重视血液透析患者心血管并发症的防治

心血管并发症（cardiovascular disease，CVD）是终末期透析患者首要死亡原因，理应得到充分的重视，但实际上透析患者CVD和引起CVD的危险因素都没有得到足够的治疗。CVD危险因素一般分传统因素和尿毒症相关（非传统）因素，前者有老龄、男性、糖尿病、高血压、脂质异常、抽烟等；后者包括贫血、血同型半胱氨酸增高、慢性炎症、氧化应激等因素。本文着重谈谈临床重视尚不够的几个问题。     

血浆同型半胱氨酸水平、颈动脉内膜中层厚度与内瘘闭塞的关系

目的 探讨维持性血液透析（MHD）患者血浆总同型半胱氨酸（tHcy）浓度与颈动脉内膜中层厚度（IMT）之间的相关性及其在动静脉内瘘栓塞发生中的作用。方法 选择上海市静安中心医院和解放军第455医院MHD患者120例，根据其在半年内是否有过1次或1次以上的动静脉内瘘栓塞事件，将其分为动静脉内瘘栓塞组（AVFT）和动静脉内瘘非栓塞组（NAVFT），所有患者采用Phllips Iu22彩色多普勒超声仪测量IMT，于透析日抽空腹血测定血浆tHcy、叶酸（FA）、VitB12、肌酐（Scr）、尿素氮（Bun）、血糖（glu）、血浆白蛋白（Alb）、胆固醇（Ch）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）。结果 MHD患者高同型半胱氨酸血症（HHcy）发生率为90％，是正常人的34．6倍，其血浆tHcy水平（27．6±8．3）μmol／L明显高于正常对照组（7．5±1．7）μmol／L，P〈0．01。AVFT组tHcy血浆浓度、IMT平均值明显高于NAVFT组，P〈0．01，tHcy〉40μmol／L的患者数也明显多于NAVFT组，P〈0．05；MHD患者血浆tHcy浓度与IMT呈明显正相关，r=0．362，P〈0．01。结论 MHD患者普遍存在HHcy，HHcy可能是动静脉内瘘栓塞的重要原因之一。     

肌肉萎缩蛋白Fbox-1基因沉默对糖皮质激素作用下肌管萎缩的影响

目的:研究糖皮质激素地塞米松(dexamethasone,DEX)对体外培养肌管的形态、蛋白质合成/分解代谢及肌肉萎缩蛋白Fbox-1(Atrogin-1)的表达,Atrogin-1基因沉默是否可减轻肌管萎缩.方法:体外培养小鼠肌纤维细胞株C2C12细胞并分化为肌管后,用DEX处理48h,同位素3H-酪氨酸掺入法检测蛋白合成,3H-酪氨酸释放率检测蛋白分解代谢;荧光显微镜观察肌管形态并拍照;Northern blot检测Atrogin-1 mRNA水平;应用小分子干扰RNA片段(siRNA)技术使Atrogin-1基因沉默后,观察DEX作用下肌管形态的改变.结果:DEX 5μmol/L作用后,肌管酪氨酸(tyrosine)掺入率下降17.4%,同时tyrosine释放率升高24.7%,使肌管形态变细、萎缩;剂量依赖性地升高Atroign-1蛋白表达水平,使Atroign-1 mRNA表达升高3倍;Atrogin-1基因沉默可改善DEX引起的肌管萎缩. 结论:DEX促进肌管蛋白质分解代谢,并抑制蛋白合成代谢,导致肌肉萎缩;Atrogin-1基因沉默可改善DEX引起的肌肉萎缩,Atrogin-1基因可能是逆转肌肉消耗性营养不良的有效靶点.     

昭通市1996-2011年HIV感染情况分析

目的分析艾滋病疫情态势,探索有效的防治策略来控制HIV感染率。方法对昭通市1996～2011年艾滋病疫情、监测和流行病学资料进行分析。结果截至2011年底,昭通市累计报告HIV／AIDS共计2001例,其中AIDS病人398例,死亡报告273例,注射毒品传播占30％,异性间传播占65．8％,外出务工人员HIV感染者占累积病例报告的53．5％。结论传播途径以性传播为首,感染者以外出务工人群为主,提高外出务工人员对艾滋病的防护意识,并教会他们预防措施是当前昭通市防治艾滋病主要策略。     

血液透析患者动静脉内瘘狭窄的机制研究与防治进展

永久性血管通路是尿毒症患者赖以生存的“生命线”,随着透析人数的逐渐增多及透析时间的延长,内瘘功能丧失也越来越受到重视,已成为血透患者住院和施行手术治疗的最主要原因.内膜增生造成血管非血栓性狭窄是引发内瘘失功的重要因素之一.目前,对于内膜增生机制尚不明确,针对自体血管内瘘与移植血管内瘘狭窄进行的临床实验阶段和新疗法的研究,虽取得了一定的成果但要应用于临床还需要进行进一步转化性研究.     

