精原干细胞移植后的体内迁移、增殖和分化

背景:精原干细胞移植对男性不育的治疗具有潜在的临床应用价值,但移植后干细胞体内迁移、增殖、分化的过程目前尚不完全清楚.目的:观测精原干细胞移植后的体内迁移、增殖和分化过程.方法:以出生后6～10 d的雄性C57BL/6小鼠为供体,通过复合酶消化、差速贴壁结合非连续性Percoll密度梯度离心的方法获取精原干细胞;以出生后6周的雄性C57BL/6小鼠为受体,腹腔注射白消安,破坏其内源性生精功能.实验组采用曲细精管微注射法将供体精原干细胞移植入受体睾丸内,对移植后细胞进行PKH26-GL荧光追踪分析,观察其体内迁移过程,以Western Blot和RFQ-PCR法检测睾丸组织α6-Integrin,c-kit,SCF蛋白及mRNA的变化.以未接受化疗和细胞移植的正常同系生小鼠作为阳性对照组,以单侧睾丸曲细精管微注射移植细胞递质作为阴性对照组.结果与结论:PKH26-GL荧光追踪移植细胞,移植后1周部分精原干细胞已向曲细精管基底膜迁移,移植后1个月精原干细胞已从曲细精管管腔迁移至曲细精管基底膜,并分裂增殖,移植后3个月曲细精管管腔内可见大量精子细胞形成.移植后1,2,3个月,各组α6-Integrin,c-kit蛋白表达均呈增加趋势(P < 0.01),阴性对照组、实验组SCF蛋白表达有增加趋势(P < 0.05);各组α6-Integrin,c-kit,SCF mRNA的表达均有增加趋势(P < 0.05).提示大剂量化疗后,生精上皮内仍存在一定数量的Sertoli细胞,这种精子发生的微环境并未完全破坏,外源性精原干细胞移植后能在受体Sertoli细胞所提供的微环境中增殖和分化.     

Lin28对胃腺癌细胞株增殖周期的影响及机制

目的:通过检测可以调控微小RNA(microRNA)生成的RNA结合蛋白Lin28在不同分化程度胃腺癌细胞中的表达水平,探讨了Lin28对胃癌细胞周期的影响及其可能的机制。方法:用RT-PCR法在RNA水平检测Lin28的表达,免疫荧光染色分析Lin28蛋白和人细胞角蛋白18(CK-18)在细胞中的共表达情况,分别应用RNA干扰技术敲减Lin28,及细胞转染技术过表达Lin28,比较Lin28表达水平变化前后细胞周期调控相关蛋白的变化情况,碘化丙啶(propidiumiodide,PI)染色检测细胞周期变化。结果:Lin28在高分化胃腺癌细胞株MKN28中的RNA和蛋白水平均低表达,而在低分化胃腺癌细胞株MKN45中均高表达;Lin28与肿瘤干细胞的常见标志物CK-18共表达于极少数胃癌细胞中;敲减了Lin28的MKN45细胞株S期则明显增加,而G1期比对照组相应地减少。相反,Lin28过表达导致S期明显减少,而G1期比对照组相应增加。Westernblot检测发现,敲减了Lin28的MKN45细胞株细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)蛋白发生明显的上调,抑制其活性的蛋白p21和p27水平降低;而MKN28获得Lin28后,CDK2水平有所下调,p21和p27表达水平上调。结论:Lin28参与胃癌细胞分化和细胞周期相关的调控,且对细胞周期抑制蛋白p21/CDK2,p27/CDK2也发挥着一定的调节作用。     

兔骨髓间充质干细胞的分离方法

骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCS)是骨髓中除造血干细胞以外的另一类干细胞,其具有多向分化潜能,在不同的诱导条件下可分化为多种组织细胞[1],如成肌细胞、成骨细胞、脂肪细胞、肝细胞、心肌细胞、肺细胞、神经细胞等.     

液体发酵法制备富铬酵母

铬是人体和动物的必需微量元素,其主要生物效应是调节体内糖代谢和脂代谢,体内铬缺乏时会发生两种物质的代谢紊乱.糖尿病患者及年龄的增长均会造成血清中铬水平的降低,食物中的铬含量往往不能满足人体在疾病及特殊生理状态下的需要,补充铬可以预防和治疗糖尿病[3],降低高血脂患者的TC、TG及LDL-C,并升高HDL-C[1].     

