广东省2013年副溶血弧菌暴发与散发菌株的病原学特征

目的 了解2013年广东省副溶血弧菌暴发与散发分离株的血清型别、抗菌药物耐药性、毒力基因携带情况以及分子分型特征.方法 对36株暴发分离株和43株散发分离株进行血清分型、药敏试验以及耐热直接溶血毒素基因(tdh)、耐热相关溶血毒素基因(trh)、GS-PCR和orf8基因的PCR检测,并进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型.结果 36株暴发分离株全部为O3:K6血清型,43株散发分离株的优势血清型为O3:K6型(23株,53.49%).药敏检测结果显示,对氨苄西林(96.20%)和头孢噻吩(40.50%)的耐药率较高;对复方新诺明和氯霉素则高度敏感,敏感性均为100%.多重耐药分析显示,83.33%(30/36)的暴发分离株同时耐受≥3种抗菌药,37.21%(16/43)的散发分离株同时耐受≥3种抗菌药物.毒力基因PCR检测显示,36株暴发分离株均为tdh⁺tdh^-型菌株.86.05%(37/43)的散发分离株为tdh⁺tdh^-型菌株,11.63%(5/43)为tdh^-tdh⁺型菌株,仅1株为tdh⁺tdh⁺型菌株.暴发分离株全部携带GS-PCR和/或orf8基因,51.16%(22/43)的散发分离株携带GS-PCR和/或orf8基因.PFGE显示,79株副溶血弧菌经NotⅠ酶切后的PFGE图谱可分为3个聚类,32种PFGE型别,相似值为59.8%～100.0%.暴发菌株聚集在同一个聚类中,散发菌株散布在各个聚类中.结论 2013年广东省副溶血弧菌优势血清型为O3:K6型,菌株对多数抗菌药物仍然比较敏感,但存在多重耐药现象,多数菌株携带tdh基因,大部分O3:K6型菌株携带GS-PCR和/或orf8基因;PFGE结果提示广东省副溶血弧菌存在遗传多样性.     

惠州市腹泻患者非伤寒沙门氏菌监测结果分析

目的了解我市非伤寒沙门菌的流行基线,早期识别暴发疫情,分析流行因素,掌握我市在腹泻病人中分离的非伤寒沙门菌株的血清型别、分布、耐药性变化情况,指导临床用药。方法对2008—2009年惠州市监测医院的腹泻患者粪便标本进行非伤寒沙门氏菌检测,对分离到的菌株进行血清型、药物敏感性试验和脉冲场凝胶电泳（PFGE）分型。结果两年共监测腹泻患者430例,检出沙门氏菌19例,阳性率为4．42％。19株沙门氏菌分布于5个血清型,以鼠伤寒沙门氏菌及肠炎沙门氏菌为主,分别占47．37％和26．32％。大多数沙门菌对常用的头孢类和喹诺酮类抗生素敏感。结论沙门氏菌是重要的肠道病原菌,病菌经口进人体内而致病,应加强相应的食品卫生监督与健康教育,宣传个人卫生防护知识,切实预防沙门氏菌感染。     

广东省食物中毒暴发疫情中沙门菌和金黄色葡萄球菌自动化核糖体基因分型研究

目的 为了解广东省常见食源性致病菌沙门菌和金黄色葡萄球菌（金葡菌）的遗传物质多态性特征,探索其鉴定及溯源方法。方法运用自动化核糖体基因分型系统,用EcoRⅠ酶或PvuⅡ酶,对广东省分离的沙门菌和金葡菌进行分子分型研究。应用BioNumerics软件比对不同来源、时间和地点的分离株,分析菌株间的相关性。结果使用PvuⅡ酶对32株沙门菌酶切,分为19个核糖体型,使用EcoRⅠ酶对14株沙门菌酶切,分为2个核糖体型。使用EcoRⅠ酶对49株金葡菌酶切,分为31个核糖体型,表现出较大的遗传多样性。结论 自动化核糖体基因分型能有效鉴定沙门菌和金葡菌。沙门菌血清分型与Ribotyping分型无高度相关性,但两者结合,能更有效鉴定菌株间的亲缘关系,确定食物中毒的来源和传染途径。     

