飞行员载脂蛋白E基因多态性及与血脂关系的研究

目的了解飞行员载脂蛋白E(ApoE)基因多态性及与血脂的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性方法检测106例飞行员和98例健康对照者ApoE基因多态性,并用常规方法测定其血脂水平。结果飞行员与健康对照人群的ApoE基因型及等位基因频率分布无显著差异。飞行员的高脂血症患病率明显高于对照人群。ApoE基因多态性与血清总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)相关,且TC和LDL-C的水平与ApoE基因型的关系为E4/X>E3/3>E2/X,而三酰甘油(TG)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)在各基因型间无差异。结论ApoE基因多态性是影响飞行员个体间血脂水平差异的独立遗传因素,飞行训练强度高,体力消耗大,时常暴露在精神紧张、高负荷飞行作业以及高热量高脂饮食等环境因素可能是引起飞行员高脂血症的重要作用因子。     

MRI在乳腺癌诊断中的应用

由于乳腺癌的发病率迅速上升，目前居于女性恶性肿瘤的首位，其检出与防治日益受到重视，常规检查已不能很好地满足其要求。近年来，MR设备的改进、技术的提高，不仅为疾病的影像学诊断提供了丰富的形态学信息、而且通过动态增强扫描进一步揭示病变的血流动力学特征，对其定性有更可靠的依据。     

γ干扰素基因转移的肿瘤细胞克隆株建立及其体内外生长特性的研究

本文构建了正向连入人ＩＦＮ－γｃＤＮＡ片段的重组表达质粒ｐＭＡＭｎｅｏ－γ－ＩＦＮ，大量提取纯化后，以Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ为介质将其转染胃癌细胞７９０１中，Ｇ４１８抗性筛选出阳性克隆后，地塞米松诱导其分泌ＩＦＮ－γ，经ＩＦＮ－γ活性测定选出高分泌ＩＦＮ－γ的细胞株ＲｐＭ７９０１７＃（１７２５ＩＵ／ｍｌ），并经Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ证实人ＩＦＮ－γｃＤＮＡ基因确已导入该细胞中。在体外培养过程中，地塞米松诱导前的ＲｐＭ７９０１细胞与转染了对照质粒ｐＭＡＭｎｅｏ的细胞ｐＭ７９０１及野生型７９０１细胞在形态、生长能力等方面皆无明显差别，而经诱导后分泌ＩＦＮ－γ的ＲｐＭ７９０１细胞变得粗糙，胞内颗粒明显增多，有些细胞增大，胞质出现空泡，乃至死亡，细胞生长曲线显示其增殖能力显著减弱，细胞增殖缓慢，且在软琼脂培养中基本不生长。裸鼠体内接种显示，高分泌ＩＦＮ－γ的ＲｐＭ７９０１细胞在致瘤原性上显著低于野生型７９０１细胞及ｐＭ７９０１细胞。结果提示，克隆高分泌ＩＦＮ－γ的肿瘤细胞可用于制备新型瘤苗，探索用于肿瘤的基因治疗。     

用逆转录聚合酶链反应分析北京地区不同人群丙型肝炎病毒基因型

为了解北京地区HCV感染的基因型及基因型与各种肝病的关系。利用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测了220例北京地区不同人群血清中HCVRNA，对43例阳性患者的PCR产物用限制性片段长度多态性（RFLP）进行分型，结果：40例（93.0%)为Ⅱ型感染，2例（4.7%)为Ⅲ型感染，1例（2.3%)为Ⅱ/Ⅲ型混合感染，表明北京地区以HCVⅡ型感染为主。     

用逆转录-聚合酶链反应检测+GZ重复暴露大鼠脑组织c-fos和c-jun基因表达

目的了解＋ＧＺ重复暴露后大鼠脑组织ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｊｕｎ基因表达的变化，探讨＋ＧＺ引起脑损害的分子机制，为＋ＧＺ防护研究提供实验依据。方法２４只雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分成对照组、＋ＧＺ重复暴露后３０ｍｉｎ、６ｈ和２４ｈ四组，每组６只。对照组大鼠Ｇ值为＋１ＧＺ，实验组大鼠在动物离心机上经历了３次＋１０ＧＺ／３ｍｉｎ（两次间间隔３０ｍｉｎ）作用。分别于暴露后３０ｍｉｎ、６ｈ和２４ｈ处死大鼠取脑，提取总ＲＮＡ，用建立的反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）定量检测方法检测大鼠脑组织ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｊｕｎｍＲＮＡ表达水平。结果＋ＧＺ重复暴露后３０ｍｉｎ大鼠脑组织ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｊｕｎｍＲＮＡ明显升高，分别是对照组的２．８倍和１．５倍，但６ｈ和２４ｈ时恢复正常。结论＋ＧＺ重复暴露可诱发大鼠脑组织ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｊｕｎｍＲＮＡ的表达，这种表达快速且短暂，在＋ＧＺ所致脑损害的病理过程中起一定作用。     

