印记基因TSSC3对骨肉瘤血管生成的影响

目的 通过体内外实验观察印记基因TSSC3对骨肉瘤血管生成的影响.方法 利用慢病毒建立稳定过表达TSSC3的骨肉瘤MTH细胞株,收集骨肉瘤细胞上清制备条件培养基(conditional medium,CM);通过划痕实验、Transwell实验及小管形成实验观察CM对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)的迁移和小管形成能力的影响;RT-PCR、Western blot及酶联免疫吸附试验(ELISA)检测骨肉瘤细胞中血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA) mRNA及蛋白水平变化;建立裸鼠移植瘤模型,免疫组化检测肿瘤组织中VEGFA蛋白及微血管密度(microvessel density,MVD)的表达情况.结果 过表达TSSC3(overTSSC3)组CM抑制内皮细胞迁移和小管形成,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01);RT-PCR、Western blot及ELISA检测结果显示,overTSSC3组细胞较对照组VEGFA mRNA和蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P＜0.01);裸鼠移植瘤免疫组化检测结果显示,overTSSC3组肿瘤中VEGFA蛋白表达量及MVD明显低于对照组.结论 印记基因TSSC3可能通过下调VEGFA的表达进而抑制骨肉瘤血管生成.     

中药配伍减毒研究思路与方法——以蟾酥、牛黄为例

配伍减毒是中医遣方用药特色优势,通过合理剂量与组方控制,调其偏性,制其毒性,而用于临床,被医家所推崇。本文总结了中药配伍减毒研究的思路与方法,特别是以牛黄和蟾酥为例,在中医理论与实践、减毒效应、化学物质、组/成分间体内/外相互作用以及减毒机理等层面,探讨了其配伍减毒的科学内涵。以期为该领域研究的持续深入和拓展提供经验参考及借鉴。     

乙酰丙酸-十二烷基硫酸钠对结核分枝杆菌的杀灭作用及其杀菌机制的蛋白组学研究

目的 研究消毒剂乙酰丙酸-十二烷基硫酸钠（LVA-SDS）对结核分枝杆菌标准株H37Rv的杀灭作用,并对其在蛋白质水平的杀菌机制进行研究。方法 按照2002年版卫生部《消毒技术规范》要求,首先采用悬液定量杀菌试验,观察LVA-SDS对结核分枝杆菌H37Rv是否存在杀灭作用;然后采用Label-free定量蛋白质组学技术筛选3次独立重复的实验组（LVA-SDS与结核分枝杆菌H37Rv的菌悬液接触30 min）和对照组的差异表达蛋白,通过生物信息学分析差异蛋白之间的相互作用,利用Western blot验证差异蛋白。结果 20% LVA+2% SDS消毒剂对结核分枝杆菌H37Rv有较好的杀灭作用;筛选差异表达蛋白414种（P<0.05）,其中44种蛋白表达上调,370种蛋白表达下调。蛋白相互作用发现异柠檬酸裂解酶（ICL）等14种蛋白处于相互作用网络关键节点。Western blot验证结果显示免疫蛋白印记与定量比较蛋白组学实验结果有较好的可重复性。结论 LVA-SDS对结核分枝杆菌确实存在很好的杀灭作用;差异蛋白的发现有助于了解LVA-SDS对结核分枝杆菌的杀菌机制,为新型抗结核药物和消毒剂的研发提供新的分子标识。     

肺炎支原体肺炎患儿黏液栓形成原因分析

目的　分析肺炎支原体（MP）肺炎患儿黏液栓形成与MP菌量、混合细菌或病毒感染的相关性。方法　选取2014年6月—2015年12月河北省儿童医院收治的MP感染所致肺实变患儿87例,根据支气管镜下表现,将患儿分为黏液栓组（34例）和非黏液栓组（53例）。采用实时荧光定量聚合酶链式反应对患儿肺泡灌洗液（BALF）进行MP-DNA定量;取痰液及BALF用于细菌培养;采用GeXP多重基因表达分析系统联合多重反转录-聚合酶链反应检测痰液病毒。结果　黏液栓组高菌量比例、混合病毒感染率分别为64.7%（22/34）、52.9%（18/34）,高于非黏液栓组的24.5%（13/53）、20.8%（11/53）（P<0.05）。两组混合细菌感染率比较,差异无统计学意义（P>0.05）。多因素Logistic回归分析显示,高菌量〔OR=10.682,95%CI（1.447,78.877）〕是MP肺炎患儿黏液栓形成的危险因素（P<0.05）。结论　MP肺炎患儿黏液栓的形成与MP菌量、混合病毒感染有关,而未见与患儿性别、年龄有关。     