横纹肌溶解与急性肾衰竭

横纹肌溶解（RM）是指由于各种创伤性或非创伤性因素引起横纹肌（骨骼肌）细胞损伤,胞内容物（钾、磷、肌酸激酶、肌红蛋白、有机酸等）释放入细胞外液和血液循环的一组临床综合征。由于平时临床上RM相对少见,且早期缺乏特异性表现而易被忽视,漏诊、误诊、失治可引起严重甚至致命性的并发症,如高钾血症、心律失常、筋膜室综合征、弥散性血管内凝血（DIC）、急性肾衰竭（ARF）等。     

甘草酸对慢性马兜铃酸肾病大鼠尿蛋白与尿酶排泄及肾功能的影响

目的观察甘草酸对慢性AAN肾损害的干预作用。方法将雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、甘草酸组、泼尼松组。正常组灌胃饮用水;实验组按马兜铃酸20mg.kg-1.d-1灌胃关木通浸膏,建立大鼠慢性AAN动物模型,并于2h后按分组灌胃给药:甘草酸25mg.kg-1.d-1,泼尼松3.15mg.kg-1.d-1,模型组灌胃饮用水。各组每周测量体重,于第4、8、12周代谢笼法留取24 h尿液,腹主动脉采血并分离血清,测定相关肾功能指标。结果随着喂饲时间延长,正常组大鼠体重稳定性增长,而马兜铃酸造模各组体重增长缓慢,尿白蛋白、NAG酶排泄量、肌酐/体重水平均明显升高,其中甘草酸组、泼尼松组尿白蛋白和NAG酶排泄量、血肌酐/体重水平均较模型组明显降低。结论甘草酸对马兜铃酸肾损害有一定的保护作用,能降低尿白蛋白和尿ANG酶排泄,改善肾功能。     

伽玛刀治疗过程中肿瘤患者发生急性肾损伤的影响因素研究

立体定向伽玛射线治疗系统(stereotactic mdiosurgery)即伽玛刀是晚期肿瘤的重要治疗方法.有文献报道,2002年我国已有10余万人接受伽玛刀治疗,约占全世界治疗总数的55%[1].国内外有关伽玛刀治疗过程中发生肾损伤的文献较少,其确切发生率与发病机制尚不清楚,本研究旨在观察伽玛刀治疗过程与肿瘤患者发生急性肾损伤(AKI)的关系,并分析相关危险因素.     

红细胞生成素对模拟急性肾损伤微环境下培养骨髓间充质干细胞增殖的影响及机制探讨

目的 观察经红细胞生成素（EPO）干预后,体外模拟急性肾损伤（AKI）微环境下培养骨髓间充质干细胞（MSC）的分裂增殖情况,并探讨产生这种变化的可能机制。 方法 抽取C57BL/6小鼠的骨髓,经Percoll密度梯度离心联合贴壁培养法分离纯化出小鼠MSC（mMSC）,以流式细胞仪鉴定。夹闭雄性C57BL/6小鼠双侧肾蒂30 min再开放30 min的方法制作AKI鼠模型,即刻取双侧肾脏皮质制作缺血再灌注（IR）肾脏匀浆上清。取扩增第3代的mMSC分组培养：A组：含10%胎牛血清的低糖DMEM培养基;B组：含10%胎牛血清的低糖DMEM培养基＋IR肾脏匀浆上清,体外模拟AKI微环境干预mMSC;C组：含10%胎牛血清的低糖DMEM培养基＋IR肾脏匀浆上清+不同浓度EPO（1、5、10、50 U/ml）。培养1、3、5、7 d。CCK-8法检测各组培养mMSC的增殖,TUNEL法检测mMSC凋亡,Western印迹法检测mMSC表面EPO受体（EPOR）及增殖凋亡相关信号通路蛋白的表达。 结果 CCK-8法检测显示,经IR肾脏匀浆上清干预后,不同时间点mMSC的增殖效应显著减弱（P ＜ 0.01）,而TUNEL检测表明其胞核染色阳性细胞的百分比显著高于A组（P ＜ 0.01）;给予EPO干预后,mMSC的增殖能力增强,胞核染色阳性细胞百分比降低,具有浓度依赖效应。Western印迹结果显示,第3代mMSC表面存在EPOR表达,培养5 d后EPOR相对表达量为0.092±0.015。EPO以剂量和时间依赖性降低AKI微环境下凋亡相关蛋白caspase-3的表达,同时上调凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达。用10 U/ml EPO干预5 d后,相对于B组,磷酸化蛋白酪氨酸激酶2及磷酸化信号转导和转录因子的表达均显著上调（均P < 0.01）。 结论 EPO能促进体外AKI微环境干预下培养mMSC的增殖,减轻其凋亡,该效应经EPOR介导,并与增殖凋亡相关信号通路蛋白有关。     

