血浆或血清样本中丙型肝炎病毒抗原的检测

为控制ＨＣＶ的血源传播,世界各国均已开展对献血员ＨＣＶ抗体的检测。但尽管如此输血后ＨＣＶ感染仍时有发生,为此研制并建立ＨＣＶ抗原检测方法非常必要,有关这方面的工作国内外报道的还很少。自１９９０年起我们开展了抗ＨＣＶ单克隆抗体的研制工作,至今已获得了抗...     

乙脑病毒鼠源单链抗体的构建及表达

目的 获得乙脑病毒（ＪＥＶ）鼠源单链抗体基因（ＳｃＦｖ）并使其在Ｅ．ｃｏｌｉ中表达。方法 利用噬菌体表面呈现技术,从抗乙脑病毒杂交瘤细胞２Ｈ４中构建噬菌体抗体库,采用双抗体夹心模式对抗体库进行富集及检测。并将所获得的阳性克隆重基因插入ＧＳＴ融合表达载体中,构建融合表达克隆重,使其在Ｅ．ｃｏｌｉ中获得稳定表达产物。结果 所构建的噬菌体抗体库经３轮的吸附、洗脱及再感染的富集过程后,共检测到７株稳定的具     

国内外生物制品标准化的作用及现状

随着国内外生物技术的蓬勃发展及高新技术领域的不断扩大,生物制品标准化工作的重要性及作用已得到各国药品管理当局的重视。我国生物制品标准化工作也在不断深入。本文根据近年来国内外生物制品标准化工作的进展,阐述了生物制品标准化对生物制品质量管理的重要作用。     

大黄灵脾颗粒对缺血再灌注急性肾损伤大鼠肾纤维化的干预作用

目的:探讨大黄灵脾颗粒对缺血再灌注急性肾损伤模型大鼠肾纤维化的影响。方法:30只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、大黄灵脾颗粒(中药)组,每组10只,通过夹闭肾蒂45 min后恢复肾脏血流再灌注建立模型,建模成功后次日各组大鼠开始灌胃治疗,正常组和模型组灌服生理盐水,中药组给予大黄灵脾颗粒灌胃。术后12周检测各组大鼠Scr、BUN、24 h尿蛋白等生化指标;HE染色观察肾组织病理;Masson染色观察肾纤维化情况;免疫组化法检测肾组织TGF-β1和α-SMA蛋白的表达水平。结果:各组大鼠Scr、BUN差异无统计学意义(P>0.05);与模型组比较,HE染色显示中药组肾组织损伤轻于模型组,且中药组24 h尿蛋白显著低于模型组(P<0.05);Masson染色显示中药组纤维化程度较模型组明显减轻,中药组肾组织TGF-β1和α-SMA蛋白的表达水平也显著低于模型组(P<0.05)。结论:大黄灵脾颗粒可改善AKI大鼠肾脏病理,降低尿蛋白水平,抑制TGF-β1和α-SMA的表达,并减轻AKI后肾纤维化的发生。     

STR图谱用于生物制品生产用人源细胞鉴别的研究

目的 研究短串联重复序列(STR)图谱鉴别方法在生物制品生产用人源细胞质量控制中的应用.方法 采用PCR-毛细管电泳分析方法,分别建立检测9个和16个人STR位点的方法鉴别人源细胞,并对来自不同生物制品生产单位、不同传代水平的病毒性疫苗生产用人二倍体细胞株及基因治疗制品生产用的293细胞进行STR图谱的检测和比较.结果 建立人源细胞株的STR图谱分析方法.13个单位提供的病毒疫苗生产用21株人二倍体细胞中,除1株细胞并非MRC-5细胞外,其他细胞均可认定为本细胞,且未发现交叉污染现象.而8个单位提供的12株基因治疗用293细胞的STR图谱则存在明显差异,提示该类细胞可能存在来源、基因修饰改造背景不清及传代过程中遗传特性不稳定的因素.结论 STR图谱分析灵敏度高、特异性强,可用于生产用人源细胞株/系间的鉴别.     

