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目的 构建嗜肺军团菌鞭毛亚单位蛋白基因(flaA)的融合表达载体,并在原核系统表达,为进一步研究鞭毛亚单位蛋白的致病作用和免疫保护性提供前提条件.方法 以嗜肺军团菌1型DNA为模板,PCR扩增获得嗜肺军团菌flaA基因,与带有硫氧还蛋白基因(Trx)的高效原核表达质粒pET32a( )定向重组,构建重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),并经限制性核酸内切酶酶切鉴定、PCR和核酸序列分析后,以IPTG诱导表达Trx-flaA融合蛋白, 用SDS-PAGE及Western blot进行鉴定.结果 限制性核酸内切酶酶切鉴定、PCR和核酸序列分析表明,扩增出了嗜肺军团菌1435 bp的flaA基因,成功构建了重组质粒pET-flaA,SDS-PAGE及Western blot分析显示重组质粒pET-flaA在大肠杆菌中得到了高效融合表达.结论 成功构建嗜肺军团菌flaA基因重组质粒,并在原核系统中得到了高效表达. 相似文献
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我院1997-04~2003-03在腰麻下经尿道前列腺电切术治疗前列腺增生病350例,年龄46~89岁。其中心脑血管合并症124例(冠心病、心电图异常、心肌呈缺血性改变、心率失常、心肌梗塞、脑溢血后遗症),占35%;呼吸系统合并症61例(慢支、肺气肿、哮喘),占17%;糖尿病43例,占12%;其它(强直性脊柱炎、椎间盘突出症、颈椎病、帕金森氏病、老年痴呆症等)占10%。患者首选腰麻(蛛网膜下腔阻滞),穿刺成功后注入0.75%布比卡因2ml加10%葡萄糖1ml,共3ml。常规检测血压、心电图、脉搏氧饱和度、鼻导管吸氧。结果,350例中,腰麻342例,因穿刺困难改为全身麻醉3例,改… 相似文献
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肠道细菌对天然药物代谢的研究进展Ⅱ 总被引:3,自引:0,他引:3
3.3 皂苷类化合物皂苷类化合物大都可以被肠道细菌水解。甘草甜素(Glycyrrhizin,GL )是欧亚甘草 (Glycyrrhiza glabra)浸出物的主要组份 ,可作甜味剂 ,同时还具有抗病毒、抗炎和固醇类作用。GL 在人肠道细菌作用下可从两个途径代谢 :主要途径是通过畸形菌体 J- 37(Bacteroides J- 37)和真细菌 GL H (Eu-bacterium sp.GL H)的 β-葡糖苷酸酶的作用 ,代谢生成甘草次酸 (18β- glycyrrhetinic acid,GA) [7] :次要途径是先在链球菌 L J- 2 2 (Streptococcus L J- 2 2 )的β- D葡糖苷酸酶作用下 ,GL 代谢生成 3-葡糖醛酸甘草次酸 (18… 相似文献
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目的克隆并检测嗜肺军团菌htpA基因在原核系统中表达情况,为进一步研究HtpA蛋白的免疫性能作必要的准备。方法采用聚合酶链反应(PCR)从嗜肺军团菌基因组DNA中扩得军团菌热休克蛋白A基因htpA,并将其定向克隆至原核表达载体pGEX-4T-1,构建原核表达重组质粒pGhtpA,重组子经限制性内切酶分析、聚合酶链式反应及测序鉴定后,转化宿主菌大肠杆菌JM109,IPTG诱导表达,产物进行SDS-PAGE电泳、免疫印迹分析鉴定。结果扩增出了291bp完整的htpA基因,构建了原核表达重组质粒pGhtpA,并检测到约36kDa的GST-htpA融合蛋白质表达条带。结论成功克隆了嗜肺军团菌htpA基因并使HtpA蛋白在原核表达系统中得到了有效的表达,为进一步研究其免疫学特性奠定了基础。 相似文献
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目的构建嗜肺军团菌热休克蛋白60(HSP60)基因的真核表达载体pcDNA3.1/HSP60,并对其进行鉴定。方法应用聚合酶链式反应(PCR)技术从嗜肺军团菌扩增得到HSP60基因,并将其克隆至载体pUC18进行序列测定。将重组质粒pUC18/LpHSP60中的目的基因亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+),构建重组子pcDNA3.1/HSP60,通过限制性内切酶酶切及PCR进行鉴定。结果克隆的LpHSP60基因序列与GenBank公布的一致性为98%,限制性内切酶酶切及PCR分析表明HSP60基因已成功插入pcDNA3.1中。结论成功构建了LpHSP60基因的真核表达载体,为进一步研究军团菌病HSP60基因DNA疫苗奠定了基础。 相似文献
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38.
低分子肝素钙治疗不稳定型心绞痛41例疗效观察 总被引:1,自引:1,他引:1
2001—10~2004—10应用低分子肝素钙治疗不稳定型心绞痛(WAP)41例,疗效较好,总结如下。 相似文献
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目的探讨口岸核与辐射监测处置标准体系现状并提出相应的建议。方法分析国际组织、有关国家以及我国核与辐射相关标准现状,提出完善我国口岸核与辐射监测处置标准体系的对策与建议。结果口岸核与辐射监测处置标准体系不完善,不能有效规范和指导口岸核与辐射有害因子监测处置工作。结论结合口岸工作实际,亟需建立完整、规范、有效的口岸核与辐射监测处置标准体系。 相似文献
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黄芪,为传统补气中药,其成分主要含有氨基酸、黄芪皂苷、多糖类及多种微量元素.现代药理研究表明,黄芪有增强机体免疫力、促进机体代谢、改善微循环、调整内分泌的作用,可以"使气旺以促血行、去瘀而不防正".黄芪在改善心血管功能、抗癌、抗衰老等方面有明显的药理作用,已得到广泛应用.近年来黄芪在抗缺血性脑损伤作用方面的有效性受到了极大的关注,现将黄芪抗脑缺血再灌注损伤的作用机制做一综述. 相似文献