穴位保健灸在无症状HIV感染期运用的思路与方法

<正>艾滋病传染性强,死亡率高,目前尚无根治方法,严重危害社会及经济的发展。其自然病程大部分处于无症状期,如何延长无症状期,延缓病情发展,是医学界的一个重大课题。艾灸疗法安全有效、操作简便、成本低廉,有其独特优势,在中医"治未病"思想指导下,对HIV感染者进行艾灸早期干预,可以稳定或提高机体免疫力,改善临床症状与体征,减少机会性感染及肿瘤的发生,从而达到降低患者发病率及死亡率,提高生存质量的     

HIV-1病毒载量RT-PCR检测方法建立

目前,人类免疫缺陷病毒(HIV-1)载量常用的检测技术及试剂盒主要为欧美发达国家所掌握,由于成本原因这些试剂盒难以在发展中国家广泛使用[1].随着中国艾滋病感染者的增多,建立经济的、适合国情HIV-1主要毒株的病毒载量检测方法非常必要.     

HIV-1亚型多样性及其对艾滋病防治影响的研究进展

人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)具有高度变异的特性。HIV-1有9种亚型和78种流行重组型,HIV-1亚型在全球呈不均匀分布。HIV-1亚型多样性可对病毒的传播途径和传播能力、毒力和疾病进展、药物敏感性和耐药性、疫苗研发产生影响,使艾滋病的防治形势面临着严峻的挑战。该文对其研究近况作一综述。     

钦州市钦南区HIV-1流行亚型及基因变异特征研究

目的 调查流行于钦南区的HIV-1亚型种类并分析其基因变异特征.方法 抽取100例未抗病毒治疗的HIV-1感染者,从血样中提取病毒RNA或前病毒DNA,采用聚合酶链反应(PCR)扩增HIV-1 gag基因和pol基因片段并测序,用系统进化树分析其亚型,并计算gag和pol区的基因离散率.结果 97份血样获得gag基因序列或pol基因序列,4份血样的gag与pol分型不一致,其他93份分型明确,其中CRF01_AE重组型、CRF07_BC重组型、CRF08 BC重组型及G亚型分别占76.34％(71/93)、9.68％(9/93)、12.90％(12/93)和1.07％(1/93).CRF08_BC的gag基因离散率为0.059±0.005,高于CRF07_BC的0.053±0.005(P＜0.01)和CRF01_AE的0.049±0.004(P＜0.01).CRF01_AE的pol基因离散率为0.044±0.003,高于CRF07_BC的0.035±0.004(P＜0.01)和CRF08 BC的0.033±0.003(P＜0.01).结论 钦南区HIV-1存在至少3种流行亚型,其中CRF01_AE是最主要的亚型,不同基因区的变异程度有所不同.     

吗啡对HIV-1在MT2细胞和巨噬细胞中复制的影响

目的 附测定双抗体夹心法检测p24抗原表达.用Student-t检验或方差分析(ANOVA)比较不同细胞处理组间p24抗原表达差异;采用重复测量数据的方差分析比较不同时间吗啡处理组比对照组的p24抗原表达增加或减少倍数的变化趋势.结果 HIV-1感染MT2细胞后第3、4、5和6天,3个浓度的吗啡处理的(1)组的p24抗原表达[第3天:(4.44±0.30)、(5.59±0.25)和(4.60±0.24) ng/ml;第4天:(24.30±2.66)、(31.73±1.17)和(26.02±0.37) ng/ml;第5天:(56.30±1.26)、(81.77±2.49)和(63.66±2.57) ng/ml;第6天:(150.70±8.97)、(243.09±8.93)和(173.72±7.73) ng/ml]均高于(4)组[第3~6天分别为(1.93±0.05)、(8.03±0.09)、(15.30±0.91)、(41.01±0.84) ng/ml],差异有统计学意义(第3天:t值分别为14.15、24.74和19.14,P均<0.01;第4天:t值分别为10.59、34.92和81.2,P均<0.01;第5天:t值分别为45.83、43.51和30.07,P均<0.01;第6天:t值分别为20.09、39.02和29.55,P均<0.01).3个浓度的吗啡处理的(1)组的p24抗原表达比(4)组增加的倍数,随HIV-1感染MT2细胞的时间的延长具有上升的趋势,时间效应具有统计学意义(F=842.18,P<0.01).HIV-1感染巨噬细胞组后第4、6、8和10天,3个浓度的吗啡处理的(5)组的p24抗原表达[第4天:(0.68±0.15)、(0.87±0.41)和(0.75±0.09) ng/ml;第6天:(1.64±0.57)、(2.07±0.12)和(1.75±0.17) ng/ml;第8天:(6.31±0.17)、(8.81±0.34)和(7.19±0.11) ng/ml;第10天:(32.30±17.55)、(50.74±17.55)和(39.74±0.56) ng/ml]均高于(8)组[第4、6、8、10天分别为(0.60±0.01)、(1.16±0.07)、(3.84±0.45)、(17.55±0.86) ng/ml],差异有统计学意义(第4天:t值分别为7.27、11.06和3.02,P均<0.05;第6天:t值分别为8.93、11.3和5.45,P均<0.01;第8天:t值分别为8.83、15.11和12.42,P均<0.01;第10天:t值分别为13.65、17.84和36.69,P均<0.01).3个浓度的吗啡处理的(5)组的p24抗原表达比(8)组增加的倍数,随HIV-1感染时间的延长具有上升的趋势,时间效应具有统计学意义(F=135.58,P<0.01).结论 吗啡能够促进HIV-1在MT2细胞和巨噬细胞内的复制,并且随着感染时间的延长而增加;吗啡促进HIV-1复制的作用可被纳洛酮阻断.

