红细胞糖原的微量酶法测定及其初步临床应用

糖原累积病（ｇｌｙｃｏｇｅｎｓｔｏｒａｇｅｄｉｓｅａｓｅ,ＧＳＤ）是一组与糖原合成和分解代谢有关的某些特定酶的缺失或活力低下,导致糖原在不同组织异常储积而造成的疾病。微量酶法测定红细胞糖原含量,可以代替肝糖原测定,作为ＧＳＤ患儿的诊断手段,现报告如下...     

凋亡和坏死细胞的DNA含量分析和链缺口标记检测法

目的　以流式细胞术法简便、有效地检测凋亡和坏死细胞。方法　将热处理、喜树碱诱导和紫外线诱导的急性早幼粒白血病细胞株（ＨＬ６０） 细胞分别用碘化丙锭（ＰＩ） 摄入试验、亚Ｇ１ 峰法和ＤＮＡ 链缺口标记法（ＴｄＴ） 进行检测,并与对照组细胞进行比较,观察三种方法在凋亡和坏死细胞检测中的应用情况。结果　ＰＩ摄入试验显示,死细胞可大量摄取染料,ＤＮＡ 含量直方图上其相对荧光强度明显较活细胞高;凋亡细胞在经磷酸柠檬酸盐缓冲液（ＰＣ） 处理后,Ｇ１ 期峰前出现一额外亚Ｇ１峰而被识别,未经ＰＣ 处理的细胞难检测到凋亡;ＴｄＴ 标记时,坏死细胞平均荧光强度约为对照的３倍,而凋亡细胞荧光强度明显增加。结论　将ＰＩ摄入试验、亚Ｇ１ 峰法和ＴｄＴ 法结合起来,可有效检测凋亡和坏死细胞。     

流式细胞术的亚G_1峰法分析细胞凋亡的重新评价

目的重新评价亚G1峰 (Sub G1)在细胞凋亡研究中的应用 ,解决应用中存在的问题。方法采用Sub G1法荧光参数线性放大和对数放大法对 3种具有不同细胞周期特异性的细胞凋亡模式进行检测分析。结果 3种不同周期特异性细胞凋亡模式在经培养 3、6h的对数放大法分析 ,Sub G1峰均出现在 10 2 荧光道数处 ,且 6h较 3h明显增高。荧光参数对数放大法可避免Sub G1法中Sub G1峰与碎片峰两峰重叠 ,当TdT法清楚地显示凋亡细胞在细胞周期中的时相位置时 ,PC缓冲液的应用则可避免Sub G1峰与G1期峰重叠。结论流式细胞术分析典型细胞凋亡时 ,Sub G1法作定量分析应与对数放大法同步进行 ,才能有效地避免碎片峰与Sub G1峰重叠 ,而PC缓冲液的应用则避免Sub G1峰与G1峰重叠 ,更有效分析细胞凋亡。Sub G1峰应为对称的“高氏分布”图形 ,而不应为“针”形的均一倍性峰。     

深圳地区HBV感染者病毒前C区变异与病毒复制水平关系

HBV前C区基因变异可呈现不同的临床表现。为探讨HBV前C区基因变异与病毒复制及肝脏炎症活动度之间的关系,我们应用错配聚合酶链反应(PCR)——限制性片段长度多态性(RFLP)分析与荧光定量聚合酶链反应检测HBV DNA相结合,对深圳地区30例HBV感染者进行了研究。 1 材料和方法 1.1 病例来源 30例慢性HBV感染者系1996年6月～1997年5月我院门诊及住院病人。男性20例,女性10例,其中无     

血小板衍化生长因子-BB和碱性成纤维细胞生长因子对人牙周膜细胞增殖的影响

目的探讨重组人血小板衍生生长因子（rhPDGF）-BB和重组人碱性成纤维细胞生长因子（rh—bFGF）对人牙周膜细胞（PDLC）增殖的影响。方法原代培养人PDLC,应用甲噻唑四唑氮（MTT）比色和流式细胞仪检测rh-PDGF-BB和rh-bFGF单独及联合作用下细胞的增殖能力和增殖指数。结果rhPDGF-BB和rh-bFGF联合作用后,PDLC增殖能力提高,活性增强。其中,10μg·L^-1的rhPDGF—BB加10μg·L^-1的bFGF为最佳显效质量浓度,第3天为最佳显效时间。结论PDGF—BB和bFGF联合能更显著促进人PDLC的增殖并且具有明显的协同效应。     

