兔肾微血管内皮细胞体外培养及其细胞表型的初步研究

目的 探索肾微血管内皮细胞的体外培养方法，并对其进行鉴定和表型研究，拟为骨组织工程再血管化提供理想的种子细胞。方法采用三步梯度筛网法，先获得较高纯度的。肾血管球，再应用肾血管球外植法体外培养肾微血管内皮细胞。进一步对。肾微血管内皮细胞进行免疫组化法的Ⅷ因子相关抗原鉴定，用透射电镜观察细胞浆Weibel-Palade小体，以及采用间接免疫荧光法检测CD31、CD34及CD44表达。结果体外培养出纯度很高的血管内皮细胞并培养了11代。此外，免疫组化显示Ⅷ因子相关抗原阳性，电镜下观察到Weibel-Palade小体，以及间接免疫荧光检出CD31、CD34表达阳性，而CD44阴性。结论本实验方法可成功培养出肾微血管内皮细胞，且后者表达CD31、CD34细胞表型。     

三种不同载体材料体外生物相容性的比较

目的探讨纳米晶羟基磷灰石胶原复合材料(NHAC)、非纳米晶羟基磷灰石胶原复合材料(HAC)和珊瑚羟基磷灰石(CHA)的体外生物相容性,为组织工程提供理想的细胞基质载体材料。方法将人骨髓基质干细胞分别与上述三种载体材料体外复合培养,应用倒置显微镜、扫描电镜、四唑盐比色试验(MTT法)及碱性磷酸酶(ALP)活性测定,对材料上复合培养的细胞进行形态学和功能测定。结果骨髓基质干细胞能在NHAC和CHA两种材料上良好地黏附、增殖和生长。细胞的活性和碱性磷酸酶活性未受到材料的影响;而HAC不利于人骨髓基质干细胞的黏附、增殖,并使碱性磷酸酶活性降低。结论NHAC和CHA两种材料具有良好的生物相容性,可作为骨组织工程理想的骨替代材料;HAC不适合做细胞外基质。     

经皮克氏针固定治疗儿童Ⅱ型肱骨髁上骨折

肱骨髁上骨折是最常见的儿童肘部骨折,目前对GartlandⅠ、Ⅲ型骨折治疗意见比较统一,但对Ⅱ型骨折治疗方法的选择还存在争议,有学者偏向闭合复位石膏固定[1],也有一些学者提倡闭合复位经皮穿针固定[2],我们采用后者治疗,临床效果满意,现报道如下.     

骨组织工程再血管化种子细胞来源：兔肾微血管内皮细胞体外培养及其细胞表型的研究

背景：在骨组织工程研究中，面临从体外实验过渡到体内成骨时如何快速血管化的问题，尽早建立血运才能保留组织工程骨的成骨优势。在体外短时间内能大量扩增且纯度较高的细胞，才能成为组织工程化骨再血管化理想的种子细胞。目的：探索肾微血管内皮细胞的体外培养方法，并对其进行鉴定和表型研究，拟为骨组织工程再血管化提供理想的种子细胞。设计：单一样本研究。单位：苏州大学附属儿童医院骨科。苏州大学生命科学院生物技术研究所。材料：实验于2003-05／2004-04在苏州大学附属儿童医院骨科实验室完成。实验材料为C02培养箱，M199，胎牛血清，Ⅳ型胶原酶，40g／L多聚甲醛，20g／L戊二醛，EGGF，鼠抗人第八因子单克隆抗体(抗FⅧ-RAg)，多标记免疫分析系统(1420，WALLAC BLCTOR^2)，离心机，倒置显微镜，免疫荧光显微镜等。方法：采用三步梯度筛网法，先获得较高纯度的肾血管球，再应用肾血管球外植法体外培养肾微血管内皮细胞。进一步对肾微血管内皮细胞进行免疫组化法的Ⅷ因子相关抗原鉴定，用透射电镜观察细胞浆Weibel-Palade小体，以及采用间接免疫荧光法检测CD31，CD34及CD44表达。主要观察指标：肾微血管内皮细胞形态、活性及表型。结果：体外培养出纯度很高的血管内皮细胞并培养了11代。此外，免疫组化显示Ⅷ因子相关抗原阳性，电镜下观察到Weibel-Palade小体，以及间接免疫荧光检出CD31，CD34表达阳性，而12D44阴性。结论：本实验方法可成功培养出肾微血管内皮细胞，且后者表达CD31，CD34细胞表型。     

