人MEPE基因稳定表达细胞系的建立及MEPE蛋白在DNA损伤应答中的功能初探

目的构建人MEPE基因真核表达载体,稳定转染人胚肾293T细胞,并建立稳定表达细胞株;初步探讨人MEPE蛋白在DNA损伤应答中的作用。方法将人MEPEcDNA克隆至带有HA标签的真核表达载体pREP10上,构建重组质粒;分别将载体pREP10/MEPE-HA和pREP10/HA转染293T细胞;经潮霉素B加压筛选阳性克隆;用RT-PCR和免疫印迹方法分别在RNA水平和蛋白水平鉴定稳定表达MEPE-HA融合蛋白的阳性细胞株;利用一定浓度的DNA损伤诱导剂喜树碱（camptothecin,CPT）处理细胞,通过MTT比色法检测不同时间点细胞存活率的变化,其趋势即可反映出不同细胞株对DNA损伤诱导剂的敏感性。结果经酶切鉴定及序列分析,人MEPE基因真核表达载体pREP10/MEPE-HA构建正确,转染人293T细胞,筛选出MEPE表达较高的细胞株,并且发现该基因的高表达可以使细胞对DNA损伤诱导剂的耐受性提高。结论成功建立了稳定表达人MEPE的293T细胞株,并对人MEPE蛋白在细胞中对DNA损伤诱导剂敏感性的影响进行了初步探讨,为进一步研究MEPE的功能奠定了基础。     

基于相平面图分析的FCM视网膜神经节细胞响应的研究

目的研究视网膜神经节细胞的电特性,为视觉假体的研究提供帮助。方法利用Matlab对视网膜神经节细胞模型-Fohlmeister-Colman-Miller(FCM)模型,进行数值计算与计算机仿真,比较其在不同电流刺激下的响应,并用相平面分析方法来分析其动力学特征。结果 FCM模型产生的动作电位与实验结果相符合,FCM的5种离子通道在一个动作电位形成过程中,作用时间不同,对动作电位形成的影响不同;相平面分析表明,动作电位在各个阶段的变化速度不同,脉冲峰值的大小,不同强度的刺激电流产生的动作电位的脉冲峰值大小不同。结论通过相平面图及其它方法的直观分析,FCM视网膜神经节细胞对电刺激具有良好的电生理响应。     

心血管介入诊疗围术期对比剂肾病的防治

对比剂肾病是使用碘对比剂的主要并发症,这种医源性并发症的预后差且医疗费用高。由于需要对比剂的介入手术不断增加,发生对比剂肾病的病例也不断增加,近年来已成为心脏病学家关注的热点。研究表明,对心血管介入诊疗围手术期对比剂肾病的防治尚缺乏有效的方法 ,但在术前识别高危患者、改善及纠正相关危险因素,使用肾毒性较低的对比剂,充分水化均可减少对比剂肾病的发生。     

北京高校大学生对在校期间结婚的态度及其影响因素分析

目的 了解北京高校大学生对在校期间结婚的态度及影响因素,为高校的管理工作提供依据.方法 利用多阶段抽样,采用自拟问卷,于2009年10月对北京29所高校的1 523名在校大学生进行问卷调查.结果 73.9%的大学生知道在校期间允许结婚,19.8%的大学生赞同在校期间结婚,44.0%的大学生认为在校期间结婚弊大于利,88.1%的大学生认为"几乎没有"同学打算在大学期间结婚,67.8%的大学生认为理想的结婚年龄为26～29岁.多因素分析结果表明,年龄、性别、学校类别、父亲职业和经济来源是大学生结婚态度主要影响因素.结论 大多数学生了解相关政策和法规,但表示不会在大学期间结婚.高校有必要树立总体应对的态度,进行分类管理,为高校学生提供人性化服务.     

长期接触有机磷农药机体抗氧化能力调查

目的 调查农民长期接触有机磷(OP)农药后机体抗氧化能力的改变.方法 随机抽取新乡市4区8县农村地区有长期接触OP农药史的农民382人,分别检测体内丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化物酶(LPO)的水平和活力.结果 接触OP农药＞10年的农民机体抗氧化能力明显下降,但下降程度无年限差异.结论 农民长期接触OP农药会引起机体抗氧化能力下降.     

丝裂霉素C用于不同屈光度LASEK术中的对比研究

目的探讨丝裂霉素C（MMC）对不同屈光度准分子激光上皮瓣下角膜磨镶术（LASEK）后角膜上皮下雾状浑浊（haze）与屈光回退的影响。方法将接受LASEK手术者先根据屈光度分为低、中、高度组,再将各组分为LASEK组和LASEK联合MMC组。低、中、高度LASEK联合MMC组在激光切削完毕后用浸有0.02%MMC的绵片覆于角膜切削区,时间分别为20～25s、40～50s、60～80s。术后早期观察眼部刺激症状及角膜上皮愈合情况;1、3、6、12个月复查视力、角膜haze及角膜地形图。结果 （1）术后疼痛反应、角膜上皮愈合时间低、中、高度的LASEK组与LASEK联合MMC组无显著性差异（P〉0.05）;（2）术后1、3、6、12个月,haze发生率低度近视LASEK组与LASEK联合MMC无显著性差异,中、高度近视LASEK联合MMC组haze发生率低于LASEK组（P〈0.05）;（3）低、中、高度近视LASEK联合MMC组角膜曲率术后1a与1个月相比,差别无统计学意义（P〉0.05）,高度近视LASEK组角膜曲率术后1a与1个月相比差异有统计学意义（P〈0.05）;（4）术后1a低、中近视LASEK联合MMC组与LASEK组达最佳矫正视力者差异无统计学意义（P〉0.05）,但高度近视LASEK联合MMC组达最佳矫正视力的眼数多于LASEK组（P〈0.05）。结论 LASEK术中MMC敷贴合适时间可以降低术后haze及屈光回退的发生率,高度近视组尤为显著;术前屈光度越高,所需MMC敷贴时间越长。     

