胞嘧啶脱氨酶的原核表达和多克隆抗体的制备

目的：在原核系统中表达并纯化大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶（cytosine deaminase,CD)，制备鼠抗大肠杆菌CD多克隆抗体，方法：亚克隆CD基因到原核表达载体pMAL-c2和pBV222中，并转化入大肠杆菌DH5α内，诱导表达并纯化MBP-CD和6his-CD融合蛋白，用纯化的MBP-CD融合蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体。结果：通过重组质粒的酶切筛选出重组阳性克隆，成功地表达和纯化出MBP-CD和6his-CD融合蛋白，用纯化的MBP-CD成功制备了鼠抗CD多克隆抗体，并用6his-CD和GST-CD重组蛋白进行Western印迹分析，证实了抗体的正确性，结论：应用多克隆抗体可以检测体内外CD基因的表达，为临床前和临床上深入开展CD基因的生物治疗研究提供重要的实验材料。     

胃肠道间质肿瘤的临床病理特征

胃肠道间质肿瘤(GISTs)是胃肠道间叶性肿瘤中最常见的类型,表达Kit蛋白,向Cajal细胞分化(或起源于Cajal细胞)。诊断GISTs需结合光镜、免疫组织化学、电镜检查,免疫组织化学检查是目前正确诊断GISTs最主要而简便的方法。本文阐述了GISTs的病理机制、鉴别诊断、治疗及预后相关因素。     

TANGO2全身敲除小鼠在生理条件下正常发育和繁殖

目的：利用运输和高尔基体组织蛋白2同系物(transport and Golgi organization protein 2 homolog,TANGO2)敲除小鼠阐明TANGO2在哺乳动物中的生理功能,探究TANGO2是否是导致DiGeorge综合征发生的候选基因。方法：制备TANGO2敲除小鼠模型,通过实时荧光定量PCR检测该小鼠模型的基因敲除效率。观察并记录野生型、杂合和纯合敲除小鼠的表型和生长繁育情况。通过组织解剖和组织学分析,观察野生型和敲除小鼠的心脏和大脑组织的形态结构。结果：TANGO2 mRNA在野生型小鼠的心脏和大脑中表达,而在敲除小鼠相应组织中的表达水平显著降低。TANGO2敲除小鼠发育正常,能够存活和繁殖,没有明显的表型异常。与野生型同窝仔相比,生存率没有显著差异。组织形态分析显示,新生敲除小鼠和6月龄敲除小鼠的心脏和大脑与野生型之间无明显差异。结论：TANGO2敲除小鼠能够正常发育和繁殖,并且缺乏人类中TANGO2相关疾病或DiGeorge综合征的相关表型。     

半夏厚朴汤醇提物对大鼠慢性抑郁模型的影响

目的 :研究半夏厚朴汤醇提物对大鼠慢性抑郁模型 (CMS)的影响 ,探索其抗抑郁机制。方法 :以 1%蔗糖水摄入量作为指标 ,慢性给予各种低强度复合刺激 ,造成大鼠慢性抑郁模型。按试剂盒酶法测定血脂 ;采用乳酸脱氢酶 (LDH)释放法测定脾细胞内自然杀伤细胞活性 ;采用邻苯三酚自氧化法测定红细胞内超氧化物岐化酶活性 ;按试剂盒显色法测定血清和组织中一氧化氮合酶活性 ;采用硫代巴比妥酸法测定心脏中丙二醛含量。结果 :在大鼠CMS模型中半夏厚朴汤醇提物可增加动物蔗糖摄入量 ;增加其脾脏自然杀伤细胞活性 ;升高血清中高密度脂蛋白 (HDL C)水平 (P<0 .0 5 ) ,降低甘油三酯水平 (P<0 .0 0 1) ;降低血红细胞内超氧化物岐化酶活性及血清和肝组织中一氧化氮合酶活性 ;同时抑制组织中脂质过氧化程度 ,降低心肌组织中丙二醛含量。结论 :半夏厚朴汤醇提物通过多途径而达到抗抑郁作用。     

吉西他滨联合铂类药物治疗晚期胰腺癌的疗效观察

目的 观察吉西他滨(健择)联合顺铂/草酸铂(GP/GEM-OX方案)治疗晚期不能手术或手术后复发的胰腺癌患者的疗效与不良反应。方法 28例患者分别给予GP或GEM-OX方案2～13周期。按WHO标准评定疗效和不良反应。结果 26例可评价疗效，无一例完全缓解(CR，0％)，部分缓解(PR)7例(26．9％)，稳定(SD)10例(38．5％)，进展(PD)9例(34．6％)。可评价临床受益反应(CBR)27例，有效率为70．4％(19／27)。中位疾病进展时间为4．2个月，中位生存时间为9．3个月。结论 健择联合顺铂/草酸铂是治疗晚期胰腺癌患者的安全有效方案，并能较好改善疾病相关症状，毒副反应可以耐受。     

