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背景:碱性成纤维细胞生长因子对于创伤修复具有明显的促进作用,但局部应用难以持久地发挥作用.目的:观察碱性成纤维细胞生长因子基因转染至兔骨髓间充质干细胞后的表达情况.设计、时间及地点:细胞基因学体外观察,于2009-03/08在云南大学生命科学院完成.材料:日本大耳白兔1只,购于昆明医学院动物科.pCDNA3.1质粒为美国Invitrogen产品.方法:抽取兔髂前上棘骨髓,采用贴壁法分离培养骨髓间充质干细胞,待细胞融合至培养瓶底80%时消化传代.参考GeneBank碱性成纤维细胞生长因子cDNA序列设计合成基因,电泳纯化后xhol I、BamH I双酶切回收凝胶,以限制性核酸内切酶对PcDNA Vector质粒进行酶切、电泳和凝胶回收,连接碱性成纤维细胞生长因子DNA与PcDNA Vector质粒,构建pCDNA-碱性成纤维细胞生长因子真核表达载体,运用脂质体转染法将重组体转染至兔骨髓间充质干细胞中,并筛选稳定转染株.主要观察指标:骨髓间充质干细胞表面抗原的表达,Western blot法检测目的蛋白的表达.结果:流式细胞仪检测结果示所培养细胞表面抗原呈CD90,CD44阳性,CD45呈阴性;免疫组化检测结果示骨髓间充质干细胞血管源性细胞表面抗原CD34呈阴性,而相对特异性标记物CD44呈阳性.转染碱性成纤维细胞生长因子的骨髓间充质干细胞提取的细胞裂解液中,在M_r 23 000处有一条明显阳性杂交带;而转染pCDNA3.1(-)空载体的骨髓间充质干细胞提取蛋白未见阳性条带.结论:实验成功地将碱性成纤维细胞生长因子基因转染至兔骨髓间充质干细胞,该目的基因可稳定表达. 相似文献
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背景:小肠黏膜下层已经被证实可以引导许多组织的特异性再生。目的:将骨髓间充质干细胞复合猪小肠黏膜下层构建组织工程皮肤并移植修复兔糖尿病皮肤缺损,观察其对糖尿病皮肤缺损的愈合影响和疗效。方法:制作兔糖尿病皮肤缺损,将骨髓间充质干细胞与冻干、灭菌、水合后的猪小肠黏膜下层膜复合制作组织工程皮肤并覆盖修复兔糖尿病皮肤缺损,并与小肠黏膜下层支架组和空白对照组做对照。结果与结论:造模后1,2,4周,组织工程皮肤组缺损皮肤修复面积百分比显著大于小肠黏膜下层支架及空白对照组(P〈0.05)。缺损皮肤修复组织观察组织工程皮肤组组织生长明显快于小肠黏膜下层组与空白对照组。3组均未见明显皮肤附件结构。表明骨髓间充质干细胞复合猪小肠黏膜下层构建的组织工程皮肤修复兔糖尿病皮肤缺损好于单纯小肠黏膜下层膜,无明显瘢痕组织的生成,可作为支架材料用于皮肤缺损的修复。 相似文献
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发展我国信息市场的若干思考 总被引:4,自引:0,他引:4
发展我国信息市场的若干思考王少云邹满王晓云一、信息市场的基本内涵信息市场是信息商品从生产到消费之间的整个流通过程和流通领域,是信息商品交换关系的总和。它包括信息供给、信息需求、信息流通和信息管理四个基本要素。信息供给是信息生产者或提供者向信息市场需求... 相似文献
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脊髓损伤是脊柱骨折最严重的合并症,长期以来人们对脊髓损伤的治疗态度是悲观的,常规的治疗方法对脊髓损伤的治疗效果并不令人满意,骨髓基质细胞是骨髓内造血干细胞以外的非造血干细胞。近年研究发现这类细胞具有高分化潜能,有向神经细胞分化的能力,为脊髓神经损伤的修复提供了一条新的途径。 相似文献
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两种穿刺部位抢救上消化道出血患者的效果比较 总被引:1,自引:0,他引:1
上消化道出血时54.1%的患者在短时间内不能代偿急性血容量的不足而死亡,所以采用及时有效快速的抢救措施,是保证输血补液成功的前提条件。为抢救患者赢得时间,减少并发症发生,现将两种穿刺部位的效果报告如下。 相似文献
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熟地黄中活性成分甘露三糖提取工艺研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:筛选熟地黄中活性成分甘露三糖的最佳提取条件。方法:以高效液相蒸发光散射(HPLC-ELSD)为含量测定方法,采用正交实验,以浸膏得率和甘露三糖含量为考察指标,对甘露三糖的提取工艺条件进行优选。结果:所考察的因素中,对甘露三糖的提取工艺影响程度为:提取次数>浸提时间>加水量。结论:提取甘露三糖的最佳条件为:沸水浸提时间为6h,加4倍水,提取2次,具有工艺简单、成本低、收率稳定等优点。 相似文献