染料木黄酮的抗巨噬细胞泡沫化效应及其分子机制研究

目的 研究染料木黄酮对动脉粥样硬化过程中巨噬细胞泡沫化的抑制作用,并探讨其抗泡沫化的分子作用机制.方法 采用体外ox-LDL诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7产生泡沫化,通过油红O染色观察细胞内脂质聚集程度判定细胞的泡沫化程度以及药物效应;利用报告基因细胞检测方法评价染料木黄酮对代谢性核受体过氧化物酶体增殖物激活受体PPAR和肝X受体LXR的转录调控功能的激动作用;利用实时定量PCR检测染料木黄酮对巨噬细胞中ox-LDL摄取以及胆固醇逆转运相关基因的mRNA水平.结果 ox-LDL处理的空白组小鼠RAW264.7单核巨噬细胞内聚积大量的脂质,而经过10 ug/ml染料木黄酮处理后的RAW264.7细胞内脂滴量明显减少,细胞泡沫化程度被大幅度降低.瞬时转染的细胞报告基因的转录激活效应研究结果说明,染料木黄酮对核受体PPAR和LXR均有较高的转录激活效应,其EC50值分别为3.5～9.2 μg/ml和1.6 ～ 3.3 μg/ml.定量PCR研究结果显示,染料木黄酮可以有效地使巨噬细胞中的胆固醇逆转运基因LXRα、LXRβ、ABCA1、ABCGl、和SR-B1的表达上调,而作为主要摄取ox-LDL受体的CD36基因的表达无明显变化.结论 染料木黄酮可以有效抑制动脉粥样硬化过程中巨噬细胞的泡沫化,而该作用机制可能是通过激活PPAR和LXR通路,上调胆固醇逆转运蛋白的ABCA1、ABCG1、LXRα、LXRβ、SR-B1基因的表达,增强了巨噬细胞的胆固醇外排,从而防止动脉粥样硬化的发生和发展.     

原发性亚临床肺癌12例

临床上无任何症状和体征的早期原发性支气管肺癌,可称为亚临床肺癌。本文报告经手术切除病理证实的12例临床资料,探讨其发现途径及诊断问题。临床资料本组男11例,女1例。年龄42～61岁,平均51岁。肿瘤发生部位,左肺上下叶分别为3、2例;右肺上中下叶为1、1、5例;发生在段支气管开口以下(周围型)10例,段支气管开口以上(中心型)2例。     

脑磁图和脑电图在癫痫诊治中的应用

目的:观察脑磁图、脑电图和磁共振检查在癫痫诊治中的应用,探讨脑磁图和脑电图的相关性。方法:选择38例经临床诊断的癫痫患者,已进行磁共振检查,并经脑磁图和脑电图发现异常放电。观察三种检查方法的定位符合率,比较影像检查与电生理检查的关系。结果:MEG与EEG定位完全一致的有18例(47．4％),定位基本一致(致少有1个叶定位一致)的有8例(21．1％)。EEG发现双侧放电的13例中,5例与MEG定位基本一致,而EEG单侧局灶放电的25例中,20例与MEG基本一致,EEG与MEG定位符合率在单侧局灶放电患者中高(P＜0．05)。MRI发现结构异常15例,与MEG和EEG定位均一致的有6例。结论:脑磁图和脑电图定位符合率约为68．5％。在单侧局灶放电中, MEG与EEG相结合可使致痫灶定位更加准确。     

闭胸式冠状动脉血栓和溶栓模型的制备——中孔合金珠法

<正> 冠状动脉血栓模型是研究急性心肌梗塞溶栓药物的重要条件,随着临床急性心肌梗塞溶栓疗法广泛应用,对溶栓药物的溶栓效果,希望有更为客观的评价方法.1980年,Romsond等提出,用开胸式冠状动脉微量直流电刺激法,可制备冠状动脉血栓模型,并被广泛应用.本文作者在建立闭胸式微珠法阻塞冠状动脉实验模型时发现,冠状动脉内有血栓形成,为此,拟进一步探讨可否在此基础上建立冠状动脉血栓模型,并且这种血栓模型是否也能作为急性心肌梗塞溶栓药物筛选实验模型.     

