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121.
目的 设计并合成人TERT特异性的锤头状核酶(hammerhead ribozyme)基因并构建其真核表达载体.含有核酶靶基因hTERTcDNA保守序列的T载体pMD18-T-hTERT的构建.方法 运用计算机软件人工设计并合成核酶基因(RZ),将核酶基因克隆到真核表达载体pcDNA 3.1(+)中,重组子由BamH I和EcoR I酶切,琼脂糖凝胶电泳鉴定及DNA测序.RT-PCR法扩增目的 基因cDNA保守序列,与pMD-18进行T-A连接,重组子经菌液PCR及测序鉴定.结果 RZ人工合成后与pcDNA 3.1(+)连接,酶切电泳及DNA测序证实合成的核酶基因序列正确并已被准确克隆入pcDNA 3.1(+)的BamH I和EcoR I位点之间,命名为pcDNA 3.1-RZ.220bp的hTERT基因cDNA保守序列准确克隆于pMD18-T,命名为pMD18-T-hTERT.结论成功合成hTERT特异性的锤头状核酶基因并构建了该基因的真核表达载体,以及核酶靶基因的pMD18-T-hTERT载体. 相似文献
122.
目的研究蝎镇痛抗肿瘤缬精甘肽(analgesic-antitumor peptide,AGAP)中2个氨基酸残基对其镇痛活性的影响。方法利用已构建成功的2个突变体W38G和R58D,采用金属离子螯合亲和层析和阳离子交换层析方法对突变体蛋白进行纯化。采用小鼠醋酸扭体法测定两个突变体的镇痛活性。结果在大肠杆菌BL21(DE3)中实现了可溶性表达。采用金属离子螯合层析和阳离子交换层析方法获得了电泳纯样品。突变体W38G镇痛活性与未突变重组蛋白(recombinant analgesic-antitumor peptide from Buthus martensii Karschr,BmK AGAP)相同,突变体R58D镇痛活性降低。结论突变体与rBmK AGAP相比镇痛活性发生变化,说明所选取的突变位点对蝎镇痛抗肿瘤缬精甘肽的镇痛活性具有一定的调节作用。 相似文献
123.
目的比较持续负压引流及一次性负压引流球两种引流方式在颈淋巴清扫术后的引流效果并总结其护理要点。方法 254例口腔颌面部肿瘤颈淋巴清扫术后患者,随机分两组,一组采用一次性负压引流球引流,另一组采用持续负压引流,对比两组患者术后引流的临床疗效。结果一次性负压引流球组平均引流量明显高于持续负压引流组,有显著差异(P<0.01);两组患者发生皮瓣坏死无明显差别,并发症并无显著差异。结论持续负压引流与一次性负压引流球联合应用可以使伤口保持更持续有效的负压,使术后渗出物及时排出。 相似文献
124.
患儿女,18h,藏族,第二胎第二产,孕37周于2011年5月8日15:30顺产娩出,Apger评分1min 10分,5min 10分,因呼吸急促、口吐泡沫、便血,于5月9日18:30收住儿科。父母非近亲结婚,第1胎生后3d夭折,原因不明。入院查体:体温36℃,心率140次/min, 相似文献
125.
126.
目的 构建并鉴定绿色荧光蛋白为报告基因的pIRES2-EGFP-FUT7真核表达载体.方法 采用RT-PCR方法获得α1,3-岩藻糖基转移酶VII(FUT7)全长基因,克隆至pMD18-T Simple载体后,将FUT7亚克隆至pIRES2-EGFP表达载体并进行鉴定.结果 测序及酶切鉴定证明获得人全长FUT7基因,FUT7基因正确插入pIRES2-EGFP中.结论 成功构建了绿色荧光蛋白为报告基因的FUT7真核表达载体,为研究FUT7及其合成的糖抗原sLex在乳腺癌转移中的作用奠定了基础. 相似文献
127.
128.
129.