逍遥散加味治疗女性更年期失眠35例

笔者用逍遥散加味治疗女性更年期失眠,取得了较好疗效,现将有关资料总结如下. 1 临床资料 本组病例共35人,均为女性,年龄40岁～60岁,其中40岁～45岁4人,45岁～50岁16人,50岁～55岁13人,55岁～60岁2人.35人均为正常进入更年期,没有妇科手术史,而且除外其他神经科疾患.失眠1个月到1年不等,平均3个月,主要表现为入睡困难,卧床1h以上不能入睡,睡后易醒,醒后难以再次入睡,每晚睡眠时间少于4h,多梦,白天精神疲倦.常见的伴随症状有潮热盗汗、心烦易怒、眩晕、焦虑、月经紊乱、心悸等.     

198例剖宫产手术患者围手术期抗菌药物的应用分析

目的了解剖宫产患者围手术期抗菌药物的使用现状,提高临床合理用药水平。方法运用回顾性调查法,对剖宫产围手术期用药品种、频度、药物利用指数及用药时间、联合用药等进行统计分析与评价。结果调查198例手术患者全部使用抗菌药物,用药时机均为术后静脉给药;使用频度最高的药物是头孢呋辛钠、头孢西丁、头孢噻肟钠;术后抗菌药物平均用药天数5.79d;术后无并发感染;联合用药率15.15%;头孢呋辛、头孢硫脒、头孢噻肟钠的药物利用指数(DUI)>1。结论剖宫产围手术期抗菌药物应用基本合理,以《围手术期预防应用抗生素指南》为参照标准,仍需进一步规范。     

野罂粟对人淋巴细胞的毒性效应

目的探讨野罂粟提取物及总生物碱对人遗传物质的毒理效应。方法用微核率和姊妹染色单体互换(SCE)率来评价野罂粟提取物及总生物碱对人淋巴细胞的遗传毒性作用。结果低剂量野罂粟提取物(1mg)组及总生物碱(2μg、4μg和8μg)组的SCE率、微核率与空白对照组无差异(P>0.05),但随提取物及总生物碱浓度升高,SCE率、微核率逐渐上升,表现出明显的剂量-效应关系。结论提取物及总生物碱虽有一定的细胞毒性和遗传毒性,但在正常使用剂量内不会引起人遗传物质的毒性效应。     

大隐静脉高位结扎并浅静脉电凝术治疗大隐静脉曲张的临床研究

目的：对比研究大隐静脉高位结扎并浅静脉电凝术治疗大隐静脉曲张的疗效。方法：研究组：采用大隐静脉高位结扎并浅静脉电凝术30例；对照组：采用传统手术方法（高位结扎加迂曲静脉剥脱术）30例。比较两组手术时间、术中出血量、术中开始下床活动时间、住宅天数等指标。结果：研究组与对照组术中出血、下床时间、拆线时间、住院天数、手术时间均有显性差异（P＜0．01，P＜0．05）。结论：大隐静脉高位结扎并浅静脉电凝术的临床综合疗效明显优于传统手术方法（高位结扎加迂曲静脉剥脱术），值得临床推广。     

高血压患者健康档案管理效果评价

目的 评价高血压健康档案管理的效果,探讨社区高血压综合防治的有效方法 .方法 采用问卷调查的方式对北京市石景山区永乐西小区152例高血压患者进行为期1年的健康档案系统管理、规范治疗、定期随访,对比分析健康教育后患者血压、危险度分层、高血压相关知识知晓率等方面的变化.结果 152例患者血压控制率为71.1%.152例高血压患者健康档案管理前后危险度分层阃差异无统计学意义(P=0.08).健康档案管理前后152例患者对高血压的标准、并发症、戒烟限酒、合理运动、规律服药、自测血压的知晓率间差异均有统计学意义(P<0.01).结论 高血压的健康档案系统管理能提高高血压的控制率,是综合防治高血压的有效方法 .