人骨髓间充质干细胞向成骨细胞和成软骨细胞分化的能力

背景：利用骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)的多向分化性，选择合适的生物材料和适当的生长因子联合应用，可达到修复组织缺损的目的，MSCs细胞具有取材方便，对身体健康损害小，来源于自体干细胞诱导构建的组织不存在MHC限制等优点，所以日益受到人们的重视。目的：探讨人骨髓间充质干细胞向成骨和成软骨细胞诱导分化的能力。设计：单一样本研究。单位：苏州大学附属儿童医院骨科，苏州大学生命科学院生物技术研究所。材料：RPMI1640完全培养基，地塞米松，β-甘油磷酸钠，抗坏血酸，鼠抗人一抗，羊抗鼠二抗，链球菌亲和素(三抗)，DAB(1：50)，100mL／L胎牛血清，维生素C，转化生长因子-β1(TGF-B1)等。方法：选用不同代次的MSCs细胞，分别使用成骨和成软骨条件培养基培养，观察细胞的形态学变化，同时采用细胞化学和免疫组化的方法检测碱性磷酸酶，钙盐沉积，糖胺多糖分泌和I，Ⅱ胶原的表达。主要观察指标：骨髓基质干细胞向成骨细胞分化；骨髓基质干细胞向成软骨细胞分化。结果：MSCs细胞在地塞米松、维生素C和β-甘油磷酸钠的作用下，15d后可见细胞变为多边形，ALP和Ⅰ型胶原染色阳性，形成钙结节，表现成骨细胞分化特点；而在维生素C和TGF-β1的作用下，7d可见细胞多为圆形，糖胺多糖和Ⅱ型胶原染色阳性，表现成软骨细胞分化特点。但细胞分化特征的表达随细胞增殖有减弱趋势。结论：在一定培养条件下成功诱导人MSCs细胞向成骨和成软骨细胞分化，为进一步研究打下基础。     

新生儿股骨干骨折

近年来新生儿股骨干骨折临床已少见，主要得益于围产保健医学发展及剖腹产技术的提高。产伤致新生儿骨折最常见部位为锁骨其次为肱骨及股骨，颅骨少见。本文总结新生儿股骨干骨折的伤因、治疗经验及骨折后对儿童生长发育的影响等。提供预防及治疗的参考。临床资料1985～1996年，我科共收治新生儿股骨干骨折7例。男5例，女2例。除1例因护理不当于生后3周骨折，余均与产伤有关。其中剖腹产5例，臀位产1例。骨折部位均为单侧股骨干上七最大成均达90度平均45度，骨愈合后最大成角60度平均30度。治疗前股骨短缩1．scm～2．ocm之间治疗后平均短缩1…     

急性髋关节一过性滑膜炎的诊断与治疗

目的探讨诊断和治疗急性髋关节一过性滑膜炎简单有效的方法。方法回顾性分析急性髋关节一过性滑膜炎病例32例,对其诊断与治疗经验作以总结。结果32例均获得明确诊断,24例治愈,6例好转,2例减轻。随访21例至今,失访11例,1例复发,未发现股骨头骨骺无菌性坏死者。结论该病诊断明确,治疗方法简单、宜行,疗效优良。     

小儿四肢骨骨化性纤维瘤（附五例报告）

小儿四肢骨骨化纤维瘤少见。１９８１－１９８９年间收治５例，均经病理检查证实。均采用瘤灶清除和自身植骨术。５例中４例术后复发，其中２例行整块病骨连同骨膜切除，１例行同侧腓骨内移术，１例带血管腓骨游离植骨，随访１－７年无复发。