抗人IgM单克隆抗体的制备及其特征研究

以人IgM作为抗原免疫Balb/C小鼠,采用杂交瘤技术获得5株分泌抗人IgM单抗的杂交瘤细胞株.通过酶联免疫吸附试验、免疫双向扩散试验证明:该组单抗仅与人IgM起反应,而不与其他各类免疫球蛋白反应。间接免疫荧光试验证明:该组单抗测得不同人群外周血淋巴细胞阳性数与用抗B细胞单抗和直接免疫荧光法测得的结果接近.免疫转印试验证明抗体作用的分子量为50～70kd(dalten法定单位为u,换算系数0.9921,下同).提示为IgM.本文还对单抗应用价值进行了讨论。     

应用酶联免疫吸附试验检测抗可溶性抗原单克隆抗体方法的探讨

本文以提纯冻存抗原和回收抗原包被40孔聚苯乙烯固相载体,采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测抗可溶性抗原杂交瘤上清液。比较了不同的封闭剂及其浓度对实验结果的影响。实验结果表明,应用回收抗原和提纯的抗原检测结果一致,可代替首次抗原进行检测,并节约试剂的用量。同时证明20％小牛血清-吐温磷酸缓冲液(FCS-PBS-T)作为封闭剂检测,效果较好,明显优于用1％BSA-PBS-T作为封闭剂。     

GRP78和GRP94表达与结直肠癌的侵袭及预后相关

目的 探讨结直肠癌组织中GRP78、GRP94的表达与患者临床病理参数及预后的关系.方法 应用免疫组织化学技术分析124例结直肠癌组织中GRP78、GRP94表达水平.免疫印迹法检测其蛋白表达水平验证免疫组化结果.将免疫组化检测结果与患者的临床病理特征及生存时间进行单因素及多因素回归统计学分析.结果 GRP78、GRP94阳性表达均定位于细胞质及少部分包膜,而临近的正常肠组织中少见阳性表达.免疫印迹法检测蛋白表达水平与免疫组化结果一致.单因素分析GRP78和GRP94蛋白表达在分化程度、分期、淋巴结转移及远处转移状态间差异有统计学意义.生存分析显示GRP78、GRP94蛋白高表达患者生存时间较低表达患者明显缩短,差异有统计学意义(P =0.025和P=0.010).多因素分析显示GRP94表达是结直肠癌的独立预后指标.结论 结直肠癌组织中GRP78、GRP94过表达可能与结直肠癌的发生、生长、侵袭、转移及预后相关,可认为是肿瘤进展和预后的客观指标.     

钝性尖端穿刺器开放建立气腹在腹腔镜结直肠癌手术中的应用

气腹的安全建立和套管的安全置入是腹腔镜结直肠手术的基础和前提.传统的Hasson开放气腹建立法需要缝线固定套管,存在气体泄漏的风险[1].江苏省肿瘤医院自2007年7月开始,对102例结直肠癌手术患者采用Autosuture钝性尖端穿刺器（blunt tip trocar,BTT;美国Norwalk CT公司）开放建立气腹通道,取得了满意的效果.现报告如下.     

医用直线加速器感生放射性冷却时间的检测

目的通过对医用直线加速器感生放射性的检测,研究感生放射性强度与冷却时间的关系。方法在加速器X射线能量分别为6MV、10MV和15MV时,利用射线巡检仪和451P巡检仪检测照射剂量为200cGy后0~30min内的感生放射性,对检测数据进行对比统计分析。结果随着加速器X线能量的增加,感生放射性的强度增大,冷却时间也相应延长。结论医用直线加速器感生放射性水平与X线能量和冷却时间有关。     

基于HIS的健康体检信息系统的设计与应用

通过介绍HIS的应用现状,对健康体检系统开发的必要性和应用前景进行了描述.通过临床应用,总结了该系统的工作流程特点、开发技术、系统内容及应用情况和应用效果,对系统的改进和发展方向提出了具体要求.     

患者安全目标:加强医学装备安全与警报管理

阐述医疗器械使用安全与警报管理的意义和内涵，分析医疗器械使用安全与警报的风险点，探讨建立医疗器械使用安全与警报风险防范体系的方案，列举了医疗器械使用安全与警报管理的实践案例。     

细胞表面抗原单克隆抗体的筛选

本文采用固定细胞ELISN,间接免疫光和SPA花环三种方法同时检测抗白血病细胞表面抗原单克隆抗体.结果证明固定细胞ELISA法阳性率最高.SPA花环法较低,间接免疫荧光法是筛选细胞表面单抗的最好方法. 采用双抗体夹心法检测杂交瘤上悬液中免疫球蛋白分泌情况。结果提示双抗体夹心法阳性者用三种筛选方法证明可为阴性.提示这种抗体可能是非特异性抗体.不与细胞表面抗原反应。     

CTLA4Ig修饰的树突状细胞在体外对淋巴细胞增殖及胞毒效应的影响

目的:探讨CTLA4Ig修饰的树突状细胞(DC)对T细胞增殖和细胞毒性T细胞(CTL)细胞毒活性的影响。方法:采用脂质体转染法,将质粒pG/CTLA4Ig转入DC。采用ELISA和SDS-PAGE鉴定转染质粒pG/CTLA4Ig的DC培养上清。以C57BL/6小鼠的单个核细胞作为反应细胞,以未修饰的DC及修饰的DC作为刺激细胞,共培养6 d,用MTT比色法检测细胞的增殖。用乳酸脱氢酶法和ELISA法,分别测定细胞毒活性及T细胞凋亡。结果:CTLA4Ig融合蛋白和修饰的DC,对同种细胞刺激的增殖反应有明显地抑制作用;而未修饰的DC可显著诱导淋巴细胞增殖反应。CTLA4Ig融合蛋白和修饰的DC,对特异性CTL的细胞毒活性有明显地抑制作用,且可诱导T细胞凋亡。结论:稳定表达CTLA4Ig融合蛋白的DC,对T细胞增殖和对CTL的细胞毒活性具有明显地抑制作用,并可诱导T细胞凋亡。     

次级淋巴组织趋化因子浓度梯度抑制肿瘤细胞免疫逃逸

目的探讨人次级淋巴组织趋化因子(SLC)浓度梯度对肿瘤细胞免疫逃逸的影响。方法根据SLC浓度梯度,实验分6组;流式细胞术检测肿瘤细胞HLA-Ⅰ类分子的表达、肿瘤细胞凋亡,Western blot检测肿瘤细胞胞内BCL-2表达,ELISA检测肿瘤细胞培养上清中生长转化因子β(TGF-β)水平。结果在一定浓度范围内,随SLC浓度增加,肿瘤细胞的HLA-Ⅰ类分子表达增高,肿瘤细胞凋亡增多;BCL-2表达增高,而肿瘤细胞TGF-β分泌水平降低。结论SLC具有抑制肿瘤细胞免疫逃逸的作用。