广东省48株脑膜炎奈瑟菌对5种抗生素体外抗菌活性分析

[目的]调查广东省脑膜炎奈瑟菌（Nm）对5种抗生素的体外敏感性，以了解广东省脑膜炎奈瑟菌的耐药性并指导流脑防治工作。[方法]采用Etest法测定从各种标本中分离到的48株脑膜炎奈瑟菌对5种抗菌素的最低抑菌浓度（MIC）。[结果]脑膜炎奈瑟菌对5种抗生素的体外药敏结果依次为：氨苄西林MIC90 0．047μg／ml、MIC50 0．032μg／ml；氯霉素MIC90 1．000μg／ml、MIC50 0．750μg／ml；利福平MIC90 G256μg／ml、MIC50 0．380μg／ml；磺胺异恶唑MIC90 G256μg／ml、MIC50 G256μg／ml；头孢三嗪MIC均〈0．016μg／ml。[结论]广东省脑膜炎奈瑟菌对氨苄西林、氯霉素、头孢三嗪的敏感率高，仍可作为临床治疗流脑的首选药物，而对磺胺异恶唑、利福平的耐药率高，其作为流脑首选的预防用药的传统地位受到了严重挑战。     

广东省2007年霍乱监测的病原特征分析

目的 分析2007年广东省霍乱弧菌分离株的病原学特征,比较不同地区流行优势菌型之间以及霍乱疫情分离株与常规监测分离株之间的克隆相关性.方法 对疫情与监测菌株进行常规生物分型,利用脉冲场凝胶电泳技术,分别对不同地区优势菌型稻叶型1d之间、霍乱疫情与常规监测中分离的相同型别菌株之间进行分子指纹图谱的相似性分析,探讨菌株间的相关性.结果 2007年从广东省霍乱疫情中获得31株菌株,共3种血清型,优势菌型为O1群稻叶型1d,不同地区病例的稻叶型1d菌株分子分型相似度在94.5%～100%之间;常规监测分离株16株,菌型分布散在,与疫情菌株的菌型分布一致性差,相同生物型的霍乱疫情与监测菌株同源性不高.结论 广东省2007年霍乱优势菌型稻叶型1d菌株为多克隆并存,显示为流行间歇期的特征.需利用分子分型技术开展分离株的分析,加强对流行的预警监测.     

快速诊断性DNA测序法鉴定致病性猪链球菌

目的尝试将诊断性DNA测序方法优化后用于猪链球菌的快速鉴定。方法5个来源于临床感染病例的可疑猪链球菌分离株,用诊断性PCR产物直接测序法分析其基因组上的16SrRNA,cps2J和mrp3个特征性靶基因的DNA序列;并对整个技术流程进行优化改进,缩短获得结果的时间。结果获得了5个可疑猪链球菌菌株的3个靶基因片段的DNA碱基序列;这5个菌株被扩增检测的基因区域,有相同的16SrRNA、cps2J和mrp基因片段,长度分别为336、437、520bp;将这3个靶基因片段序列上载到NCBI-BLAST服务器,与GenBank核酸序列数据库的已知序列进行比对分析,结果显示,该5个可疑菌株的被分析的3个靶基因片段与猪链球菌2型的同源性最高。优化后的方法在得到经过适当培养的纯菌后,在不超过7～8h内,就可以获得靶基因片段的DNA测序结果。结论该5个来源于临床感染病例的可疑菌株为血清2型猪链球菌;经优化改进的诊断性DNA测序方法可用于猪链球菌的快速鉴定。     

