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181.
目的为快速、高通量检测HBV"a"决定簇热点突变,制备基因芯片,并进行了初步应用。方法应用HBV基因保守序列设计PCR扩增引物,针对"a"决定簇突变设计简并探针,制备了检测126A、126S、144A、145R、145E、144A 145R和144A 145E突变的基因芯片。通过对质粒参考品或样本进行测定,以评价芯片的特异性、灵敏度、重复性和检测劣势株的能力,并对45例乙型肝炎患者的血清样本同时应用基因芯片和PCR产物直接测序法进行检测比较。结果所制备的基因芯片能特异性检测出质粒参考品,灵敏度为5×103拷贝/μl。同一样本检测10次,芯片内和芯片间变异系数均小于15%。当劣势株占HBV毒株10%以上时,基因芯片即可检出。芯片法测得45例样本中126A、126S-1和126S-2的阳性率(分别为46.67%、35.56%和24.44%)显著高于PCR产物直接测序法(分别为9.00%、4.44%和2.22%;P值分别为0.000、0.000和0.002),克隆测序验证了基因芯片法的特异性。结论基因芯片法可快速、有效地检测HBV特定位点突变株,为HBV突变的大规模筛查提供了方法。  相似文献   
182.
HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者血清HBV前C区的序列分析   总被引:2,自引:0,他引:2  
为了解HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者中HBV前C区突变株流行情况 ,本研究对 31例HBeAg阴性慢性乙型肝炎住院患者血清HBV前C区序列进行了分析 ,血清标本采自广西南宁市各大医院 ,按 2 0 0 0年全国第 10次病毒性肝炎和肝病学术会议修订的“病毒性肝炎防治方案”诊断。其中男性2 5例 ,女性 6例 ,年龄为 18~ 36岁。HBsAg、抗 HBs、抗 HBc、HBeAg和抗 HBe检测应由美国Abbott公司酶联免疫试剂盒 ;按常规法提取血清中HBVDNA ,并用美国Promega公司DNA试剂纯化 ;应用套式PCR扩增HBV…  相似文献   
183.
目的 评价b型流感嗜血杆菌结合疫苗(Hib-TT)安全性和免疫原性.方法 分别采用Hib-TT试验疫苗和对照疫苗3针免疫接种3~5月龄婴幼儿,观察疫苗安全性,并采用定量ELISA法分别测定免疫前、免疫后和加强免疫后血清特异性IgG抗体浓度.结果 实验疫苗和对照疫苗两组间不良反应总发生率(实验疫苗组为23.85%,对照疫苗组为31.40%)差异无统计学意义(x2=0.5,P>0.05),发热性总不良反应率分别为22.3%和31.3%,中、强发热反应率分别为3.67%和4.48%,差异无统计学意义;实验疫苗受试者局部红、肿、硬结等不良反应率为1.22%.实验疫苗3剂免疫后受试者血清抗Hib PRP IgG抗体平均几何浓度(GMC)为6.6786 μg/ml,对照疫苗组血清抗体GMC为7.5346 μg/ml,两组间抗体GMC差异无统计学意义(x2=0.147,P=0.702);加强免疫1剂后,实验疫苗组受试者血清抗体GMC从加强免疫前的2.6396 μg/ml上升为6.2044μg/ml.结论 实验疫苗接种3~5月龄婴幼儿具有良好的安全性.用间隔1个月、3剂次接种的基础免疫程序能诱导该年龄组受试者产生长期保护水平的血清特异性抗体,加强免疫1剂后能诱导机体产生免疫记忆反应.  相似文献   
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