白介素36与银屑病北大核心CSCD

白介素36（IL-36）是IL-1家族成员,由3个生物学功能相似的分子IL-36α、IL-36β及IL-36γ成,曾称为IL-1F6、IL-1F8、IL-1F9,2010年由Dinarello等人统一将其更改为现在的名称。     

泛发性脓疱性银屑病IL36RN突变研究

目的:研究达斡尔族IL-36Ra缺陷病(DITRA)一家系中IL36RN的突变情况。方法:2例患者分别为48岁和51岁同胞兄弟,家族中无类似疾病患者。以168例健康汉族人作为对照组,采用聚合酶链反应(PCR)扩增2例患者及其4例健康家族成员IL36RN基因的全部外显子及其侧翼序列并测序。结果:例1系婴儿期发病,发病时皮疹泛发全身,病情重;例2系50岁发病,皮疹局限于躯干,病情较轻。2例患者均发生了IL36RN c.1 15+6TC纯合突变,4例健康家族成员该位点发生了杂合突变,168例对照组中有7例该位点发生杂合突变。结论:IL36RN c.115+6TC纯合突变可能是2例患者发生DITRA的原因。.     

乙型肝炎病毒前C区变异的临床意义

一、资料与方法 １．病例来源：３０例慢性ＨＢＶ感染者系我院门诊及住院患者。男２０例,女１０例,其中无症状ＨＢｓＡｇ携带者９例（ＡｓＣ组）;慢性乙型肝炎１２例 ＣＨＢ组）;慢性重型肝炎９例（ＣＨＦ组）,平均年龄３６．４岁（１３～５岁）。２１例行肝活检。肝炎分级分期按１９９５年北京传染病与寄生虫病学术会议修定标准。所选病例全部为ＨＢｓＡｇ（＋）抗－ＨＢｅ（＋）、及抗－ＨＢｃ（＋）。 ２．血清ＨＢＶ标志物：采用微粒酶联免疫法系统及试剂盒（Ａｂｂｏｔｔ,ＵＳＡ）。 ３． ＲＦＬＰ分析参照文献［１］进行。将前…     

慢性重型肝炎患者外周血单个核细胞内干扰素和白细胞介素的表达及意义

目的探讨慢性重型肝炎（ＣＳＨ）病人外用血单个核细胞（ＰＢＭＣ）内干扰素－γ（ＩＦＮ－γ）及白细胞介素－４（ＩＬ－４）的表达及其临床意义。方法常规分离ＰＢＭＣ,在ＰＭＡ、Ｉｏｎｏｍｙｃｉｎ、Ｍｏｎｅｎｓｉｎ的刺激下,采用流式细胞术（ＦＡＣＳ）,对１７例ＣＳＨ患者及１９例正常健康者ＣＤ４＋Ｔ细胞内ＩＦＮ－γ和ＩＬ－４的表达进行分析,并应用荧光定量聚合酶链反应检测ＨＢＶ ＤＮＡ含量。结果 ＣＤ４＋Ｔｈ１、 Ｔｈ２细胞在ＣＳＨ组分别为７．２％—２６．３％（平均１５％）和０、ｌ％—１０．９％（平均２．０％）,正常对照组则分别为２．２％—１１．９％（平均５．９％）和０．４％—３．９％（平均２．２％）;ＣＤ４＋Ｔｈ１细胞百分数两组间差异有显著意义（Ｐ＜０．０１）。荧光定量ＰＣＲ结果表明ＣＳＨ组中１３例ＨＢＶ　ＤＮＡ阳性,其ＨＢＶ ＤＮＡ的含量与ＩＦＮ－γ表达细胞百分数呈负相关。结论 Ｔｈ１细胞与肝脏的炎症活动明显相关,ＩＦＮ－γ的表达对ＨＢＶ复制可能具有一定的影响。     

毛细管柱气相色谱测定有机酸亚甲基单位值及其应用

应用毛细管柱(DB-1)气相色谱法,对临床上具有重要诊断价值意义的59种标准有机酸的亚甲基单位值(MU)进行了测算,并与填充柱(5％OV-1、4％OV-17)进行了比较,且通过毛细管柱气相色谱法对正常和异常儿童尿液有机酸进行了分析。结果显示:毛细管柱气相色谱法的准确性和可靠性高,稳定性和重复性好,优于填充柱,作者认为:该法可作为国内有机酸尿症化学诊断的主要手段。