NK细胞的抗肿瘤机制及其在肿瘤靶向治疗中的应用研究进展

自然杀伤(natural killer, NK)细胞是固有免疫的重要组成部分,可通过表面抑制性受体与激活性受体的协同作用活化后,直接识别杀伤肿瘤细胞;可分泌细胞因子募集树突状细胞(dendritic cells, DCs),促进DCs成熟,增强适应性免疫应答;可杀伤肿瘤干细胞(cancer stem cells, CSCs)与循环肿瘤细胞(circulating tumor cells, CTCs),维持肿瘤细胞休眠,抑制肿瘤转移。NK细胞具备独特的炎症趋向性,可响应肿瘤部位释放的细胞因子与趋化因子迁徙至肿瘤部位,使其在抗肿瘤靶向治疗中占据重要优势。因此, NK细胞载体、NK细胞膜包被仿生化载体和NK细胞外囊泡(NK cell extracellular vesicles, NKEVs)的肿瘤靶向治疗研究,受到越来越多的关注。本文将重点介绍NK细胞抗肿瘤作用机制及其在肿瘤靶向治疗中的应用研究进展。     

非诺贝特纳米混悬剂的生物利用度研究

目的:制备非诺贝特纳米混悬剂胶囊,分别在空腹和饱腹条件下,有大鼠灌胃非诺贝特纳纳米混悬剂,考察其体内吸收特性,并与市售微粉化非诺贝特胶囊进行对照,评价其相对生物利用度。方法:以高效液相色谱法测定大鼠灌胃给药前后的血药浓度。结果:与市售微粉化胶囊相比,在饱腹和空腹条件下,非诺贝特纳米混悬剂胶囊相对生物利用度分别达到136.45%和148.48%。结论:非诺贝特纳米混悬剂胶囊与市售微粉化胶囊相比,生物利用度较高。     

气流速度对粉雾剂在呼吸道沉降的影响

目的 :研究吸入速度对不同粒径粉雾剂在呼吸道沉降的影响。方法 :以硫酸沙丁胺醇为模型药物 ,用双冲程试验仪评价不同的气流速度对吸入型粉雾剂在模拟肺部的沉降量。结果 :粒径为 5 4～ 10 0μm的重结晶乳糖为载体的硫酸沙丁胺醇混合型粉雾剂 ,增加吸入速度 ,提高药物在肺部的沉积量 ;而乳糖、甘露醇为载体 ,喷雾干燥法制备的粒径为 0 .5～ 6.5 μm粉雾剂 ,增加吸入速度 ,药物在肺部沉积量基本不变直至下降。结论 :物理混合型吸入剂随气流速度的增加 ,药物在肺部的沉降量增加。含载体喷干型吸入剂 (0 .5～ 6.5 μm)中的药物在肺部的沉降量取决于载体 (如甘露醇 )和吸入速度 (如 3 0 L· min-1 )。     

壳寡糖硬脂酸接枝物纳米粒的制备及其体外释放

 目的考察阳离子型壳寡糖硬脂酸接枝物纳米粒的理化性质及其体外释放行为。方法酶解超滤分离得到低相对分子质量壳聚糖(壳寡糖),用碳二亚胺嫁接壳寡糖与硬脂酸,以芘荧光法测定该聚合物在不同pH水相中的临界聚集浓度。将接枝物分散于水相,形成接枝物胶团,用微粒粒度与表面电位测定仪测定胶团的粒径和Zeta电位。以促黄体生成素释放激素为模型药物,制备载药壳寡糖硬脂酸接枝物纳米粒,用透射电镜考察纳米粒形态,并进行纳米粒的理化性质和体外释放研究。结果凝胶渗透色谱法测得壳寡糖的重均相对分子质量为22.4×10³。接枝物的临界聚集浓度以及接枝物胶团的粒径和表面电位随分散相pH值的下降而增加。在不同pH的PBS溶液中,随着pH值的下降,载药纳米粒的粒径减少,Zeta电位上升,药物包封率提高。载药纳米粒的体外释放符合Higuchi方程,释放速率则随释放介质pH的下降而延缓。结论该壳寡糖硬脂酸接枝物可作为生物大分子药物载体,载药纳米粒的理化性质及体外释放受到分散介质及释放介质pH的影响,体外释放行为符合Higuchi方程。     

