黄葵和银杏叶提取物对实验性肾病综合征的疗效比较及机理探讨

目的观察黄葵和银杏叶提取物(ECB761)对实验性肾病综合征的疗效,并探讨可能机理。方法按体重将大鼠随机分为正常组、模型组、模型 EGB761组、模型 黄葵组；正常组一次性注射生理盐水,其余各组一次性尾静脉注射阿霉素(ADR)制成微小病变型肾病综合征(MCNS)模型；两治疗组于造模2周后开始用药,各组每2周测定24 h尿蛋白,实验8周末测定血清TP、Alb、总SOD、MDA含量；肾组织作光镜、电镜检查。结果(1)两治疗组尿蛋白量下降幅度均显著大于模型组(P＜0．01)；(2)实验8周末,两治疗组血清TP、Alb升高幅度均显著大于模型组(P＜0．01和P＜0．05)。(3)两治疗组总SOD水平均显著高于模型组(P＜0．01),MDA显著低于模型组。结论黄葵和EGB761能显著降低MCNS模型大鼠的蛋白尿；其减轻尿蛋白的作用与清除氧自由基有关。     

Hypoxia and HIF-1α expression in the epiphyseal cartilage following ischemic injury to the immature femoral head

HIF-1α has been shown to be a central mediator of cellular response to hypoxia. The role it plays after ischemic injury to the immature femoral head is unknown. The purpose of this study was to determine the region of the femoral head affected by hypoxia following ischemic injury to the immature femoral head and to determine the site of HIF-1α activation and revascularization. We hypothesize that the epiphyseal cartilage, rather than the bony epiphysis, is the site of HIF-1α activation following ischemic osteonecrosis and that the epiphyseal cartilage plays an important role in the revascularization process.Materials and methodsFemoral head osteonecrosis was surgically induced in 56 immature pigs. Hypoxyprobe staining, cell viability assay, HIF-1α western blot, RT-qPCR of HIF-1α, VEGF, VEGFR2, and PECAM, and micro-CT assessments of microfil-infused femoral heads were performed.ResultsSevere hypoxia was present in the bony epiphysis and the lower part of the epiphyseal cartilage following ischemia. In the bony epiphysis, extensive cell death and tissue necrosis was observed with degradation of proteins and RNAs which precluded further analysis. In the epiphyseal cartilage, the loss of cell viability was limited to its deep layer with the remainder of the cartilage remaining viable. Furthermore, the cartilage from the ischemic side showed a significant increase in HIF-1α protein level and HIF-1α expression. VEGF expression in the cartilage was dramatically and significantly increased at 24 h, 2 and 4 weeks (p < 0.05 for all) with 5 to 10 fold increase being observed on the ischemic side compared to the normal side. PECAM and VEGFR2 expressions in the cartilage were both significantly decreased at 24 h but returned to the normal levels by 2 and 4 weeks, respectively. Micro-CT showed revascularization of the cartilage on the ischemic side with the vessel volume/total volume equaling the normal side by 4 weeks.ConclusionsAcute ischemic injury to the immature femoral head induced severe hypoxia and cell death in the bony epiphysis and the deep layer of the epiphyseal cartilage. Viable chondrocytes in the superficial layer of the epiphyseal cartilage showed HIF-1α activation and VEGF upregulation with subsequent revascularization occurring in the cartilage.     

肌肉骨骼系统慢性疼痛管理专家共识

肌肉骨骼系统慢性疼痛是临床最常见的慢性疼痛。目前,国内外医师对慢性疼痛的认识、临床实践环境、镇痛药物种类/使用经验/了解程度、医保药品收录均有差异,故有效、规范化的慢性疼痛管理显得尤为必要。因此,亟待制定完善的、基于生物-心理-社会医学等因素的跨学科慢性疼痛管理共识,提高广大医务人员对慢性疼痛的认识与重视、规范指导慢性疼痛的管理,提高医疗质量、降低医疗成本,消除患者感觉、情感、认知和社会维度的痛苦体验,在治疗患者原发疾病的同时,改善患者的心理需求和社会功能需求。通过查阅文献,本共识专家组遵循循证医学原则,经过反复讨论和通信修改,对肌肉骨骼系统慢性疼痛管理达成共识,供广大骨科医师在临床工作中参考。     