液相色谱-质谱测定鸦胆子油脂肪乳注射液在癌症患者体内的血药浓度

目的 建立液相色谱-质谱(LC-MS)法测定癌症患者单剂量滴注鸦胆 子油脂肪乳后体内油酸浓度。方法 用自身对照试验设计,7名癌症患者,第3 天不给药,抽取不同时间点空白血浆样品;第5天,单剂量滴注鸦胆子油脂肪乳 注射液100 mL,滴注开始后,抽取不同时间点血浆样品,60 min滴完,用LC- MS法测定血药浓度。结果 线性范围为2．44-156 mg·L-1;日内、日间变异 系数均<14％;7名癌症患者单剂量滴注鸦胆子油脂肪乳注射液100 mL后,主 要药代动力学参数:tmax=(1．08±0．19)h,Cmax(95．20±29．10)mg·L-1, AUC0-7h=(265．67±59．32)mg·h·L-1,t1／2=(12．14±6．42)h。结论 本法 适用临床测定血浆中油酸浓度。     

水花生提取物对3种气单胞菌的抑菌作用

水花生Alternanthera philoxeroides(Mart.)Griseb.为苋科莲子草属多年生水陆两栖草本植物,俗称革命草、空心苋、喜旱莲子草、空心莲子草、螃蜞菊等,现主要分布于我国黄河流域以南地区。水花生有清热凉血、利水解毒之功效。临床用于流感、乙型脑炎、流行性出血热、麻疹和毒蛇咬伤等症。水花生的提取及其对疾病防治方面的研究曾有过报道[1~4]。本实验研究水花生提取物对3种气单胞菌的抑菌作用,为其临床使用提供理论依据。1材料与方法1.1中药的来源和加工:实验用的水花生于2003年9月采于南京市玄武湖水中,经南京大学钦佩教授鉴定。采集全草,…     

复方人参注射液核磁共振指纹图谱研究

目的:建立复方人参注射液(人参、陈皮等)的核磁共振指纹图谱,探索质量控制的新方法.方法:运用核磁共振技术对复方人参注射液的中间体和成品进行指纹图谱研究,探索简便易行的指纹图谱分析方法.结果:通过对中间体和注射液的图谱相似度分析,表明工艺流程稳定,重现性良好.结论:核磁共振技术可以作为中成药指纹图谱研究的辅助方法以控制中药质量.     

齐墩果酸乌苏酸积雪草酸护肝及抗氧化作用的比较研究

目的 研究比较3种五环三萜化合物齐墩果酸(OA)、乌苏酸(UA)、积雪草酸(AA)的护肝及抗氧化作用.方法 建立小鼠D-氨基半乳糖/脂多糖(D-GalN/LPS)肝损伤模型,检测OA、UA、AA对损伤小鼠血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性以及肝组织脂质过氧化的影响;运用体外自由基清除试验,测定3种化合物对超氧阴离子和羟自由基的清除作用.结果 100 mg·kg-1 OA、UA、AA均能有效抑制D-GalN/LPS引起的小鼠血清AST及ALT活性的显著上升;明显减少肝组织脂质过氧化产物MDA的生成;一定浓度3种化合物能有效清除超氧阴离子和羟自由基,且3个化合物清除自由基能力存在显著差异.结论 3种五环三萜化合物OA、UA、AA均具有显著护肝和抗氧化活性,且AA、UA的护肝作用优于OA,其机理可能与其具有更强的清除自由基能力有关.     

脱氢表雄酮增强双丁酰环磷酰苷促进细胞分化的作用及可能机制

目的　观察脱氢表雄酮 (DHEA)是否能增强cAMP的类似物双丁酰环磷酰苷 (DbcAMP)促进神经突起的形成和生长及可能的机制。方法　利用NG10 8 15细胞这一具有神经元形态和功能的细胞系 ,在药物处理后 ,倒置显微镜下观察突起的生长状况 ,并测定突起的长度和有突起的细胞数 ;明胶酶谱分析NG10 8 15细胞在药物处理后 ,上清的基质金属蛋白酶 (MMP)MMP 9和MMP 2的分泌和酶的活性的变化。结果　①DHEA和DbcAMP可抑制NG10 8 15细胞的增殖 ;②DHEA可增强DbcAMP促进NG10 8突起生长的作用。Db cAMP可以诱导NG10 8细胞突起的形成和生长 ,而DHEA收稿日期 :2 0 0 4-0 2 -0 3 ,修回日期 :2 0 0 4-0 4-19作者简介 :廖　红 ( 1965 -) ,女 ,副教授 ,博士 ,研究方向 :分子药理、神经药理 ,Tel:0 2 5 83 5 93 3 74;E mail:liaohong5 6@hotmail.com与DbcAMP同时作用 ,NG10 8 15细胞突起的长度明显增加 ,而且有突起的细胞数也明显增多 ,DHEA的剂量越高 ,这种促NG10 8 15细胞突起生长的作用越明显。③基质金属蛋白酶参与神经元的分化。DbcAMP能诱导MMP 9和MMP 2的分泌 ,与之相比 ,DHEA +DbcAMP使NG10 8 15细胞的MMP 9和MMP 2的分泌明显增多 ,且具有剂量依赖关系。结论　DHEA具有增强DbcAMP促进NG10 8 15细胞突起形成和生长的作用