北京市社区卫生服务中心妇女卫生保健服务能力调查

目的　了解北京市社区卫生服务中心妇女卫生保健服务能力。方法　将北京市16个区/县以城区及远郊区/县分层,按1∶1的比例抽取样本,采用目的抽样法抽取93家社区卫生服务中心为研究对象,其中城区48家,远郊区/县45家。于2016年6—7月采用自行设计的问卷进行调查。问卷的主要内容包括：妇女保健科室设置情况、社区卫生服务中心提供的妇女卫生保健服务项目情况、社区卫生服务中心提供的实验室和影像学检查项目。共发放问卷93份,回收有效问卷93份,问卷的有效回收率为100.0%。结果　93家社区卫生服务中心中,72家（77.4%）有专门的妇科医师,其中31家（43.0%）有独立的妇科门诊。北京市城区与远郊区/县有独立妇科门诊的社区卫生服务中心的比例比较,差异无统计学意义（P>0.05）。93家社区卫生服务中心中,提供宫颈癌筛查、乳腺癌筛查、计划生育手术、更年期保健、产前检查服务的机构分别有47家（50.5%）、53家（57.0%）、28家（30.1%）、57家（61.3%）、34家（36.6%）。城区和远郊区/县提供计划生育手术、更年期保健的社区卫生服务中心比例比较,差异有统计学意义（P<0.05）;城区和远郊区/县提供宫颈癌筛查、乳腺癌筛查、产前检查的社区卫生服务中心比例比较,差异无统计学意义（P>0.05）。93家社区卫生服务中心中,开展彩超、超声骨密度检测、电子阴道镜检查、妇科经阴道超声检查、乳腺超声检查、血生化检查、女性激素检查服务的机构分别有80家（86.0%）、45家（48.4%）、15家（16.1%）、37家（39.8%）、74家（79.6%）、86家（92.5%）、23家（24.7%）。城区和远郊区/县提供彩色超声检查、超声骨密度检测、妇科经阴道超声检查的社区卫生服务中心比例比较,差异有统计学意义（P<0.05）;城区和远郊区/县提供电子阴道镜检查、乳腺超声检查、血生化检查、女性激素检查的社区卫生服务中心比例比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论　北京市社区卫生服务中心已经初步具备开展妇女卫生保健的相关人员配置及硬件设施,开展形式多样,但仍需加强妇科专业人员配置和妇科门诊设置。     

经脐单部位腹腔镜手术治疗新生儿先天性十二指肠梗阻的疗效和安全性观察

目的: 探讨经脐单部位腹腔镜手术治疗新生儿先天性十二指肠梗阻（CDO）的疗效和安全性。方法: 回顾性分析2017年11月至2018年1月在浙江大学医学院附属儿童医院行经脐单部位腹腔镜手术治疗CDO的新生儿15例（单部位组）,以及2017年8至10月采用传统三孔法腹腔镜手术治疗CDO的新生儿20例（三孔组）的临床资料。比较两组手术时间、术后初次进食时间、术后足量进食时间、术后住院天数和并发症等。结果: 两组手术均顺利完成,无中转开腹手术者,无术中大出血发生。单部位组手术时间十二指肠菱形吻合术为（90±10）min,拉德手术为（81±15）min;三孔组手术时间十二指肠菱形吻合术为（85±9）min,拉德手术为（72±11）min,两组差异均无统计学意义（均P>0.05）。单部位组术后初次进食时间为（5.0±1.0）d,术后足量进食时间为（9.0±1.2）d;三孔组术后初次进食时间为（4.8±0.8）d,术后足量进食时间为（9.3±0.8）d,差异均无统计学意义（均P>0.05）。术后住院天数单部位组为（11.2±2.5）d,三孔组为（11.5±2.8）d,差异亦无统计学意义（P>0.05）。结论: 经脐单部位腹腔镜手术治疗新生儿CDO与传统三孔法腹腔镜手术治疗同样安全有效,并且术后腹部切口更加隐匿。     

