肝细胞癌切除术标准及其临床意义*

目的:阐述肝细胞癌（肝癌）切除术标准,为把握手术指征、指导治疗、提高疗效提供依据。方法:使用CNKI、NCBI生物信息学数据库,以“肝切除/liver resection 、肝癌/hepatocellular carcinoma（HCC ）”为关键词,检索已发表的文章,排除重复研究和与本研究无关文献后精选纳入分析。总结肝切除标准分类,陈述其关键因素和争议焦点,比较不同标准肝切除患者预后,讨论预后差异的可能原因。结果:HCC 切除术标准的主流分法为二分法,即根治性和姑息性切除,其关键因素包括外科、肿瘤及随访因素,肝切缘大小是否影响根治效果曾是外科因素中争论热点。近年,随着肿瘤分子生物学技术的进步,学者们对HCC 切除术标准的分法有所改变,在三分法（病理根治、临床根治和姑息切除）基础上提出HCC 切除术五分法,将病理根治划分为绝对根治（无潜在转移）和相对根治（有潜在转移）,临床根治划分为有反应切除（短期内相关指标下降,如甲胎蛋白）、无反应切除（指标持续异常）和姑息性切除。根治性切除患者预后好于姑息性切除。研究显示,肝切除促进肿瘤侵袭转移潜能可能与HCC 早期播散有关,也可能与术后残余HCC 生物学特性改变相关,目前缺乏有效的干预措施。结论:根治性肝切除是目前公认的治疗HCC 患者最有效的方法之一;确定HCC 切除术标准有利于总结、分析临床资料,也有利于评估患者预后,对选择有效的治疗策略具有重要的临床意义。      

Hedgehog-Gli信号通路失调控对肝细胞癌生长和转移潜能的影响及其靶向治疗

目的:了解Hedgehog(Hh)-Gli信号通路失调控在肝细胞癌(HCC)发生、发展中的作用及其分子靶向治疗的研究现状。方法:以Hedge-hog、肝癌/hepatocellular carcinoma(HCC)为关键词,使用CNKI(1994-2009)、NCBI(1974-2009)生物信息学数据库对已发表的文章进行检索,共检索到英文27篇,中文7篇,排除重复研究和与本研究无关的文献,最终纳入分析27篇文章。结果:研究发现,Hh信号通路不仅调控胚胎时期各胚层组织发育,而且与肿瘤发生、发展密切相关。Gli作为脊椎动物Hh信号通路锌指核转录因子,与Hh通路下游基因的特定序列结合,直接调控Hh信号通路目的基因的转录表达,在Hh信号通路调控中起到枢纽作用。Hh-Gli信号转导通路的异常激活参与HCC的发生及恶性生物学特性的维持。环杷明和(或)Gli-si RNA可以阻断Hh信号通路抑制HCC生长、侵袭和运动潜能。结论:Hh通路的激活是HCC侵袭、发展的重要因素,阻断Hh通路可能是一种新的潜在的HCC靶向治疗策略,具有临床应用价值。     

转移消失蛋白B基因表达对MHCC97H细胞侵袭和转移潜能的影响

目的 观察慢病毒载体携带靶向人源性MTSS1(转移消失蛋白B基因,MIM-B基因)小干扰RNA对人肝癌细胞株MHCC97H细胞侵袭和转移潜能的影响.方法 构建靶向MTSS1基因的慢病毒载体-siMTSS1,转染MHCC97H细胞.实时荧光定量PCR和Western blot用于测定MIM-B mRNA和蛋白表达;侵袭实验用于评估侵袭潜能;明胶酶谱用于检测基质金属蛋白酶2(MMP2)活性.以MHCC97H构建裸鼠原位移植瘤模型,第14天将24只成模裸鼠随机分成空白对照组、空载体组及治疗组(每组8只),在超声引导下瘤周及瘤内多点注射硼酸盐缓冲液、Lenti-GFP及Lenti-siMTSS1,第35天检测肺转移情况.采用SPSS13.0统计软件对计量资料进行方差分析.结果 成功构建慢病毒载体携带的针对MTSS1基因小干扰RNA,Lenti-siMTSS1感染效率为97.0%,显著抑制MIM-B蛋白表达,下调MMP2活性.体外实验结果显示空白对照组、空载体组和干扰组细胞穿膜数分别为37.9±4.4、37.4±5.3和26.6±4.6(F=26.695,P＜0.01).体内实验结果显示空白对照组、空载体组及治疗组肺转移结节数分别为6.5±2.6、6.4±2.7和3.8±1.3(F=3.637,P＜0.05);肿瘤组织MIM-B mRNA相对表达量分别为0.39±0.19、0.38±0.10和0.16±0.11(F=11.644,P＜0.01).结论 慢病毒介导小干扰RNA抑制MIM-B mRNA和蛋白表达进而抑制HCC侵袭、转移潜能可能与下调MMP2活性相关,为肝癌患者提供一条新的分子靶向治疗思路.     