骨髓间充质干细胞干预对缺血再灌注致小鼠肾小管上皮细胞损伤的保护作用

目的 观察骨髓间充质干细胞(MSCs)干预对缺血再灌注(I/R)诱导的急性肾损伤小鼠肾小管上皮细胞(RTECs)自身修复的影响.方法 Percoll密度梯度离心结合贴壁培养法分离纯化出C57BL/6小鼠的骨髓间充质干细胞(mMSCs),5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记.雄性C57BL/6小鼠45只,分为正常对照组(15只)、I/R组(15只、夹闭双侧肾蒂30 min开放)、I/R+Brdu-mMSCs组(15只、夹闭双侧肾蒂30 min开放的同时尾静脉注射BrdU标记的mMSCs).留取动脉血及肾组织,检测血尿素氮(BUN)及肌酐(Scr)水平,制作肾组织切片行苏木素-伊红(HE)染色,荧光组织化学观察mMSCs在受体小鼠肾组织的分布,免疫组织化学观察RTECs增强细胞核抗原(PCNA)的表达,TUNEL法检测RTECs凋亡,Western blot检测建模后第2天肾小管组织中Caspase-3、bcl-2蛋白的表达.结果 BrdU标记mMSCs的阳性率可达(98.71±0.32)%.I/R+BrdU-mMSCs组小鼠的BUN及Scr水平较I/R组为低,肾小管损伤病理明显减轻,且小鼠的肾脏中可检测到BrdU+细胞的分布.mMSCs干预后,RTECs细胞核PCNA阳性表达明显增多(P＜0.05或P＜0.01),而细胞凋亡的水平却较I/R组明显减少(P＜0.05或P＜0.01).Western blot进一步显示:I/R+BrdU-mMSCs组小鼠的肾组织中Caspase-3蛋白水平明显下降[(1.16±0.33)比(1.64±0.27),P＜0.01],而bcl-2水平却明显增高[(0.94±0.27)比(0.68 ±0.15),P＜0.01].结论 小鼠发生I/R诱导的急性肾损伤后可诱导移植的MSCs向损伤肾组织归巢,锚定在肾脏的MSCs可促进损伤RTECs的再生,抑制其凋亡,从而有助于RTECs的自身修复,延缓肾损害进展.

Abstract：

Objective To observe the effects of mesenchymal stem cells (MSCs) on self-repair of renal tubular epithelial cells ( RTECs) in mice under ischemia/reperfusion ( IR). Methods MSCs in C57BL/6 mice were successfully isolated by Percoll density gradient centrifugation and adherence cultivation, then marked with BrdU. Forty-five healthy male C57BL/6 mice were assigned to control group (n =15 ) , I/R group (n = 15 , clamping bilateral renal pedicles and then reopening after 30 min) , I/R + BrdU-MSCs group (n = 15 , clamping bilateral renal pedicles and then reopening after 30 min, meanwhile, BrdU-marked MSCs were injected through caudal vein into the body of model mice). One, 2,3,7 and 14 days later, the mice were killed (n = 3/each group) , and blood and kidneys were obtained. Serum creatinine (Scr) and urea nitrogen (BUN) were determined, and mice kidneys were stained with Hematoxylin and Eosin ( HE) to observe their pathological changes. The distribution of MSCs in mice was observed by using fluorescence histochemistry. The expression of proliferating cell nuclear antigen ( PCNA) in RTECs was assessed by using immunohistological staining. The apoptosis of RTECs was detected by using TUNEL. The protein levels of Caspase-3 and bcl-2 in renal tubules on the day 2 after establishing the model were detected by using Western blotting. Results The positive BrdU marking ratio was (98. 71 ±0. 32) % in MSCs.As compared with I/R group, the levels of BUN and Scr in I/R + BrdU-MSCs group were significantly reduced, and pathological changes in renal tubules were alleviated significantly. BrdU-marked MSCs desposited in the kidneys of I/R + BrdU-MSCs group. The positive PCNA expression of RTECs was increased significantly after intervention of BrdU-MSCs (P ＜0. 05 or P ＜0. 01) , while the apoptosis relieved significantly. Western blotting analysis revealed: as compared with I/R group, the level of Caspase-3 in I/R + BrdU-MSCs group was decreased notably [(1.16±0.33) vs (1.64±0.27), P＜0.01], while the level of bcl-2 increased significantly [(0.94±0.27) vs (0.68±0.15), P＜0.01). Conclusion Acute renal injury by I/R can induce MSCs homing to injured kidney and anchoring here. The anchored MSCs can contribute to RTECs' self-repair of mice under ischemia/reperfusion, inhibit their apoptosis, which is helpful to the RTECs' self-repair and can delay the progression of renal injury.