霍山石斛不同提取物对肾阴虚证和肾阳虚证小鼠温度趋向性、环核苷酸及甲状腺激素的影响

目的:研究霍山石斛不同提取物对肾阴虚证、肾阳虚证小鼠温度趋向性、环核苷酸及甲状腺素水平的影响,探讨霍山石斛寒凉药性的物质基础。方法:180只小鼠随机分为15组,每组12只。连续14d分别灌服甲状腺素(160mg/kg)、氢化可的松溶液(25mg/kg)制备肾阴虚、肾阳虚动物模型,观察各组小鼠的一般状态、体质量和温度趋向性,检测血清cAMP、cGMP、T3、T4水平,计算cAMP/cGMP比值。结果:与肾阴虚模型组比较,实验第14天,霍山石斛水提物及醇提物可增加小鼠的体质量和热区停留比例(P<0.05,P<0.01),降低cAMP含量和T4的含量(P<0.05,P<0.01),霍山石斛水提物及醇提物高剂量组能降低cAMP/cGMP值(P<0.01),降低T3含量(P<0.05,P<0.01);与肾阳虚模型组比较,实验第14天,霍山石斛水提物高剂量可增加小鼠的体质量(P<0.01),降低其热区停留比例(P<0.05),升高cAMP值、cAMP/cGMP值及T3、T4含量(P<0.05,P<0.01)。结论:霍山石斛水提物对肾阴虚证和肾阳虚证的机体状态、环核苷酸水平及甲状腺激素水平均有调节作用,表现出平性药的药性特点;霍山石斛醇提物仅对肾阴虚证有调节作用,表现出寒凉药性;由此推断,霍山石斛醇提物是其寒凉药性的物质基础,水提物和醇提物综合作用使霍山石斛显现微寒之性。     

霍山石斛不同提取物对肾阴虚证、肾阳虚证小鼠抗疲劳作用及物质基础研究

目的:研究霍山石斛水提物、醇提物对肾阴虚证、肾阳虚证小鼠抗疲劳作用及其物质基础。方法:180只健康昆明雄性小鼠适应性喂养7d后随机分为空白组、肾阴虚模型组、肾阳虚模型组、西洋参组、人参组、肾阴虚各给药组、肾阳虚各给药组,分别每日灌服甲状腺素溶液和氢化可的松溶液制备肾阴虚证、肾阳虚证动物模型,给药14d,检测各组小鼠的力竭游泳时间、肝糖原、肌糖原、血乳酸(BLA)、游离脂肪酸(FFA)、血尿素氮(BUN)、甘油三酯(TG)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、Na⁺-K⁺-ATP酶和Ca²⁺-ATP酶的变化。结果:与肾阴虚模型组比较,霍山石斛水提物各剂量组、醇提物高剂量组能升高模型小鼠的力竭游泳时间,升高肝糖原和肌糖原含量,降低血清FFA、BUN和TG,提高LDH值,降低肝脏CK、Na⁺-K⁺-ATP酶及Ca²⁺-ATP酶值(P<0.05,P<0.01)。与肾阳虚模型组比较,霍山石斛水提物高剂量组能升高模型小鼠的力竭游泳时间,升高肝糖原和肌糖原含量,降低BLA水平,升高血清FFA、BUN、TG、CK及肝脏LDH、Na⁺-K⁺-ATP酶值(P<0.05,P<0.01),霍山石斛醇提物高剂量能升高模型小鼠的力竭游泳时间和肌糖原含量(P<0.05)。结论:霍山石斛水提物能提高肾阴虚证、肾阳虚证小鼠的抗疲劳作用,具有双向调节作用,可能是霍山石斛补虚作用的主要物质基础,霍山石斛醇提物仅能提高肾阴虚证小鼠的抗疲劳作用,可能是霍山石斛滋阴清热功效的主要物质基础。     