双硫仑联合铜离子对乐伐替尼耐药肝癌细胞Huh7增殖及凋亡的影响

目的建立乐伐替尼肝细胞肝癌(简称"肝癌")细胞耐药模型,以研究双硫仑联合铜离子对乐伐替尼耐药细胞Huh7增殖和凋亡的影响。方法通过CCK8法检测乐伐替尼作用下Huh7细胞的半抑制浓度(IC50),采用浓度递增法诱导Huh7细胞乐伐替尼耐药。各组细胞处理:对照组为Huh7细胞加普通培养液培养后的细胞;敏感组为Huh7细胞加10μmol/L乐伐替尼培养后的细胞;耐药组为耐药Huh7细胞加10μmol/L乐伐替尼培养后的细胞;联合组为耐药Huh7细胞加10μmol/L乐伐替尼+1μmol/L双硫仑+0.5μmol/L铜离子培养后的细胞;抑制剂组为耐药Huh7细胞加10μmol/L乐伐替尼+10μmol/L Akt抑制剂MK2206培养后的细胞。CCK8法及流式细胞术分别检测细胞的存活率和凋亡率;Western blot法检测磷酸化-Akt(p-Akt)和半胱氨酸蛋白酶9(caspase-9)和B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)蛋白表达;Transwell法检测细胞侵袭性。结果乐伐替尼耐药细胞系成功建立,选取10、20、40、60、80及160μmol/L 6个乐伐替尼浓度对Huh7细胞作用48 h后计算得出细胞IC50为12.35μmol/L。耐药组细胞存活率明显高于敏感组(P<0.01),联合组细胞存活率明显低于耐药组(P<0.01),抑制剂组细胞存活率明显低于耐药组(P<0.05)。与耐药组比较,联合组及抑制剂组p-Akt蛋白表达明显降低(P<0.01)、caspase-9明显升高(P<0.01),而Bcl-2蛋白在耐药组和联合组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。联合组细胞凋亡率明显高于耐药组(P<0.01)。Transwell结果显示联合组的肿瘤细胞侵袭数明显少于耐药组(P<0.01)。结论双硫仑联合铜离子能增加乐伐替尼对乐伐替尼耐药肝癌细胞Huh7的敏感性,同耐药组相比其细胞抑制率明显提高,其机制可能与抑制磷脂酰肌醇-3-激酶/Akt通路及促进caspase-9蛋白表达有关。     

哮喘患者血清中循环lncRNA差异性表达的初步筛查

目的 对哮喘患者血清中差异性表达的lncRNA进行初步筛选,找到可以对哮喘诊断提供临床意义的潜在新型分子标志物.方法 收集哮喘患者血清50例,健康体检者血清32例,选择17种循环lncRNA,包括HULC、PRNCR1、TUSC7、PCGEM1、PCA3、TUC338、MEG3、UCA1、PTENP1、SNHG16、MALAT1、THRIL、NAET1、lnc-IL7R、GAS5、MIR155HG、TUG1.利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测lncRNA在血清中的差异性表达.结果 对17种lncRNA进行筛查表明,lncRNA PCGEM1在哮喘患者血清中表达水平显著低于体检者血清(P<0.01).另外,GAPDH作为内参,在筛选lncRNA的过程中表达稳定,其不受样本年龄、性别、发病情况的影响.结论 lncRNA PCGEM1在哮喘患者血清中显著低表达,可能成为临床诊断哮喘潜在的新型分子标志物.GAPDH可以作为本实验的循环lncRNA筛选的内参.     