慢病毒介导MIM-B基因小干扰RNA增强索拉非尼对差异表达pERK人肝癌细胞的体外增殖抑制作用

目的 观察转移消失蛋白B(MIM-B)小干扰RNA(LV-siMTSS1)联用索拉非尼对差异表达磷酸化胞外信号调节激酶(pERK)肝癌(HCC)增殖的影响.方法 构建LV-siMTSS1,检测MIM-B、pERK蛋白表达.用LV-siMTSS1(1.0×107～36.0×107U/nl)、索拉非尼(0.01～30.0μmoL/L)干预细胞,计算IC50.结果 高转移潜能HCC高表达MIM-B.高转移潜能MHCC97L、MHCC97H、HCCLM3、HCCLM6相对表达pERK(0.371、0.636、0.949、1.112)与低转移潜能Hep3B、HLE、SMMC7721(0.115、0.130、0.188)比较差异有统计学意义(P＜0.05).前者对索拉非尼敏感性(IC50为13.5、12.4、10.2、8.8 μmoL/L)强于后者(IC50为26.4、20.5、18.9 μmol/L,P＜0.05);LV-siMTSS1增敏索拉非尼药效在低表达pERK的Hep3B中最显著.结论 LV-siMTSS1显著增强低表达pERK的HCC对索拉非尼药物敏感性.

Abstract：

Objective To observe in vitro effect of sorafenib combined with lentivirus-mediated small RNA interference targeting the gene of missing in metastasis B ( MIM-B,LV-siMTSS1 ) on proliferation of human hepatocellular carcinoma (HCC) cells with differential phospgorylated extracellular signalregulated kinase (pERK) expression.Methods The expression of MIM-B and pERK was detected in HCC cell lines with differential metastatic potentials.The siRNA targeting MIM-B gene was cloned to one lentivirus work vector.Work vector and three package plasmids were co-transfected into 293T cells with the help of lipefeetamine 2000 ( named LV-siMTSS1 ).The cultured cell lines were intervened by LV-siMTSS1 ( 1.0 × 107-36.0 × 107) U/ml and (or) sorafenib (0.01-30.0) μmol/L in vitro.Cellular activity was determined by Cell Counting Kit-8 to calculate IC50.Results The basal pERK and MIM-B levels were increased stepwise in cell lines in accordance with their metastatic potential.There was statistically significant difference in the pERK expression was made between the cell lines of MHCC97L,MHCC97H,HCCLM3 and HCCLM6 (0.371,0.636,0.949 and 1.112) with higher metastatic potential and those of Hep3B,HLE and SMMC7721 (0.115,0.130 and 0.188) with lower one (P＜0.05).Cells with higher pERK expression were more sensitivity ( IC50,13.5,12.4,10.2 and 8.8 μmol/L) than those with lower pERK expression ( IC50,26.4,20.5 and 18.9 μmol/L) to Sorafenib ( P＜0.05 ).Cells transfected with LV-siMTSS1 were sensitivity to Sorafenib,which was most significant in Hep3B cell line with lower pERK expression.Conclusion Transfection with LV-siMTSS1 reinforced the inhibitory effect of Sorafenib on HCC cell proliferation,especially for cells with lower pERK expression.     

中药复方“松友饮”联用干扰素α影响姑息性肝切除术后残癌生长转移的实验观察

目的研究中药＂松友饮＂联用干扰素（IFN）α对高转移人肝细胞癌（HCC）裸鼠原位移植瘤姑息性肝切除模型残癌生长、转移和生存期的影响。方法以高转移人肝癌MHCC97H细胞建立裸鼠原位移植瘤姑息性肝切除模型,72只成模裸鼠随机分成对照组、＂松友饮＂组、IFNα组及＂松友饮＂＋IFNα组（每组18只）,姑息性肝切除术后24 h开始每天1次灌胃给药及皮下注射,连续5周测量裸鼠体质量。最后一次处理结束48 h后每组随机处死6只裸鼠,计算肿瘤体积及转移情况;剩余裸鼠用于观察生存期。结果对照组、＂松友饮＂组、IFNα组及＂松友饮＂＋IFNα组肿瘤体积分别为（1205.2±581.3）、（724.9±337.6）、（507.6±367.0）、（245.3±181.2）mm3（F=6.410,P〈0.05）;肺转移结节数（n）分别为13.8±3.5、12.1±3.8、7.4±2.8、4.5±1.9（F=22.930,P〈0.05）;生存期分别为（62.1±2.0）、（76.2±3.2）、（81.1±2.5）、（88.3±2.5）d（Chi-Square=45.704,P〈0.05）。联合用药组同单药组比较,疗效差异有统计学意义。结论连续5周联用＂松友饮＂增强IFNα抑制姑息性肝切除术后残癌生长、转移并延长荷瘤裸鼠生存期,对HCC患者有潜在临床应用价值。     