Abstract：

Objective To determine whether Morphine has the ability to enhance HIV-1 replication in MT2 and Macrophage in vitro and assess the influence of Naloxone on Morphine2s effect.Methods MT2 cells were randomly assigned into 4 groups: (1) Morphine treatment for MT2 group, (2) Morphine+Naloxone co-treatment for MT2 group, (3) Naloxone treatment for MT2 group and (4) MT2 Control;Macrophages were also randomly assigned into 4 groups: (5) Morphine treatment for Macrophage group, (6) Morphine+Naloxone co-treatment for Macrophage group, (7) Naloxone treatment for Macrophage group and (8) Macrophage Control. Group (2), (3), (6) and (7) were pre-treated with 10-8 mol/L Naloxone for 0.5 h, and then group (1) and (2) were treated with 10-12, 10-10 and 10-8 mol/L Morphine for 24 h;group (5) and (6) were disposed of 10-10 mol/L Morphine for 24 h.All 8 groups were added in HIV-1 viral strain with 50% tissue culture infective dose(TCID50).P24 antigen in MT2 cells culture supernatant at day 3, 4, 5 and 6, and in Macrophages culture supernatant at day 4, 6, 8, 10 and 12 after infection were determined with ELISA.Student2s t-test and ANOVA were used to compare the differential expression in different groups, and repeated measures ANOVA was used to compare the increasing or decreasing expression of p24 antigen in morphine treatment groups than that in the control group at different time points.Results On the 3rd day of infection with HIV-1 in MT2 cells, the expression of p24 antigen in 10-12, 10-10 and 10-8mol/L dose of group (1) were (4.44?.30), (5.59?.25) and (4.60?.24) ng/ml respectively, compared to control[(1.93?.05) ng/ml, t= 14.15, 24.74 and 19.14, all P<0.01].On the 4th day, 10-12, 10-10 and 10-8mol/L dose of group (1) resulted in a significant increase of p24 antigen expression [(24.30?.66), (31.73?.17) and (26.02?.37) ng/ml]in culture supernatants compared to control[(8.03?.09) ng/ml, t=10.59, 34.92 and 81.2, all P<0.01].On the 5th day, the expression of p24 antigen in 10-12, 10-10 and 10-8 mol/L dose of group (1) were (56.30?.26), (81.77?.49) and (63.66?.57) ng/ml respectively, compared to control [(15.30?.91) ng/ml, t= 45.83, 43.51 and 30.07, all P<0.01].On the 6th day, the expression of p24 antigen in 10-12, 10-10 and 10-8 mol/L dose of group (1) were (150.70?.97), (243.09?.93) and (173.72?.73) ng/ml respectively, compared to control [(41.01?.84) ng/ml, t= 21.09, 39.02 and 29.55, all P<0.01].The enhanced multiple of p24 antigen expression in three doses of morphine treatment group compared to control increased with HIV-1 infected MT2 cells time, trend analysis of repeated measurements showed statistically significant time effect (F=842.18, P<0.01). On the 4th day of infection with HIV-1 in Macrophage cells, the expression of p24 antigen in 10-12, 10-10 and 10-8 mol/L dose of group (5) were (0.68?.15), (0.87?.41) and (0.75?.09) ng/ml respectively, compared to control [(0.60?.01) ng/ml, t= 7.27, 11.06 and 3.02, all P<0.05]. On the 6th day, 10-12, 10-10 and 10-8 mol/L dose of group (5) resulted in a significant increase of p24 antigen expression[(1.64?.57) , (2.07?.12 ) and (1.75?.17) ng/ml]in culture supernatants compared to control [(1.16?.07) ng/ml, t=8.93, 11.3 and 5.45, all P<0.01].On the 8th day, the expression of p24 antigen in 10-12, 10-10 and 10-8 mol/L dose of group (5) were (6.31?.17), (8.81?.34) and (7.19?.11) ng/ml respectively, compared to control [(3.84?.45) ng/ml, t=8.83, 15.11 and 12.42, all P<0.01]. On the 10th day, the expression of p24 antigen in 10-12, 10-10 and 10-8 mol/L dose of Morphine treated group were (32.30?7.55), (50.74?7.55) and (39.74?.56) ng/ml respectively, compared to control [(17.55?.86) ng/ml, t= 13.65, 17.84 and 36.69, all P<0.01].The enhanced multiple of p24 antigen expression in three doses of group (5) compared to control increased with HIV-1 infected Macrophage cells time, trend analysis of repeated measurements showed statistically significant time effect (F=135.58, P<0.01).Conclusions Morphine has the ability to enhance HIV-1 replication in MT2 cell and Macrophage. This Morphine-mediated increase of p24 antigen expression can be blocked by Naloxone.     

