构建和鉴定神经生长因子-β腺相关病毒穿梭质粒

目的 构建能够表达神经生长因子-β重组腺相关病毒穿梭质粒,为进一步包装腺相关病毒奠定基础.方法 利用高保真酶分别扩增pAAV-MCS的结构元件和pGenesil-1.1的功能元件,连人T-easy载体,限制性核酸内切酶酶切并回收目的片段,T4酶连接,得到含U6和CMV双启动子的重组腺相关病毒穿梭质粒pAAV-U6/CMV-EGFP;培养人MIApaca-2细胞,提取总RNA,进行RT-PCR得到人ngf-β基因,插入T-easy载体,得到T-easy-ngf-β;将ngf-β插入pAAV-U6/CMV-EGFP,构建ngf-β重组腺相关病毒穿梭质粒.结果酶切pAAV-U6/CMV-EGFP可见4250 bp、800 bp条带,质粒转染293细胞后可见绿色荧光蛋白表达;质粒T-easy-ngf-β酶切可见3 kb、736 bp条带,测序显示基因序列正确;酶切pAAV-U6/CMV-ngf-β可见4300 bp、736 bp条带;质粒pAAV-U6/CMV-ngf-β测序显示载体中的基因序列正确.结论 成功构建ngf-β重组腺相关病毒穿梭质粒,包装表达神经生长因子的腺相关病毒,为进一步深入研究脊髓损伤的修复提供了实验基础.     

高压氧治疗乳腺癌术后缺血性皮瓣56例分析

乳腺癌是妇女常见的恶性肿瘤之一,手术是治疗乳腺癌最为有效的手段.皮下积液及皮瓣坏死是乳腺癌术后最常见的并发症,虽然不会直接影响患者的生命,但却增加了患者精神压力,影响术后辅助治疗的正常进行[1].笔者回顾分析我院2006年6月至2010年10月乳腺癌改良根治手术治疗的276例乳腺癌患者,对发生皮瓣缺血的56例患者在进行对症治疗的同时采用高压氧(hyperbraic oxygen, HBO)治疗,效果良好.     

维生素D受体基因多态性与特发性癫痫的相关性

目的：探讨维生素D受体基因多态性与特发性癫痫的相关性。方法：通过病例对照研究方法，选取91例特发性癫痫患者作为病例组，另选取同期105例健康者作为对照组，抽取所有研究对象外周静脉血提取DNA，采用PCR直接测序法进行维生素D受体基因BsmI（rs1544410）、FokI（rs2228570）、Cdx2（rs11568820）位点多态性检测。结果：病例组与对照组的BsmI与FokI位点基因型频率和等位基因频率无显著差异（P>0.05）；Cdx2位点基因型频率存在显著差异（χ²=6.67，P=0.036），等位基因频率无显著差异，该位点发生A/G变异，分布不处于Hardy-Weinberg遗传平衡。在Cdx2位点基因型与特发性癫痫关联性分析中，病例组中Cdx2位点AG基因型是特发性癫痫发病的危险因素（OR=2.222，95% CI：1.190~4.150，P=0.027）。结论：维生素D受体基因Cdx2位点多态性与特发性癫痫具有关联性。     

蛋白激酶D1促血管新生的体内外实验分析

 目的: 探讨蛋白激酶D1(PKD1)促血管新生的作用,为心肌梗死等缺血性疾病以PKD1为治疗靶点提供新的思路。方法: 体外培养、分离和鉴定内皮祖细胞(EPCs),观察PKD1及其特异性阻断剂CID755673对EPCs中血管内皮生长因子(VEGF)及其受体KDR表达的影响。复制大鼠心肌梗死模型,分析PKD1及CID755673干预对大鼠心肌梗死后受损心肌组织病理形态学、微血管和内皮细胞变化以及VEGF、KDR表达的影响。结果: EPCs体外细胞培养实验表明,PKD1可明显上调EPCs中VEGF和KDR的表达水平。大鼠心肌梗死动物实验结果表明,PKD1干预后的大鼠心肌组织排列较为有序,结构较为清晰,内皮细胞胞膜光滑、完整,周细胞可见,心肌组织中的VEGF和KDR表达水平显著上调。结论: PKD1有明显的促血管新生作用,该作用可能是通过VEGF介导而实现的。     

结直肠癌患者肌肉量､脂肪量､水分及基础代谢率､骨密度的体质分析

目的:探讨结直肠癌患者肌肉量?脂肪量?水分及基础代谢率?骨密度变化特征?方法:应用身体成分分析仪?骨密度仪等测定198例结直肠癌患者和129例健康人身体组成并进行体质人类学分析?结果:结直肠癌患者体重?腹围?体质指数?全身脂肪量?躯干脂肪量?细胞内水?骨密度小于对照组(P < 0.05),细胞外水?基础代谢率大于对照组(P < 0.05)?不同体质指数及病理分期患者的脂肪量?细胞内水?细胞外水均存在着组间差异(P < 0.05)?结论:结直肠癌患者身体组成变化明显,表现为脂肪减少?细胞内水减少?细胞外水增加?基础代谢率增加?骨密度减低?     

急性胰腺炎和急性心肌梗死患者血清中TNF—α的观察

急性胰腺炎是由于胰腺酶消化胰腺本身所引起的急性炎症。急性心肌梗塞是由于冠状动脉急性闭塞而发生局部心肌缺血性坏死。肿瘤坏死因子(ＴＮＦ—α)系由激活的巨噬单核细胞系统所产生的一种内源性调节因子 ,除可引起肿瘤细胞坏死外 ,还可介导炎症反应的病理生理学变化。我们检测急性胰腺炎及急性心肌梗塞患者治疗前后血清中ＴＮＡ—α ,以观察其在该两种疾病中的变化。对象和方法　临床确诊为急性胰腺炎患者 35例 ,其中男 15例 ,女 2 0例。急性心肌梗死患者 4 6例 ,其中男 32例 ,女 14例。两组年龄 2 5～ 6 5岁。正常人 30例 ,其中男 18例 ,…     

纤维支气管镜诊断支气管内膜结核41例分析

目的探讨经纤维支气管镜检查,提高支气管内膜结核患者的组织学确诊率。方法使用日产OlympusBF-P30纤维支气管镜及配套穿刺针,采用针吸涂片和毛刷涂片进行细胞学和细菌学检查。结果41例患者中针吸涂片确诊率为80.5%,刷检涂片确诊率为43.9%,两者有显著差异(P<0.05)。结论利用纤支镜诊断支气管内膜结核可显著提高诊断率。     

MRA和MRI对烟雾病的诊断价值

烟雾病(moya-moya)又称脑底异常血管网症,是一种少见的慢性进行性脑血管闭塞性疾病,表现为两侧颈内动脉末端逐渐缓慢狭窄和闭塞,由此导致大脑基底部侧支血管广泛扩张和增多,脑底出现异常毛细血管网。磁共振血管造影(MRA)及磁共振成像(MRI)能无创、快速显示颈内及脑底动脉和脑内病变的异常表现,为临床提供准确的影像诊断依据。