新型MUC1黏蛋白模拟表位原核表达、纯化和鉴定

目的对新筛选的MUC1模拟表位进行克隆表达、纯化和鉴定。方法从噬菌体随机12肽库中筛选出新的MUC1的模拟表位，目的基因片段克隆人表达质粒PET-31b（＋），转化大肠杆菌BL21（DE3）plysS，IPTG诱导表达，亲和层析纯化，Western blot鉴定。结果成功构建了重组表达质粒，诱导表达出新的MUC1模拟表位重组蛋白，纯化的目的蛋白在SDS-PAGE上呈现特异的单一条带，Western印迹也检测到目的蛋白特异条带。结论成功获得了新的MUC1模拟表位表达产物，为其在肿瘤疫苗方面的应用研究创造条件。     

异基因脾细胞联合环孢素A延长移植心肌存活时间的研究

目前影响器官移植的主要障碍是免疫排斥反应 ,诱导受者产生供者特异性免疫耐受是克服移植排斥反应的理想方法。近年来 ,国外学者采用术前给予受者输注供者或同种异体抗原等方法诱导受者产生特异性移植免疫耐受[1,2 ] 。本实验主要观察移植前尾静脉内注射异基因抗原、联合术后短期用环孢素A对异位移植心肌存活的影响。1　材料与方法1·1　动物来源　近交系NIH小鼠 (H - 2 k)、Balb/c小鼠 (H - 2 b)、C5 7BL/ 6 ((B6 )小鼠 (H - 2 d) ,清洁级 ,8～10周龄 ,体重 (2 0± 2 )g ,雄性 ,新生鼠为刚出生 2 4h内 ,性别不限 ,购自第三军医大学实…     

HLA衍生肽RDP1258延长大鼠移植心脏存活时间

目的　观察HLA衍生肽RDP1258对大鼠同种移植心脏存活时间的影响。方法人工合成HLA衍生肽RDP1258;建立大鼠心脏腹部移植模型,随机分为4组。(1)对照组:心脏移植前后不用任何药物;(2)环孢素A(CsA)组:心脏移植前后给予CsA灌胃;(3)RDP1258组:心脏移植前后给予PDP1258腹腔注射;(4)RDP1258 CsA组:心脏移植前后联合给予RDP1258和CsA。分别观察人工合成的RDP1258纯度、移植心存活时间及移植心组织的光镜及电镜检查情况。结果RDP1258纯度达95%以上,分子量与理论值相符。大鼠移植心脏存活时间:对照组为(8.00±2.90) d,CsA组为(13.38±3.62)d,RDP1258组为(33.29±10.09)d,RDP1258 CsA组为(85.38±18.34) d。RDP1258组和RDP1258 CsA组与对照组比较,移植心脏存活时间显著延长。RDP1258组和RDP1258 csA组移植心病理改变较轻,超微结构无明显改变。结论RDP1258能抑制急性排斥反应,围手术期给予RDP1258和CsA,能够明显延长大鼠移植心脏存活时间。     

短期新辅助内分泌治疗对前列腺癌组织中MUC1表达的影响

目的 探讨短期新辅助内分泌治疗(NHT)前后前列腺癌组织MUC1表达水平的变化及其临床意义.方法 2004年1月至2011年1月21例前列腺癌患者纳入本研究,患者经B超引导下行前列腺穿刺活检病理检查确诊为前列腺癌后先行NHT 3 ～9个月,然后行前列腺癌根治性切除术.NHT采用促性腺激素释放激素激动剂联合抗雄激素药物的最大雄激素阻断治疗.取NHT前穿刺活检标本及NHT后的前列腺癌根治性切除术后大体标本采用免疫组织化学方法检测前列腺癌组织内MUC1表达水平;检测血清总前列腺特异抗原(tPSA)水平;前列腺癌组织分级采用Gleason评分系统;NHT后MUC1表达与血清tPSA水平及Gleason评分的相关性采用Spearman's相关分析.结果 NHT治疗前癌组织中MUC1表达弱阳性,染色强度为(1.52 ±0.59);NHT治疗后MUC1表达增强,染色强度为(2.27 ±0.88),NHT后MUC1表达高于NHT前,差异有统计学意义(P＜0.05);治疗前后前列腺癌Gleason评分分别为(6.5±0.3)、(6.1±0.8),差异无统计学意义(P＞0.05);NHT治疗前后血tPSA水平分别为(80.81 ±22.26) ng/ml、(4.11±1.72)ng/ml,差异有统计学意义(P＜0.01).NHT治疗后前列腺癌组织中MUC1表达与前列腺癌Gleason评分无相关性(r=0.075,P＞0.05),与血清tPSA水平呈正相关(r=0.507,P＜0.05).结论 短期NHT可使前列腺癌细胞内MUC1表达上调,针对MUC1的辅助治疗有可能提高短期NHT的效果.     