定量聚合酶链反应检测HBV感染患者血清HBV DNA的临床意义

目的：探讨急、慢性乙型肝炎及与HBV感染相关的肝硬变和肝癌患者血清HBVDNA含量及其与乙型肝炎病毒血清标志物（HBVM）在反映体内病毒复制方面存在的差异，进一步评价HBVM的临床意义，以及肝炎活动时，肝脏损害与血清中HBVDNA含量的关系。方法：采用信号引物能量转换定量聚合酶链反应（PCR）检测104例不同HBV感染患者血清HBVDNA含量。结果：不同HBV感染患者HBV含量范围在104.49～109.93拷贝／毫升，其中急性乙肝含量（106.231±0.758）显著低于慢性乙肝（107.774±1.281），乙肝后肝硬变（107.861±0.970）和原发性肝癌患者（108.035±1.501）的含量（P＜0．05和P＜0．01；HBeAg（＋）患者的含量（108.145±1.091）显著高于HBeAg（－）／抗-HBe（＋）患者（106.900±1.247）的含量（P＜0．001）；相关分析显示：血清HBVDNA含量与血清ALT水平无明显相关。结论：HBV感染的慢性化可能与血清HBVDNA含量高有关，HBV感染患者的肝损伤与血清HBVDNA含量无明显关系；e系统血清转换后，HBV并未停止复制，只是复制水平降低，应用定量PCR检测血清HBVDNA含量有助于HBV感染患者预后的判断和重新评价HBV感染的自然史及HBVM的临床意义。     

反义技术及其在基因治疗中的应用

反义技术是近年来国内外抗病毒、抗肿瘤研究和基因调节研究的中心课题之一，已经取得了很大进展和成就。反义技术作为抗病毒和抗肿瘤等基因治疗的有力武器已被越来越多的学者所认识和应用。本文就反义技术及其在基因治疗上的应用和前景作一介绍。反义技术的原理和研究途径自从1953年Watson和Crick发现DNA的双螺旋结构以来，基因表达的分子生物学进展迅速。目前已经明确基因和蛋白质之间的线性关系，即蛋白质中氨基酸序列的变化受基因的支配，基因中核苷酸序列的变化导致蛋白质结构的变化。基因表达就是指基因转录成mRNA及mRNA翻译成蛋…     

华支睾吸虫与东方次睾吸虫的囊蚴分离脱囊及感染动物的观察

观察了华支睾吸虫与东方次睾吸虫的囊蚴分离、脱囊及感染动物。用含盐酸量不同的胃蛋白酶人工消化液分离鱼体内的吸虫囊蚴,发现含盐酸量高的人工消化液分离囊蚴的效果较好,表明胃蛋白酶在酸性条件下更能充分发挥其作用;同时脱囊试验提示,盐酸含量不同对囊蚴本身的的存活力并无直接影响。采用新鲜猪胆汁代替胆汁粉配制人工脱囊肠液,对分离后第9、29天的囊蚴进行脱囊试验,两种囊蚴经35℃30分钟、60分钟其脱囊率均为100％。     

三对引物同时PCR检测大肠杆菌的方法及在分子流行病学研究中的应用

在大肠杆菌（ETEC）肠毒素基因内合成三对引物，建立了三对引物同时PCR检测ETEC的方法，一次PCR即可扩增出627bp(LTh),240bp(STIa)和169bp(STIb)三种肠毒素基因片段，可同时鉴别LTh,STIa,STIb,LTh-STIa,LTh-STIb五种基因型的ETEC，与非ETEC对照菌无交叉反应，最小检出量为10cfu，显示了很高的特异性和敏感性，摸索出一种简便的腹泻粪便标本处理方法，并应用于山东省六县市ETEC感染的初步调查，为国内ETEC腹泻的分子流行病学研究提供了基本数据和较先进的诊断工具。