带股骨距假体置换与髓内钉治疗高龄股骨转子间骨折的临床疗效对比

目的 :分析采用带股骨距假体髋关节置换术与同期行闭合复位防旋股骨近端髓内钉(proximal femoral nail antirotation,PFNA)内固定术治疗高龄患者(≥80岁)股骨转子间不稳定型骨折(EvansⅢ、Ⅳ型)的临床疗效。方法:回顾分析2016年6月至2018年3月采用假体置换与PFNA治疗的高龄股骨转子间不稳定型骨折患者60例,根据手术方式分为PFNA组与假体组,其中PFNA组男21例,女15例,年龄(84.3±2.9)岁;假体组男10例,女14例,年龄(82.9±2.4)岁。观察比较两组手术时间、术前与术后1 d血红蛋白差值、术后下地活动时间、住院时间及并发症发生情况,术后3、12个月行髋关节功能Harris评分。结果:患者均获得随访,时间12～24(19.3±4.8)个月,假体组1例1年后死于肺癌,随访终止。假体组手术时间长于PFNA组(P<0.05);术前后血红蛋白差值,假体组与PFNA组无差异(P>0.05);下地活动时间,假体组早于PFNA组(P<0.05);并发症出现数量,假体组少于PFNA组(P<0.05);治疗前假体组与P...     

BCMA靶向的嵌合抗原受体T细胞治疗复发/难治多发性骨髓瘤患者发生肿瘤溶解综合征的危险因素

目的：探究应用B细胞成熟抗原（BCMA）靶向的嵌合抗原受体（CAR）T细胞治疗的复发/难治多发性骨髓瘤（MM）患者发生肿瘤溶解综合征（TLS）的危险因素。方法：收集浙江大学医学院附属第一医院2018年7月至2021年12月共99例接受BCMA靶向的CAR-T细胞治疗MM患者的临床资料,通过单因素分析及多因素logistic回归分析患者接受BCMA靶向的CAR-T细胞治疗后发生TLS的危险因素。结果：99例患者中,17例发生TLS（TLS组）,发生率为17.2%,发生时间为BCMA靶向的CAR-T细胞输注后（8.9±3.0）d。TLS组均出现TLS相关临床表现,其中出现肾功能不全17例,心律失常8例。TLS组均发生细胞因子释放综合征（CRS）,发生时间为BCMA靶向CAR-T细胞输注后1.0（1.0,6.5）d,其中3~4级CRS 13例。TLS组治疗前血肌酐、血尿酸较非TLS组高,3~4级CRS患者的比例也高于非TLS组（P<0.01或P<0.05）。Logistic回归分析结果显示,高血肌酐水平（OR=1.015,P<0.01）和严重CRS（OR=9.371,P<0.01）是TLS发生的独立危险因素。结论：接受BCMA靶向的CAR-T细胞治疗的复发/难治MM患者具有较高的TLS发生率,高血肌酐水平和严重CRS是TLS的主要危险因素,临床可通过降低血肌酐、控制CRS严重程度预防TLS的发生。     