铁皮枫斗颗粒对气阴两虚证小鼠环核苷酸-内分泌-免疫系统的影响

目的：通过建立气阴两虚证小鼠模型，探讨铁皮枫斗颗粒的益气养阴功效与作用机制。方法：将60只雄性ICR小鼠随机分为空白组、模型组、玉屏风颗粒组、铁皮枫斗颗粒高、中、低剂量组，每组10只，连续给药30 d。实验采用单日限制饮食，双日负重力竭游泳运动，结合灌胃左甲状腺素钠片构建小鼠气阴两虚证模型。动态观察小鼠一般状态，测定小鼠体质量、脏器指数、四肢抓力和力竭游泳时间；采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定小鼠血清环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、白细胞介素-6(IL-6)、补体成分3(C3)、皮质醇(CORT)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、促甲状腺激素(TSH)、雌二醇(E2)和睾酮(T)相关指标，采用实时聚合酶链反应（Real-time PCR）观察下丘脑组织中蛋白激酶A(PKA)和cAMP反应元件结合蛋白(CREB)、信使核糖核酸(mRNA)表达水平。结果：与模型组比较，各给药组均可改善小鼠的一般状态，实验第30天，铁皮枫斗颗粒高、中剂量组均可增加小鼠体质量（P<0.01）。铁皮枫斗颗粒高剂量组可以增大小鼠胸腺指数、脾脏指数和四肢抓力，延长负重游泳力竭时间（P<0.05，P<0.01），降低血清cAMP、cAMP/cGMP、T3、E2、E2/T和IL-6水平（P<0.05，P<0.01），升高血清T、C3水平（P<0.01），降低下丘脑组织PKAmRNA表达水平（P<0.01）。铁皮枫斗颗粒中剂量组可以升高血清中TSH水平（P<0.01），低剂量组可以降低下丘脑组织中CREBmRNA的表达水平（P<0.05）。结论：铁皮枫斗颗粒可以改善气阴两虚证小鼠的一般状态，通过调节环核苷酸、内分泌和免疫系统这一网络机制，上调PKA/CREB信号通路，起到益气养阴的功效。     

臻源胶囊对免疫力低下脾虚证小鼠增强免疫力和健脾功效研究

目的 探究臻源胶囊增强免疫力作用及健脾中医功效，阐释健脾与免疫相关性。方法 小鼠随机分为正常组，模型组，无比山药丸组，臻源胶囊高、低剂量组，除正常组外其余各组第12～14天腹腔注射环磷酰胺进行造模，连续3 d。记录小鼠体质量，脾脏指数和胸腺指数，Elisa法检测IL-2、TNF-α、IFN-γ、IL-6、Ig G、Ig M、IL-10、TGF-β、IL-17、sIg A、VIP、MTL、GAS、SS及线粒体呼吸链复合物Ⅰ、IV含量，分光光度法测Na⁺-K⁺-ATP酶、Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性，WB法检测T-bet、GATA-3蛋白表达水平。结果 与模型组比较，臻源胶囊各剂量组小鼠血清IL-2,IFN-γ含量升高，TNF-α含量降低，小肠IL-17、s Ig A、MTL和Gas含量升高，TGF-β及VIP、SS含量降低，肝脏线粒体呼吸链复合链I升高，脾脏T-bet和T-bet/GATA-3比值升高，GATA-3降低(P<0.001,P<0.01,P<0.05)。臻源胶囊高剂量...     

川芎对衰老大鼠脑保护作用及对PI3K/AKT/HIF-1α通路的影响

目的：通过构建衰老合并血瘀大鼠模型，探讨川芎小剂量久服对于延缓衰老脑保护的药效及作用机制，为川芎的临床用药提供依据。方法：将66只SD大鼠分为空白组、模型组、维生素E组、川芎2 g组、川芎4 g组、川芎配伍人参2 g组，每组11只。除空白组外各组腹腔注射D-半乳糖（300 mg/kg）连续42 d，同时继续造模并给药14 d，第15天冰水浴20 min，连续14 d，最后1 d注射0.1%肾上腺素0.8 mg/kg。WST-1法检测血清超氧化物歧化酶（SOD）、比色法检测谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性、总抗氧化能力（T-AOC），TBA法检测脂质过氧化产物丙二醛（MDA），酶联免疫吸附试验检测蛋白质羰基（PC）含量，酶联免疫吸附试验检测脑组织一氧化氮（NO）、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、血栓素B2(TXB2)、内皮素（ET）-1含量。蛋白质印迹法（Western Blotting）测定检测脑组织磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）蛋白、蛋白激酶B（AKT）蛋白、缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）表达量。结果：与空白组比较，模型组体质量下降（P<0.001），血清SOD、GSH-PX、T-AOC含量降低（P<0.001，P<0.01，P<0.01），MDA、PC含量升高（P<0.001），脑组织NO、TXB2、ET-1含量升高（P<0.001，P<0.05，P<0.001），eNOS含量降低（P<0.01），HIF-1α表达量降低（P<0.05）；与模型组比较，川芎2 g及4 g能升高血清GSH-Px含量，增加T-AOC，降低脑组织NO、TXB2、ET-1含量，升高eNOS（P<0.01），川芎4 g可以增加HIF-1α蛋白表达量（P<0.01）。川芎1 g与人参1 g配伍后进一步升高血清SOD、GSH-Px含量，降低血清MDA、PC含量，降低脑组织NO、TXB2、ET-1含量（P<0.001，P<0.05，P<0.001），升高eNOS（P<0.001），增加HIF-1α蛋白表达量（P<0.01）。结论：对衰老合并血瘀大鼠模型，川芎小剂量久服即可改善内皮功能，抑制氧化应激，发挥抗氧化作用；川芎剂量减少并与人参配伍后可以起到协同增效作用，可能通过HIF-1α通路对脑起到保护作用。