艾滋病中西医结合防治的必要性与思路方法探讨

高效抗反转录病毒治疗（HAART疗法）是公认的控制艾滋病病毒（HIV）的最好疗法之一,有明确的治疗靶点和机理,能有效抑制HIV的复制,从而使患者的免疫功能得以重建,可以明显降低患者的病死率及发病率,延缓了疾病进展,提高了患者的生存质量,取得了很大的成效。但是它有它的局限性。中医药在防治艾滋病方面有自己的优势：毒副作用小、可明显控制症状,提高患者的生存质量,提高或稳定患者的免疫功能。中医药如何在艾滋病的防治中发挥更大的作用,是大家一直探讨的问题。文章探讨了艾滋病中西医结合防治的必要性及思路与方法。     

无症状HIV感染者中医病因病机分析

艾滋病是机体感染人免疫缺陷病毒(HIV)而致的一种获得性免疫功能缺陷综合征(AIDS),具有很强的传染性和极高的死亡率.艾滋病的无症状期的病因病机主要是毒邪外侵导致元气耗伤,气血津液失常而致.深入探讨艾滋病无症状期的病因病机对艾滋病的防治具有一定的指导作用.     

应用多重巢式PCR法快速鉴定广西HIV-1主要亚型

目的 建立快速鉴定广西HIV-1主要流行亚型CRF01_AE、CRF07_BC、CRF08_BC、B和C的多重巢式PCR方法.方法 针对HIV-1 gag基因设计CRF01_AE、CRF07_BC、CRF08_BC、B和C亚型特异性引物,建立多重巢式PCR法,用该法鉴定来自广西的HIV-1毒株的亚型,并与基因测序法的鉴定结果比较.结果 多重巢式PCR法能正确鉴别5种已知亚型的样本,10份HIV阴性样本均无扩增,在72份未知亚型样本中,正确鉴定出66份,分别属于CRF01_AE、CRF07_BC、CRF08_BC、B亚型,多重巢式PCR法的灵敏度为91.7%,特异度达100%.结论 多重巢式PCR法能准确鉴定广西CRF01_AE、CRF07_BC、CRF08_BC和B亚型毒株,是一种简便、快速、低成本的亚型鉴定方法.     

吗啡对HIV-1在MT2细胞内复制影响

目的 探讨吗啡对人类免疫缺陷病毒-1(HIV-1)在MT2细胞中复制的影响.方法 将MT2细胞按单纯随机分组的原则分为吗啡处理组、吗啡+纳洛酮处理组、纳洛酮处理组和病毒对照组,先用浓度为10-8 mol/L的纳洛酮预处理吗啡+纳洛酮处理组和纳洛酮处理组0.5h,再用10-12、10- 10和10-8 mol/L 3个浓度的吗啡处理吗啡+纳洛酮处理组和吗啡处理组24h,然后每组细胞加入HIV -1感染MT2细胞,并分别于感染的第3、4、5和6d取培养上清测定HIV -1 p24抗原表达.结果 HW-1感染MT2细胞第3、4、5、6d,10-12、10-10和10-8 mol/L 3个浓度吗啡处理组的HIV-1 p24抗原表达均高于病毒对照组,差异均有统计学意义(P＜0.01);吗啡+纳洛酮处理组、纳洛酮处理组与病毒对照组HIV-1 p24抗原表达比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);第3、4、5、6d,3个浓度吗啡处理组的HIV-1 p24抗原表达量比对照组增加的倍数比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);10-12、10-10和10-8 mol/L 3个浓度吗啡处理组在不同时间HIV-1 p24抗原表达量比对照组增加倍数比较,3个吗啡处理组的HIV-1 p24抗原表达量比对照组增加倍数均随着感染时间的延长而呈现递增的趋势(P＜0.05).结论 吗啡能够促进HIV-1在MT2细胞和内的复制,并且随感染时间的延长呈现递增趋势;吗啡促进HIV-1复制的作用可被阿片受体阻滞剂纳洛酮阻断.     

广西壮族人群CCR5等位基因多态性的研究

目的:了解广西壮族人群中HIV-1辅助受体趋化因子受体5(CCR5)及其突变体CCR5Δ32等位基因的频率.方法:以60名土生土长的广西壮族人群为研究对象,根据CCR5Δ32碱基缺失位置采用3对特异性引物,用PCR扩增全血DNA样本,根据扩增结果判断CCR5野生型和CCR5Δ32突变体.从中随机抽取3份PCR扩增产物进行测序,通过测序结果与野生型的U95626序列比较来验证PCR扩增结果.结果:60份样本均为CCR5野生型,未发现CCRΔ32突变体.结论:广西壮族人群对HIV-1病毒感染可能具有较高的遗传易感性.