广东省食品中0157:H7大肠杆菌分离株的生化特征、毒力因子与耐药性的探讨

目的了解广东省食品中O157H7大肠杆菌分离株中生化特征、毒力因子的携带与耐药情况.方法采用免疫磁珠富集法进行O157H7大肠杆菌分离,对O157H7大肠杆菌分离株进行生化、噬菌体、血清学鉴定后,应用PCR技术检测其毒力因子,应用纸片法(K-B法)进行药敏试验.结果从277份样品中分离出2株O157H7大肠杆菌,总检出率为0.72%;对这2株O157H7大肠杆菌分离株进行PCR毒力因子的测定,其中1株为携带eaeA、Hly和SLT2毒力因子的强毒株,而另1株分离株未检出毒力因子.药敏试验结果显示,这两个O157H7大肠杆菌分离株对青霉素类、四环素类、磺胺类、喹诺酮类、大环内酯类5大类的部分抗生素有多重耐药性.结论广东省食品中存在O157H7大肠杆菌强毒株的污染.O157H7大肠杆菌多重耐药株的出现,提示应关注我国畜牧养殖业抗生素的使用情况.     

广东省和广西壮族自治区部分地区2014-2016年宋内志贺菌病原学特征分析

目的 了解2014-2016年广东省和广西壮族自治区部分地区宋内志贺菌暴发分离株及散发分离株的病原学特征。方法 对2014-2016年广东省和广西壮族自治区柳州市分离的14株宋内志贺菌暴发菌株和6株散发菌株进行抗生素敏感性试验和PFGE分析,并选择其中6株代表菌株进行全基因组测序,与NCBI上获取的51株国内外宋内志贺菌的基因组进行遗传进化分析。结果 抗生素敏感性检测结果显示,试验菌株对氨苄西林、四环素、庆大霉素、复方新诺明和萘啶酸有较高的耐药性,对阿奇霉素、氯霉素和亚胺培南完全敏感。PFGE分子分型显示,不同地区不同来源的分离株之间PFGE指纹图谱有很高的相似度（93.2%）,基于全基因组的遗传进化分析显示,广东省和广西壮族自治区柳州市的宋内志贺菌分离株同处在一个进化分支上,与来自韩国的菌株亲缘关系最为接近。结论 广东省和广西壮族自治区部分地区分离的宋内志贺菌对常用抗生素具有较高的耐药性,对阿奇霉素、氯霉素和亚胺培南有较高的敏感性。试验菌株之间具有相似的PFGE指纹图谱,遗传进化关系相近。     

基于微球液态阵列分子技术的沙门菌血清分型研究

目的 了解基于微球液态阵列分子技术对广东省腹泻病例沙门菌分离株的分型效果。方法 在微球液态阵列分子平台上应用SSA试剂盒对沙门菌人源株进行分子血清分型。结果 2010-2014年广东省人源沙门菌4 942株分为189种血清型,前100种血清型占所有菌株的98.08%（4 847/4 942）,其中98%可用SSA试剂盒完整分型;采用SSA试剂盒检测198株菌O抗原,可检出181株;用SSA检测H抗原的结果（98.32%,528/537）与传统血清凝集试验结果相符;fljB基因的符合率为93.09%（175/188）,fljB基因假阴性率为7.35%（9/134）,假阳性率为7.41%（4/54）;sdf基因和Vi基因符合率均为100%;用SSA试剂盒检测12株血清不能分型的沙门菌,有11株能成功分型。结论 SSA试剂盒能对96%以上的广东省人源沙门菌株进行分子血清分型,其结果与传统方法符合率超过98%。基于微球液态阵列分子技术的血清分型法比传统方法更具有高通量且快速的特点。     

一宗某收容所细菌性痢疾暴发的流行病学调查分析

1999年9月27日至10月12日,广东省某市收容所发生了一宗细菌性痢疾暴发。现将其流行病学特征分析如下:1　材料与方法11　流行病学资料参考《实用传染病疫情处理手册》设计个案调查表[1],到现场进行个案调查。资料来源于个案调查表。12　诊断标准与方法病例的诊断参照中华人民共和国国家标准ＧＢ16002-1995《细菌性痢疾、阿米巴痢疾诊断标准及处理原则》。数据处理采用ＳＰＳＳ80ｆｏｒｗｉｎｄｏｗｓ软件包。2　结果21　基本情况该收容所位于某市市郊的一座小山边缘,主要收容广东省各地转来的“三无”人员,人员流动量大、成份较复杂。此次疫…