参红补血颗粒对气滞血瘀型血管内皮功能障碍小鼠血管内皮的保护作用及其机制

目的 探讨参红补血颗粒（SBG）对气滞血瘀型血管内皮功能障碍（VED）模型小鼠血管内皮的保护作用和对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）中Toll样受体4（TLR4）、髓样分化因子（MyD88）、核因子 κBp65（NF-κB p65）及细胞间黏附分子1（ICAM-1）蛋白表达水平的影响,阐明其相关作用机制。 方法 将60只昆明小鼠随机分为正常对照组、VED组、阳性对照组（0.62 g·kg^－1·d^－1 血府逐瘀胶囊）、低剂量SBG（3 g·kg^－1·d^－1）组、中剂量SBG（6 g·kg^－1·d^－1）组和高剂量SBG（9 g·kg^－1·d^－1）组,每组10只。除正常对照组外,其他各组小鼠采用冰水浴游泳法构建气滞血瘀型VED模型,连续给药造模21 d。观察各组小鼠行为表现,血液流变仪检测各组小鼠全血黏度,苏木精-伊红（HE）染色观察各组小鼠肺和胸主动脉组织病理形态表现,ELISA法检测各组小鼠血清血管性血友病因子（vWF）、血栓调节蛋白（TM）、ICAM-1、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素6（IL-6）水平,试剂盒检测各组小鼠血清一氧化氮（NO）水平和胸主动脉组织中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）及超氧化物歧化酶（SOD）活性。体外培养人脐静脉内皮细胞（HUVECs）,分为正常对照组,叔丁基过氧化氢（TBHP）组,低、中和高剂量SBG组,除正常对照组外,其他4组HUVECs采用TBHP诱导HUVECs建立氧化损伤模型,采用MTT法检测各组HUVECs存活率,Western blotting法检测各组HUVECs中TLR4、MyD88、NF-κB p65和ICAM-1蛋白表达水平。 结果 与正常对照组比较,VED组小鼠抓力值和自主活动次数明显降低（P<0.05）, 全血黏度明显升高（P<0.05）; 与VED组比较,阳性对照组和低、中及高剂量SBG组小鼠抓力值均明显升高（P<0.05）,小鼠全血黏度明显降低（P<0.05）,阳性对照组和高剂量SBG组小鼠自主活动次数明显升高（P<0.05）。HE染色,与正常对照组比较,VED组小鼠肺组织出现明显的毛细血管扩张和淤血,并且组织伴有大量炎性细胞浸润;与VED组比较,阳性对照组和不同剂量SBG组小鼠肺泡壁毛细血管扩张和淤血的程度减轻,炎性细胞浸润数量明显减少,并呈剂量依赖性;与正常对照组比较,VED组小鼠胸主动脉内壁结构紊乱,出现缺损和脱落;与VED组比较,阳性对照组和不同剂量SBG组小鼠血管内膜的脱落损伤情况改善,内膜相对完整。与正常对照组比较,VED组小鼠血清vWF、TM、ICAM-1、TNF-α和IL-6水平明显升高（P<0.05）,血清NO水平以及动脉组织中GSH-Px和SOD活性明显降低（P<0.05）;与VED组比较,阳性对照组和高剂量SBG组小鼠血清vWF、TM、ICAM-1、TNF-α和IL-6水平明显降低（P<0.05）,血清NO水平以及动脉组织中GSH-Px和SOD活性明显升高（P<0.05）。与正常对照组比较,TBHP组HUVECs存活率明显降低（P<0.05）,HUVECs中TLR4、MyD88、NF-κB p65和ICAM-1蛋白表达水平升高（P<0.05）;与TBHP组比较,高剂量SBG组HUVECs存活率明显升高（P<0.05）,HUVECs中TLR4、MyD88、NF-κB p65和ICAM-1蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。 结论 SBG可通过抑制氧化应激,缓解炎症反应,达到保护气滞血瘀型VED小鼠血管内皮的作用。     

三维ResNet 网络预测肺腺癌结节亚型的效能及其 稳定性

目的:探究ResNet模型对肺腺癌不同亚型结节的分类表现及稳定性。方法:回顾性收集2014 年2 月—2020 年10 月期 间的364 例肺腺癌结节CT 影像数据,以7∶3 的比例分为训练集和内部测试集,将2020 年4 月到2020 年11 月的58 例结节数 据作为外部测试集。使用基于ResNet的三维卷积神经网络在训练集中进行训练以及调参,并使用内部测试集和外部测试集对 模型的准确性及泛化性进行评估。使用随机中心移动和掩膜处理的方式分别以内部测试集和外部测试集为基础构造新的测试 集,新数据集对模型进行测试验证模型的稳定性。结果:模型在内部测试集AUC 为0.949 1（95%CI:0.910 8～0.987 4）,模型在随 机中心移动以及掩膜处理之后的数据集的AUC 值分别为0.940 4 和0.918 1, 与其差异无统计学意义（P 值分别为0.425 3 和 0.239 3）。在外部测试集中模型AUC 为0.959 6（95%CI:0.901 2～1.000 0）,在用于稳定性测试的随机中心移动以及掩膜处理之 后的数据集中,模型所得AUC 分别为0.948 5和0.947 3,与其同样差异无统计学意义（均P>0.05）。结论:ResNet 模型对肺腺癌 结节亚型有优异的鉴别能力,并且具有一定稳定性。