LHRH固体脂质纳米粒口服给药系统的研究

 目的考察以固体脂质纳米粒为载体包裹促黄体生成素释放激素的类似物(LHRH-A2)口服给药的可行性。方法采用溶剂扩散法制备LHRH-A2单硬脂酸甘油酯纳米粒(LHRH—A2 loaded monostearin solid lipid nanoparticles,LHRH-A2-MSLN),考察载药纳米粒的粒径、Zeta电位等理化性质;用HPLC测定药物的包封率及体外释放特性;以花(鱼骨)鱼(Hemibarbus maculates Bleeker)为模型动物,载药纳米粒经口灌给药后,分别测定鱼的受精率和催产率。结果LHRH-A2-MSLN的粒径为(284.1±103.6)nm,纳米粒Zeta电位为-(19.4±1.1)mV,HPLC测得药物包封率为63.4%。体外释放研究结果显示,LHRH-A2-MSLN在前8 h快速释放了纳米粒所载药物的26.8%,随后每天以1.9%的速率持续释放。体内药效学研究表明,50μg·kg^-1剂量的LHRH-A2-MSLN 口灌给药后,平均催产率46.5%,受精率90.5%。结论用溶剂扩散法制备得到的LHRH-A2-MSLN具有一定的口服有效性。     

A549细胞对壳寡糖及其纳米粒的摄取作用

目的研究壳寡糖及其纳米粒的A549肺上皮细胞摄取作用,探讨壳寡糖纳米粒作为药物载体的可能性。方法溶剂扩散法制备壳寡糖纳米粒,以A549肺上皮细胞评价壳寡糖及其纳米粒的细胞毒性,由荧光倒置显微镜、流式细胞仪研究A549细胞对壳寡糖及其纳米粒的摄取作用。结果壳寡糖及其纳米粒的细胞毒性均较低,IC₅₀分别为944.36和643.16 mg·L^-1。壳寡糖及其纳米粒的细胞摄取作用与其浓度及细胞孵育时间相关;在同一孵育时间壳寡糖纳米粒的摄取量比等浓度的壳寡糖增加0.49～13.9倍。结论壳寡糖及其纳米粒的细胞毒性较低。壳寡糖形成纳米粒后,可显著增加A549细胞的摄取作用。     

壳寡糖嫁接硬脂酸阳离子聚合物胶团的制备及其理化性质

目的考察阳离子型壳寡糖硬脂酸嫁接物胶团的理化性质及载药胶团的体外药物释放。方法以碳二亚胺为交联偶合剂制备壳寡糖硬脂酸嫁接物；芘荧光法测定该聚合物的临界聚集浓度，微粒粒度及电泳分析仪测定聚合物胶团的粒径和表面电位；以甲氨蝶呤为模型药物，考察胶团作为药物载体的可行性。结果嫁接物的临界聚集浓度为0.05 g·L^-1；去离子水中的胶团粒径为26.7 nm，表面电位为(55.9±0.1) mV；三聚磷酸钠修饰可使胶团粒径增加、表面电位降低、药物包封率增加；降低胶团溶液的pH值，可使胶团的粒径和表面电位上升，药物包封率下降，体外释药速度加快。 结论壳寡糖硬脂酸嫁接物胶团是一种良好的药物载体，其体外释药具有一定的pH依赖性。     

A549细胞对单硬脂酸甘油酯固体脂质纳米粒的摄取作用A549细胞对单硬脂酸甘油酯固体脂质纳米粒的摄取作用

目的考察单硬脂酸甘油酯固体脂质纳米粒(monostearin solid lipid nanoparticles，MSLN)经PEG2000修饰后，对A549细胞摄取MSLN及J774A1细胞吞噬MSLN的影响。方法采用溶剂扩散法制备MSLN，测定其粒径和zeta电位；以罗丹明B(Rhodamine B)为荧光标记物，研究A549细胞对MSLN的摄取作用和J774A1细胞对MSLN的吞噬作用。结果MSLN的细胞毒性较低，A549细胞对MSLN的摄取可快速接近饱和，其摄取百分率与MSLN在细胞外的浓度呈负相关。结论MSLN经PEG2000修饰，可显著抑制J774A1细胞对MSLN的吞噬，但可增加A549细胞对MSLN的摄取。     

脂质体对胰岛素经呼吸道吸收的影响

研究胰岛素经呼吸道吸收的可能性,评价脂质体对胰岛素经呼吸道吸收的影响。方法：选用糖尿病模型大鼠,以胰岛素皮下注射为对照(1IU／kg),采用气管插管给药技术,测定模型大鼠的血糖浓度,评价药效。结果：胰岛素溶液(1IU／kg)经呼吸道给药的相对生物利用度为79.30％,而胰岛素脂质体混悬液(1IU／kg)经呼吸道给药的相对生物利用度为95.83％。结论：胰岛素经呼吸道给药相对生物利用度高;而胰岛素脂质体经呼吸道给药,其生物利用度与皮下注射相当。