STR图谱分析方法扩大用于人源细胞的鉴别研究

目的 采用短串联重复序列(STR)图谱分析的方法,建立本所细胞库中所有人源细胞的鉴别图谱,并进行细胞交叉污染及细胞误判现状分析的研究.方法 采用16个位点的STR图谱分析方法,检测本所细胞库中所有收集保存的及其他单位来源的共计61株人源细胞,并将STR图谱检测结果与目前国际细胞库公布的数据进行比对,分析细胞的正确性及交叉污染情况.对未检出信号的细胞株,采用同工酶法对细胞的种属进行鉴别.结果 被检测的61株细胞中,41株细胞呈现特征性STR图谱,不存在与其他细胞的交叉污染现象,其中36株细胞与ATCC或JCRB保存的同一名称细胞在相应的9个STR位点的数据完全一致,5株细胞均仅在vWA位点与ATCC数据不完全相同,可判定为正确细胞;7株细胞尚无国际可比对数据,但STR图谱特异,可认定为新建细胞.11株细胞(占18.0%)被鉴定为错误的细胞,其中舌癌细胞Tca8113及肝癌细胞HHCC(现更名为FHCC98)的STR图谱数据分别与HeLa及HeLa S3细胞的数据完全一致;2株HuT-102的数据与ATCC的数据完全不同;4株细胞未检测到信号,同工酶结果显示均为鼠源细胞;同时还发现2株细胞为交叉污染细胞.结论 细胞误判及细胞交叉污染现象较为严重,正确鉴别细胞,特别是对国内自建细胞重新鉴定,对保证科学研究的可信性及可重复性极为重要.     

呼吸道合胞病毒（RSV）感染预防的研究进展

人类呼吸道合胞病毒是严重威胁婴幼儿健康的重要因素这一。该病毒主要引起下呼吸道的感染，导致婴幼儿中气管炎和支气管炎的流行。本文就其近年来国内外对该病毒感染预防研究进展作一综述。     

肝细胞肝癌中丙型肝炎病毒C区、E区、NS3区、NS4区抗原的表达

本文报道研究丙型肝炎病毒抗原在肝细胞肝癌组织内的定位分布情况。以丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的Ｃ、Ｅ、ＮＳ３、ＮＳ４区四种单克隆抗体用免疫组化方法检测了１３９例肝细胞肝癌（ＨＣＣ）的肝脏标本，结果总的阳性率为１５．１％。２１例阳性标本中，Ｃ区单抗检测阳性占８０．９％（１７／２１），Ｅ区占３３．３％（７／２１），ＮＳ３、ＮＳ４区均占５７．１％（１２／２１），表明应用多区段单抗有助于提高ＨＣＶ抗原的检出率。阳性物质主要存在于胞浆中，呈细、粗颗粒及块状，３例出现膜及膜下型，１例核内有阳性反应。ＨＣＶ感染与ＨＣＣ的发生发展有一定的关系。     

乙型脑炎病毒活疫苗生产株SA14-14-2的感染性克隆构建

目的　构建乙型脑炎病毒 (乙脑病毒 )活疫苗生产株SA1 4 14 2的感染性克隆。方法　在对SA1 4 14 2株全长基因组测序基础上 ,引入适当酶切位点和T7RNA聚合酶启动子 ,采用分部连接策略 ,获得全长基因组cDNA ,体外转录RNA后 ,转染细胞获得感染性克隆 ,病毒传代培养、抗体中和试验和乳鼠脑腔攻击试验鉴定病毒。结果　由疫苗株cDNA构建了病毒感染性克隆 ,经鉴定为乙脑病毒 ,且病毒毒力比野毒株弱。结论　获得了乙脑病毒活疫苗生产株SA1 4 14 2的感染性克隆 ,为进一步研究疫苗的减毒机理及开发新一代疫苗奠定了基础     

杂交瘤细胞系产生单克隆抗体稳定性研究

大文对10株乙肝表面抗原(HBsAg)的McAbs细胞系在BALB/c小鼠体内连续传代和体外连续传代产生HBsAg单克隆抗体(McA-HBs)的稳定性进行了研究。表明10株杂交瘤细胞在体外连续传代12周各株细胞分泌McAb的稳定性是有明显差别的,而在BALB/c小鼠体内连续传3代其产生McA-HBs的能力均较稳定。 Sr-6和Sr-19在37℃和33℃两种不同培养温度下,以及在液氮中长期冻存复苏后对杂交瘤细胞产生McA-HBs的能力也无明显影响。