对肺癌普查的初步评价

云锡是肺癌高发区。本文分析云锡1974～1979年普查发现的原发性肺癌102例的诊断治疗资料,并与同期就诊部分病例对比,初步提示痰癌细胞和胸部X线片检查适用于肺癌高发区普查。虽然此二法各有其局限性,但可弥补彼此之不足。普查有可能早期发现、早期诊断,并为早期综合治疗肺癌创造有利条件,从而延长其生存期。     

支气管结石1例报告

支气管结石为少见疾病,今将我院遇到1例报告如下。毛××,男,54岁,坑下工人。慢性剧咳7年,咳黄稠痰、呼吸困难1年余。每经消炎和对症处理后好转,但维持时间不长。1976年4月7日当患者吸烟时突然剧咳不止并咳出结石一粒,随即咳出大量黄稠痰。随访两年多,自诉咳出结石后剧咳、咯痰、呼吸困难等自行缓解。体检:有杵状指     

抗HIV-1 gp120单链抗体基因的克隆及序列测定

人Ⅰ型免疫缺陷病毒(HIV-1)的外膜蛋白gp120在病毒的感染侵入过程中发挥重要的功能[1]。gp120的单克隆抗体在HIV-1感染的诊断和治疗中起着十分重要的作用[2],但鼠源性抗体因在人体内可产生较强的免疫原性,因此限制了它的应用。利用基因工程手段制备单链抗体ScFv可以克服鼠源单抗的这一缺点,又可进行大规模表达,因此具有重要的临床意义。本实验分离制备抗HIV-1gp120的单链抗体基因,为今后的进一步应用打下了基础。1材料与方法[3]1.1材料杂交瘤细胞株102,分泌抗HIV-1外膜蛋白gp120的单克隆抗体,由本室制备保存;各种内切酶及修饰酶均购自…     

抗A型产气荚膜梭菌α毒素mAb V_H和V_L基因的克隆与序列测定

用提取的Ａ 型产气荚膜梭菌α毒素包涵体为免疫原, 制备了１ 株ｍＡｂ ２Ｅ３ 。其Ｉｇ 亚类为ＩｇＧ３, 细胞培养上清和腹水的ｍＡｂ 效价分别为１∶１０２４ 和１∶１０８ 。该ｍＡｂ ２Ｅ３ 可中和α毒素的磷脂酶Ｃ 活性和溶血活性, 对α毒素致死性腹腔攻击的小鼠具有良好的被动保护作用。另外, 应用ＲＴＰＣＲ 技术, 从杂交瘤细胞株２Ｅ３ 中, 扩增出ｍＡｂ ＶＨ 和ＶＬ基因, 分别克隆至载体ｐＧＥＭＴ中。序列分析证实, ＶＨ 基因为３５７ ｂｐ, 编码１１９ 个氨基酸;ＶＬ 基因为３２４ ｂｐ, 编码１０８ 个氨基酸。计算机分析表明,ＶＨ 和ＶＬ基因均为新发现的基因序列, 符合功能性重排的鼠抗体可变区基因的特征。ＶＨ 和ＶＬ 基因分别属于鼠免疫球蛋白重链Ⅱ（ Ｂ） 和轻链κⅢ家族。     

抗A型产气荚膜梭菌α毒素mAb VHt VL基因的克隆与序？…

用提取的Ａ型产气荚膜梭菌α毒素包涵体为免疫原,制备１株ｍＡｂ ２Ｅ３。其Ｉｇ亚类为ＩｇＧ３,细胞培养上清和腹水的ｍＡｂ效价分别为１：１０２４和１：１０＾８。该ｍＡｂ ２Ｅ３可中和α毒素致死性腹腔攻击的小鼠具有良好珠被动保护作用。另外,应用ＲＴ－ＰＣＲ技术,从杂交瘤细胞株２Ｅ３中,扩增出ｍＡｂ ＶＨ和ＶＬ基因,分别克隆至载体ｐＧＥＭ－Ｔ中。