氧化樟脑注射液联合环磷腺苷葡胺治疗心力衰竭的临床研究

目的探讨氧化樟脑注射液联合环磷腺苷葡胺治疗心力衰竭的临床疗效。方法选取2016年9月—2017年9月在哈尔滨医科大学附属第四医院治疗的心力衰竭患者86例,随机分为对照组(43例)和治疗组(43例)。对照组静脉滴注环磷腺苷葡胺注射液,180 mg加入5%葡萄糖注射液500 mL,1次/d;治疗组在对照组基础上肌肉注射氧化樟脑注射液,2 mL/次,1次/d。两组均治疗2周。观察两组患者临床疗效,同时比较治疗前后两组患者心功能指标和血清细胞因子水平。结果治疗后,对照组和治疗组临床总有效率分别为83.72%和97.67%,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组左室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期容积(LVESV)和左心室收缩末期内径(LVESD)均显著降低(P0.05),左心室射血分数(LVEE)显著升高(P0.05),且治疗组心功能明显优于对照组(P0.05)。治疗后,两组血清氨基末端脑钠肽前体(NT-proBNP)、β内啡肽(β-EP)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肌钙蛋白(cTnT)水平显著降低(P0.05),血管内皮生长因子(VEGF)和类胰岛素一号增长因子(IGF-1)水平显著升高(P0.05),且治疗组上述血清细胞因子水平明显优于对照组(P0.05)。结论氧化樟脑注射液联合环磷腺苷葡胺治疗心力衰竭效果显著,可有效改善患者心功能,降低机体炎症反应,从而降低心肌重塑风险。     

牙龈卟啉单胞菌感染血管平滑肌细胞的超微结构观察

目的:观察牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)对大鼠胸大动脉平滑肌细胞黏附及入侵情况,探讨Pg对血管平滑肌细胞的损伤途径,为牙周病在动脉粥样硬化发病机制中的研究提供依据.方法:用感染复数(multiplicity of infection,MOD为100∶1 Pg感染大鼠胸大动脉平滑肌细胞,分别于8、16 h TEM观察Pg对血管平滑肌细胞的黏附和入侵能力.结果:Pg感染大鼠胸大动脉平滑肌细胞16h时,Pg能利用表面菌毛黏附于血管平滑肌细胞表面并入侵胞质内.结论:Pg能够黏附于大鼠胸大动脉平滑肌细胞,并入侵细胞质,定植于细胞内.     

单核细胞趋化蛋白-1和细胞间黏附分子-1与动脉粥样硬化和牙周病的关系

以动脉粥样硬化为病理基础的冠心病是目前主要的致死性疾病之一,而牙周病与动脉粥样硬化之间存在着一定的相关性。单核细胞趋化蛋白(MCP)-1和细胞间黏附分子(ICAM)-1在动脉粥样硬化和牙周病的发生发展中起着重要的作用。本文就MCP-1和ICAM-1以及二者与动脉粥样硬化、牙周病间的关系作一综述。     

百合皂苷的提取工艺与抗抑郁作用研究

目的:研究百合皂苷的提取工艺与抗抑郁作用。方法:以乙醇体积分数、乙醇用量、提取时间为考察因素,以百合皂苷提取率为指标,通过L9(34)正交试验优选百合皂苷提取工艺。将小鼠分为正常对照(等容生理盐水)组、氟西汀(0.004 g/kg)组与百合皂苷高、中、低剂量(0.100、0.050、0.025 g/kg)组。悬尾实验和强迫游泳实验均记录小鼠4 min内不动时间;拮抗利血平降低小鼠体温实验中记录复制模型4 h后小鼠体温。结果:百合皂苷最佳提取工艺为加入1倍量的70%乙醇,提取3 h。与正常对照组比较,百合皂苷提取物高、中剂量组小鼠4 min内悬尾不动时间、游泳不动时间均缩短,差异均有统计学意义(P<0.05);复制模型4 h后小鼠体温变化减小,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:百合皂苷具有一定的抗抑郁作用。