复方枸橼酸合剂对尿路结石的预防作用(附132例报告)

目的 :研究复方枸橼酸合剂对尿路结石的预防作用。方法 :通过对实验组 1 32例经 ESWL治疗后尿路结石已排净的患者给予复方枸橼酸合剂预防尿路结石复发 ,与对照组 87例结石排净后未服用枸橼酸合剂的患者进行对比。结果 :实验组结石复发率为 1 .5% ,与对照组复发率 6.9%比较 ,有极显著性差异 ( P <0 .0 1 )。结论 :复方枸橼酸合剂有明显抑制尿路结石复发的作用。     

负载供者抗原的第三方树突状细胞延长大鼠移植心脏存活

目的 观察负载供者抗原第三方未成熟DC对大鼠同种异体移植心脏存活期的影响.方法 培养骨髓来源第三方大鼠未成熟DC,负载供者抗原,CTLA-4 Ig致耐受处理.建立大鼠心脏腹部移植模型,A组:心脏移植;B组:心脏移植,术前输注供者源未成熟DC;C组:心脏移植,术前输注第三方未成熟DC;D组:心脏移植,术前输注负载供者抗原致耐受第三方未成熟DC.分别行移植心病理、IFNγmRNA表达和移植心存活时间观察.结果 D组的移植心病理改变轻,IFNγmRNA表达下调,移植心脏存活时间显著延长.结论 负载供者抗原第三方致耐受未成熟DC能够诱导供者特异性免疫耐受,明显延长大鼠移植心脏存活时间.     

HLA衍生肽RDP1258对大鼠淋巴细胞增殖活性的影响

目的探讨合成HLA衍生肽RDP1258对T细胞活化、增殖活性的影响。方法采用Fmoc固相化学合成法人工合成RDP1258，MTT法分别进行大鼠淋巴细胞增殖试验、大鼠单向混合淋巴细胞反应（MLR）及人外周血淋巴细胞毒试验。结果合成RDP1258纯度达95％以上，相对分子质量与理论值相符；RDP1258显著抑制刀豆蛋白A（ConA）刺激的淋巴细胞增殖；RDP1258能抑制单向MLR反应体系中应答细胞对刺激细胞的反应能力。结论RDP1258体外能抑制由丝裂原或同种异体抗原引起的大鼠淋巴细胞增殖反应。     

新型MUC1黏蛋白模拟表位原核表达、纯化和鉴定

目的对新筛选的MUC1模拟表位进行克隆表达、纯化和鉴定。方法从噬菌体随机12肽库中筛选出新的MUC1的模拟表位,目的基因片段克隆入表达质粒PET-31b(+),转化大肠杆菌BL21(DE3)plysS,IPTG诱导表达,亲和层析纯化,Western blot鉴定。结果成功构建了重组表达质粒,诱导表达出新的MUC1模拟表位重组蛋白,纯化的目的蛋白在SDS-PAGE上呈现特异的单一条带,Western印迹也检测到目的蛋白特异条带。结论成功获得了新的MUC1模拟表位表达产物,为其在肿瘤疫苗方面的应用研究创造条件。     

血清PSA及PSA密度与前列腺癌分级分期的关系

目的：提高前列腺癌（PCa）的诊断水平。方法：回顾了60例经穿刺活检确诊PCa患者的临床资料。结果：60例PCa患者中,血清T—PSA含量、F-PSA含量、F／T分别与PCaGleason分级、临床分期均呈正相关,F／T与PCaGleason分级、临床分期均无显著相关。结论：PCa患者的血清T—PSA、F—PSA和PSAD与Gleason分级和临床分期存在相关,提示可能通过检测血清T—PSA、F-PsA和PSAD预测PCa恶性程度及预后,有利于PCa的筛查及制定合理的治疗方案。