姑息性肝切除促进肝细胞癌侵袭潜能的实验研究

目的研究姑息性肝切除对肝脏残余癌(简称残癌)侵袭潜能的影响。方法以高转移人肝癌细胞系MH-CC97H建立裸鼠原位移植瘤模型,12只成模裸鼠于接种肿瘤后14d随机分成两组,包括姑息性肝切除组(保留2mm大小残癌)和假手术组。姑息术后14d处死裸鼠,采用侵袭实验检测残癌原代培养细胞穿膜能力变化,免疫酶联吸附实验(ELISA)、明胶酶谱实验和原位肿瘤组织MMP2活性实验分别用于检测MMP2分泌水平及其活性。SAS8.2软件用于统计分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果所有裸鼠模型均成功构建。原代培养细胞用于侵袭实验的结果显示姑息性肝切除术后,残癌侵袭潜能增强。姑息组穿膜细胞数[(38.9±3.9)个]多于对照组[(34.6±2.8)个](P=0.015)。术后14d,ELISA实验检测到姑息组原代培养上清液MMP2分泌水平[(59.7±8.0)ng/ml]较对照组[(39.4±6.1)ng/ml]升高(P=0.025);原代培养上清液明胶酶谱实验和原位肿瘤组织MMP2活性实验[姑息组OD450(3.3±0.3)高于对照组(2.1±0.3)(P=0.005)]显示残癌MMP2活性增强。结论姑息性肝切除促进肝癌细胞侵袭能力增强可能与上调MMP2分泌并激活MMP2相关。     

突触可塑性在血管性认知障碍中的作用

突触损伤在血管性认知障碍(vascular cognitive impairment, VCT)发病的早期即存在,与认知功能障碍关系密切,其具体机制尚不明确.研究突触形态结构的可塑性、突触传递效能的可塑性以及突触蛋白在VCI发病中的作用和机制,有助于进一步阐明VCI的发病机制,从而更有效地防治VCI.     

突触可塑性在血管性认知障碍中的作用

突触损伤在血管性认知障碍(vascular cognitive impairment, VCT)发病的早期即存在,与认知功能障碍关系密切,其具体机制尚不明确.研究突触形态结构的可塑性、突触传递效能的可塑性以及突触蛋白在VCI发病中的作用和机制,有助于进一步阐明VCI的发病机制,从而更有效地防治VCI.     

T_(2)WI高信号子宫肌瘤信号强度比值和纹理分析预测聚焦超声消融疗效北大核心CSCD

目的探讨T_(2)WI信号强度比值(SIR)联合扩散加权成像表观扩散系数(ADC)直方图纹理参数在预测T_(2)WI高信号子宫肌瘤聚焦超声消融疗效中的应用价值。方法选择2012年3月至2016年10月接受高强度聚焦超声(HIFU)消融治疗的患者,55例共有T_(2)WI高信号子宫肌瘤59个,根据体积消融率(消融率≥70%、消融率≤50%)分组,27例患者28个肌瘤入组高消融组,24例患者27个肌瘤入组低消融组。采用独立样本t检验比较两组T_(2)WI-SIR和ADC直方图纹理参数,使用受试者工作特征曲线下面积(AUC)评价各参数在预测T_(2)WI高信号子宫肌瘤聚焦超声消融疗效中的诊断效能。结果高消融组的T_(2)WI-SIR低于低消融组(P<0.05),AUC为0.886,最佳临界值为2.16,敏感度为88.9%,特异度为75%;ADC直方图纹理参数中ADC_(均值)、ADC_(方差)、ADC_(90%)、ADC_(99%)的AUC分别为0.632、0.640、0.651、0.647,最佳临界值分别为696.529、545569.085、1621.5、2839.5,敏感度分别为29.6%、92.6%、88.9%、92.6%,特异度分别为96.4%、50%、46.4%、31.3%。T_(2)WI-SIR联合ADC90%和ADC_(均值)的AUC值分别为0.914和0.906,敏感度均为92.6%,特异度均为78.6%。结论T_(2)WI-SIR和ADC直方图纹理参数可成为T_(2)WI高信号肌瘤术前预判疗效因子,T_(2)WI-SIR联合ADC直方图纹理参数可加强预测效能,为后期临床选择可治性T_(2)WI高信号肌瘤及术前评估疗效提供影像学依据。     

中药抗肿瘤作用及其作用机制研究进展

中药因具有活血化瘀、清热解毒、扶正固本等功效而发挥抗肿瘤作用,可作用于肿瘤发生、发展的多个环节,具有多靶点、多环节、多效应的特点。主要从中药诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞增殖、逆转肿瘤细胞多药耐药、抑制肿瘤细胞侵袭转移等方面对中药抗肿瘤作用及其机制研究现状进行综述。