艾滋病痴呆综合征(ADC)患者体内不同部位的HIV-1B gp120基因,并在人神经胶质瘤细胞U87中表达.方法 分别以一例ADC患者尸检标本的外周(淋巴结)和中枢(脉络丛、大脑枕叶白质)来源的基因组DNA为模板,PCR扩增HIV-1 gp120基因,序列测定后,将目的基因插入表达载体pcDNA3.1(+),构建重组表达载体gp120/pcDNA3.1(+),将所构建的重组表达载体用脂质体法转染人神经胶质瘤U87细胞,间接免疫荧光法测定HIV-IB gp120的表达情况.结果 克隆了ADC患者体内外周淋巴结、脉络丛、大脑枕叶白质3个部位的HIV-1B gp120基因,所构建的表达质粒gp120/pcDNA3.1(+)转染U87细胞后可表达目的蛋白.结论 ADC患者不同部位来源的HIV-1B gp120基因均可在U87细胞中表达,为进一步研究HIV-1B gp120包膜蛋白的神经毒性及其作用机制提供条件.     

基于心主血脉论治快速型心律失常临证体会

快速型心律失常是临床常见的心律失常类型,发病急、致死率高,且发病率呈逐年上升趋势,目前西医的治疗具有易复发、价格昂贵等局限性。中医药在治疗快速型心律失常方面疗效显著,此文从“心主血脉”失常的角度分析了快速型心律失常的病因病机,并据此提出补气温阳、养阴通脉、安神定悸的治法,方以人参四物汤加减治疗,验之临床收效甚佳,附验案1则以佐证。     

从脾虚痰阻血瘀谈血管性痴呆的发病机制

以中医学传统理论为依据,结合现代临床研究,探讨血管性痴呆的发病机制,提出脾虚痰阻血瘀为血管性痴呆的基本病机之一;详细论述了脾虚痰阻血瘀导致痴呆的发病机理,并认为脾虚痰瘀贯穿于疾病的始终,三者可以相互转化,互相交结为病。     

心电远程监测起搏器电极断裂致起搏功能障碍一例

随着起搏器功能的日益增多,植入起搏器作为治疗缓慢性心律失常的重要技术手段,已经挽救了数以万计患者的生命,但是在起搏器植入的过程中、植入术后仍存在一些并发症。本文通过心脏远程监测,详细记录了患者起搏器电极断裂的发现、处理过程,探讨了起搏器植入患者常遇到的问题及应对策略。     

环氧化酶2和乙酰肝素酶mRNA在肾癌中的表达

目的探讨环氧化酶2（COX 2）和乙酰肝素酶（Hpa）mRNA在肾癌（RCC）组织中的表达,分析其与RCC发生发展及预后的关系。方法采用逆转录-聚合酶链反应(半定量RT PCR)方法检测56例RCC组织标本及28例癌旁正常组织标本中COX 2 mRNA与Hpa mRNA的表达（β actin作为定量标准物）,观察其在RCC组织和癌旁组织中的表达差异以及与临床病理参数和预后的关系。结果56例RCC组织中COX 2 mRNA与Hpa mRNA阳性率分别为73.2％和67.9％,均高于癌旁正常组织（χ2＝17.719,χ2＝21.429,P均＜0.05）;COX 2 mRNA阳性表达率G1～G2高于G3～G4（χ2＝30.727,P＜0.05）,COX 2 mRNA表达与患者预后不相关（χ2＝0.890,P＞0.05）;Hpa mRNA阳性表达率与RCC病理分级、临床分期、淋巴转移密切相关（χ2＝7.718,χ2＝3.963,χ2＝3.852,P均＜0.05）,Hpa mRNA表达与患者预后相关（χ2＝12.72,P＜0.05）;COX 2 mRNA与Hpa mRNA的阳性表达不相关（r＝-0.244,P＞0.05）。结论COX 2 mRNA高表达是RCC发生的早期分子事件;Hpa mRNA高表达与RCC进展、转移、预后等密切相关。     

血管内皮功能与糖尿病肢体动脉闭塞症中医辨证关系的研究

目的:研究血管内皮功能在糖尿病肢体动脉闭塞症中的变化及其与中医辨证分型的关系。方法:40例糖尿病肢体动脉闭塞症患者为观察组(A组),分为血瘀型组(A_1组)和湿热下注型组(A_2组),并设单纯糖尿病组(B组)、闭塞性动脉硬化症组(C组)和健康组(D组)各20例进行对照。所有受检者均通过超声进行内皮依赖性舒张功能(endothelium-dependent dilation,EDD)和非内皮依赖性舒张功能(endothe- lium-independent dilation,EID)检测,并测定内皮素-1(endothelin-1,ET-1)、血栓素B_2(thromboxane B_2,TXB_2)、6-酮-前列腺素F_(1α)(6-keto-prostaglandin F_(1α),6-Keto-PGF_(1α))及一氧化氮(nitric oxide,NO)的浓度。结果:A组EDD较B、C、D对照组明显降低,ET-1、TXB_2水平高于B、C、D对照组,NO、6-Keto-PGF_(1α)水平低于B、D对照组,且EDD与ET-1、TXB_2水平呈负相关,与NO、6-Keto-PGF_(1α)水平呈正相关。A_2组EDD低于A_1组,而且EID也下降。结论:内皮功能障碍在糖尿病肢体动脉闭塞症的发病中起重要作用,且在不同中医证型中有着不同的变化。     