白内障小切口手法摘除术与超声乳化吸出术临床疗效比较观察

目的比较小切口白内障摘除术与超声乳化吸出术对术后视力、角膜散光、手术并发症的影响。方法随机选择102例（102只眼）白内障分别行小切口手法非超声乳化摘除与超声乳化吸出术,观察两组术后临床疗效。结果术后3个月手法组及超声乳化组的散光分别为（1.58±0.89）D及（1.57±0.88）D,术后最好矫正视力大于0.3者分别为95.02%及95.89%,角膜水肿于术后半个月后均消退。结论术后3个月两种手术方式疗效相近,无超声乳化仪的基层医院可推广白内障小切口手法摘除术。     

超分子组装用于寡聚核苷酸的输送及其在细胞中的光诱导释放（英文）

本文设计合成了两种光敏的双亲性分子,分别具有单齿和三齿的结构,这两种双亲性分子可自组装成球形和楔形超分子纳米粒。超分子外部带有氨基的PEG片段可以通过静电作用与核酸结合。本文对超分子输送寡聚核苷酸进入细胞的效果进行了评价。结果表明,具有三齿结构的分子与核酸形成的复合物通过内吞作用可以有效地将核酸输送进入细胞,而单齿结构的复合物却几乎不具有此能力。给予光照后,三齿的超分子发生醌甲基化重排而解离,从而释放核酸。     

结肠癌转移相关基因1与c-met在子宫内膜癌中的表达及其临床价值

目的:探讨MACC1与c-met蛋白在子宫内膜癌中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组织化学方法检测45例子宫内膜癌组织、38例增生子宫内膜组织、20例正常子宫内膜组织中MACC1与c-met蛋白的表达情况,分析两者在不同子宫内膜中的表达率及其与子宫内膜癌临床病理参数的关系,并分析两指标在子宫内膜癌组织中表达的相关性。结果:MACC1与c-met在子宫内膜癌组织中的阳性表达率显著高于增生子宫内膜组织、正常子宫内膜组织（P＜0.05）。MACC1与c-met在子宫内膜癌组织中的表达与肌层浸润深度、手术病理分期、组织分化级别显著相关,而与年龄、肿瘤大小等无关。MACC1与c-met蛋白的表达呈正相关（P＜0.05）。结论:MACC1与c-met在子宫内膜癌组织中表达增高,肌层浸润较深、手术病理分期越晚、组织分化程度较低者表达率更高,两者与肿瘤的发生、发展、转移关系密切。     

骨形态发生蛋白4/Smad信号通路在小鼠原始卵泡卵母细胞凋亡中的调控作用

目的 探讨骨形态发生蛋白（BMP）4/Smad 信号通路在小鼠原始卵泡卵母细胞凋亡中的调控作用。方法 取出生3d的雌性昆明小鼠卵巢,采用两步酶消化法,分离纯化卵母细胞,进行原代培养。将卵母细胞分为3组:正常对照组(Con组)、添加重组人BMP4组(BMP4组)、添加BMP4和BMP4抑制剂6-{4-［2-（1-呱啶基）乙氧基］苯基}-3-（4-吡啶基）吡唑并（1,5-A）嘧啶（dorsomorphin）组（BMP4+抑制剂组)。采用TUNEL法, 检测BMP4对卵母细胞凋亡的影响;采用免疫组织化学染色与实时定量PCR,检测BMP4对卵母细胞中p-Smad1/5/8、sohlh2、c-kit及foxo3a表达的影响。采用RNA干扰技术、转染sohlh2质粒和LY294002处理,探讨BMP4/Smad 信号通路在小鼠原始卵泡卵母细胞凋亡中的调控机制。结果 TUNEL 结果显示,BMP4组凋亡卵母细胞比例明显低于Con组(P<0.05)和BMP4+抑制剂组(P<0.05);加入BMP4可明显促进细胞Smad入核,上调 sohlh2和c-kit表达,抑制foxo3a入核; 转染sohlh2 siRNA 后,可明显阻断BMP4抑制卵母细胞凋亡的作用;转染sohlh2质粒后,p-foxo3a表达量显著增加,LY294002可明显抑制sohlh2促进foxo3a磷酸化的作用。 结论 激活BMP4/Smad信号通路可抑制小鼠原始卵泡卵母细胞的凋亡,其作用机制可能是通过上调sohlh2和c-kit基因表达,进而调控foxo3a入核而实现的。