益心舒胶囊与氟伐他汀对动脉粥样硬化内皮功能的影响

目的观察益心舒胶囊与氟伐他汀对兔动脉粥样硬化内皮功能的影响。方法 32只新西兰大白兔随机分为正常对照组、高脂组、益心舒胶囊组、氟伐他汀组各8只,喂养4个月后耳缘静脉取血,采用酶学方法测定各组动物的血脂水平;处死动物后取胸主动脉,做内皮依赖性舒张功能检测,HE染色观察病理形态变化。结果高脂组TC、LDL明显高于正常对照组(P<0.05),益心舒组及氟伐他汀组的TC及LDL水平均明显低于高脂组(P<0.05),益心舒组低于氟伐他汀组(P<0.05)。益心舒组及氟伐他汀组舒张最大值高于高脂组(P<0.05),但两者均低于正常对照组(P<0.05)。益心舒组及氟伐他汀组血管病理改变均较高脂组减轻。结论益心舒及氟伐他汀治疗能改善血管内皮依赖性舒张功能,明显减轻实验性动脉硬化兔的动脉硬化程度。     

核因子E2p45相关因子2基因在茶多酚调节结肠癌细胞尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶1A及其同工酶表达中的作用

目的探讨核因子E2p45相关因子2(Nrf2)基因在茶多酚中的主要化学物质epigallocatechin gallate(EGCG)诱导结肠癌细胞尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGT)1A及其同工酶UGT1A8、UGT1A10表达中的调节作用。方法EGCG分别作用Caco-2及HT-29结肠癌细胞12h,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测基因表达水平的变化,免疫细胞化学及激光共聚焦显微镜观察细胞内Nrf2蛋白定位的改变。此外,利用RNA干扰技术抑制细胞内Nrf2基因的表达,观察阻断前后EGCG对基因表达水平影响的改变。结果(1)Caco-2及HT-29结肠癌细胞系、结肠癌及癌旁组织中UGT1A、1A8、1A10基因表达水平存在差异。(2)EGCG作用Caco-2及HT-29细胞后Nrf2、UGT1A、1A8、1A10表达升高1.8~9.2倍(均P<0.05),免疫细胞化学及激光共聚焦显微镜检测到Nrf2蛋白向细胞核内聚集。(3)酶切分析和测序证实成功构建了RNA干扰真核表达载体pSilence-Nrf2-A、B、C、D及随机序列对照pSilence-CON。(4)pSilence-Nrf2-B质粒转染可显著抑制Nrf2基因的表达,在Caco-2及HT-29细胞中抑制率分别为81.46%±1.68%及84.72%±2.08%(实验重复3次);稳定筛选建立的Nrf2低表达的细胞系Caco-2-siNrf2、HT-29-siNrf2,不仅基础UGT1A酶的表达水平降低,而且EGCG作用后酶诱导表达的作用消失。结论Nrf2基因参与了EGCG诱导UGT1A及其同工酶表达的过程并在其中起关键作用,为进一步论证EGCG在结肠癌化学预防中的作用及其可能的机制提供了新的论据。     

脑宁康颗粒对脑出血大鼠的脑保护作用

目的研究依据清热解毒法制成的脑宁康颗粒对脑出血大鼠脑组织的保护作用及机制。方法将大鼠随机分为5组：假手术组、脑出血模型组、脑宁康小、中、大剂量组,采用胶原酶Ⅶ诱导大鼠脑出血模型,术后2h各治疗组给予不同剂量脑宁康颗粒灌胃,余组给予等容量生理盐水,连续用药3天和7天后取脑组织,采用HE染色观察脑组织病理形态学改变,免疫组织化学法和TUNEL法分别检测脑出血周围组织凝血酶受体-1（PAR-1）的表达和神经细胞凋亡情况,干湿比重法测定脑组织水肿情况。结果脑出血大鼠脑组织PAR-1表达增强,各脑宁康治疗组脑组织病理形态明显改善,脑组织PAR-1表达减少,TUNEL阳性细胞数减少,脑水肿减轻,与模型组比较差异有显著性（P〈0.05,P〈0.01）。结论脑出血后的脑组织PAR-1高表达可能介导了神经细胞凋亡和脑水肿,脑宁康颗粒对出血脑组织有保护作用,可能与其抑制脑出血后脑组织PAR-1表达、减少细胞凋亡,从而减轻脑水肿相关。     

玉米胚芽油对小鼠免疫功能的影响

目的 探讨玉米胚芽油对小鼠免疫功能的影响.方法 将192只雌性KM小鼠随机均分为4个免疫组,每个免疫组的48只小鼠再均分为阴性对照组、玉米胚芽油低、中、高剂量组,阴性对照组灌胃花生油,玉米胚芽油实验组的剂量分别为1.67、3.33、10.00 mL/kg·bw,连续灌胃30 d,测定各项免疫指标.结果 与阴性对照组比较,玉米胚芽油低、高剂量组可提高小鼠的足跖肿胀度(P＜0.05,P＜0.01);低、中、高剂量组均能提高小鼠抗体生成细胞数(P＜0.01);高剂量组可增强小鼠单核-巨噬细胞碳廓清能力(P＜0.01);低、中、高剂量组均能增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力(P＜0.01);中、高剂量组可增强小鼠的NK细胞活性(P＜0.01,P＜0.05);低、中、高剂量组对小鼠的脾/体体质量比值、胸腺/体质量比值、小鼠的血清溶血素水平和脾淋巴细胞增殖能力没有明显影响(P＞0.05).结论 玉米胚芽油具有增强小鼠免疫力的作用.