登革3型病毒义乌流行株免疫原性研究

目的对2009年浙江省义乌市暴发流行的登革3型病毒进行系统进化分析并初步研究其E蛋白的免疫原性。方法 RT-PCR扩增义乌分离株全基因组,利用MEGA 4分别构建E及NS1区域核苷酸及氨基酸系统发生树,进行系统进化分析。构建重组质粒JESS-ywD3prM/E397JEV-pcDNA5,IFA及Western Blot检测E蛋白在293T细胞中的表达及分泌情况。将纯化后的分泌性E蛋白免疫BALB/c小鼠,通过ELISA、中和试验等方法对体液免疫进行测定。结果登革3型病毒义乌分离株与广州GZ1D3株及印度GWL-25株核苷酸及氨基酸序列同源性均达到99%以上;其分泌性E蛋白可以刺激小鼠产生登革特异性IgG抗体及针对同型病毒的中和抗体。结论义乌分离株属于登革3型病毒亚型Ⅲ,其分泌性E蛋白具有一定的免疫原性。     

大容量抗体库高通量筛选方法的研究进展

随着蛋白质组学研究的发展,抗体在疾病的诊断、治疗和基础研究上的作用越来越大,迫切要求发展高通量的抗体筛选方法.本文研究整理了最近几年在噬菌体抗体高通量筛选方法上的研究进展,对磁珠法、基于自动化工作站的普通ELISA法、膜法、微阵列芯片法和液相悬浮芯片法等高通量筛选方法进行了综述.     

在昆虫细胞表达汉坦病毒的核蛋白及其在血清检测中的初步应用

杆状病毒是应用广泛的真核表达系统 ,利用杆状病毒核多角体启动子 ,可以在昆虫细胞高效表达外源基因。由于在昆虫细胞中表达的蛋白可以进行翻译后修饰 ,是表达汉坦病毒结构的理想系统。我们用昆虫细胞分别表达了姬鼠型和家鼠型汉坦病毒的糖蛋白和核蛋白 ,并进行了检测抗体的研究。使用PCR分别扩增姬鼠型汉坦病毒A9株、家鼠型汉坦病毒L99株的M和S片段编码区序列 ,克隆到昆虫细胞表达穿梭质粒pAcUW5 1,在杆状病毒核多角体启动子控制下。将质粒转Sf9细胞 ,通过 3轮空斑筛选重组病毒 ,用Western blot和免疫荧光证实了这些基因在昆虫细胞得…     

中国大陆首例人感染高致病性禽流感病毒(H5N1)病例的实验室诊断

目的 对2005年10月湖南省湘潭市湘潭县发生的一名不明原因肺炎病例进行实验室检测,以确定导致该病例的主要病因.方法 采集病例呼吸道标本以及血清标本,对呼吸道标本利用分子鉴别诊断技术以及RT-PCR和实时荧光定量RT-PCR检测病毒核酸;通过血凝抑制试验以及微量中和试验检测血清中的特异性抗体.结果 该病例所有的呼吸道标本H5N1病毒特异性核酸及病毒分离均为阴性.红细胞凝集抑制及微量中和实验显示,恢复期血清较急性期血清H5N1特异性抗体阳转并且有4倍以上增高.结论 通过实验室检测结果分析,该病例为中国大陆第一例人感染高致病性禽流感病毒（H5N1）实验室确诊病例.     

3种邻位皮瓣修复头面部肿瘤切除术后皮肤缺损的疗效分析

目的 比较评价3种邻位皮瓣修复头面部肿瘤切除术后皮肤缺损的临床应用效果.方法 收集35例头面部肿瘤切除术后皮肤缺损患者,分别采用菱形皮瓣(15例)、双侧推进皮瓣(8例)和A-T皮瓣(12例)进行修复,并比较评价其临床效果.结果 术后所有皮瓣均成活,无感染坏死,创口一期愈合.术后随访1～2年,所有病例均未发现颈部转移和局部复发.2例患者术后出现抬头纹消失面瘫体征,菱形皮瓣中有2例患者术后眼部略有牵拉变形.菱形皮瓣在瘢痕平整度方面要明显优于双侧推进皮瓣和A-T皮瓣,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 邻位皮瓣修复头面部肿瘤切除术后皮肤缺损,患者功能和外形恢复较好,是头面部缺损修复重建的理想选择.3种皮瓣各有优缺点,术中需根据实际情况灵活选用.     

脾阳虚大鼠肝脾蛋白激酶C活性的实验研究

为探讨脾虚证时信号转导方面的改变,采用过度疲劳、饮食失节和苦寒泻下复合因素塑造大白鼠脾阳虚证模型,测定其肝脏和脾脏PKC活性。结果表明,脾阳虚证大白鼠模型肝细胞膜PKC活性明显下降(P<0.001),而健脾药主要提高脾细胞膜PKC活性(P<0.05)。提示健脾药可能通过激活脾细胞PKC活性而发挥免疫调节作用     

脾肾虚证与生物膜关系的研究进展

综述了近十余年来 ,脾肾虚证与生物膜关系的研究进展。脾肾虚弱 ,机体脂质过氧化反应增强 ,抗氧化能力减弱 ,膜流动性下降 ,钠泵活力降低 ,认为应以脾肾相关为切入点 ,积极开展脾肾两脏之间的横向比较研究 ,对脾肾虚证的客观化及抗衰老研究大有益处     

古代阴阳体质分类方法探析

阐述了《内经》以及后世医家的阴阳体质分类方法。指出阴阳分类法是《内经》分类法中比较成功的一种分类方法。后世医家继承了这种思想,并结合各自的临床实践,丰富和发展了阴阳分类法。《内经》中阴阳分类法又包括阴阳四分法和阴阳五分法。阴阳四分法根据阴阳之气胜衰的不同,将体质分为4种类型。阴阳五分法根据阴阳含量的多少,并结合个体的行为表现、心理性格及生理功能等将体质分为5类。后世医家提出了藏象阴阳分类法、阴阳属性分类法、阴阳虚实分类法和虚弱体质阴阳分类法等多种阴阳分类方法。这种阴阳分类的思想亦将深刻地影响着现代医家对体质的分类,并将会极大地推动阴阳分类法的发展,为临床实践服务。     

肝硬化患者血清lncRNA SNHG7表达变化及其与病情严重程度和预后的关系

目的 观察肝硬化患者血清长链非编码RNA(lncRNA)小核仁RNA宿主基因7(SNHG7)表达变化,并探讨其表达与病情严重程度和预后的关系。方法 选择肝硬化患者80例（观察组）,其中Child-Pugh分级：A级30例、B级28例、C级22例,同期体检健康的志愿者80例（对照组）。采集所有研究对象空腹外周静脉血,离心留取血清,采用实时荧光定量PCR技术检测血清lncRNA SNHG7表达。比较两组血清lncRNA SNHG7表达,不同Child-Pugh分级肝硬化患者血清lncRNA SNHG7表达;分析肝硬化患者血清lncRNA SNHG7表达与Child-Pugh分级的关系。肝硬化患者经规范治疗,病情好转出院。出院后定期随访6个月,预后不良23例、预后良好57例。采用多因素Cox回归模型分析肝硬化患者预后不良的危险因素。采用受试者工作特征（ROC）曲线分析血清lncRNA SNHG7表达对肝硬化患者预后不良的预测价值。结果 观察组血清lncRNA SNHG7相对表达量高于对照组（P<0.05）;随着病情程度加重,肝硬化患者血清lncRNA SNHG7相对表达量逐渐升高（P&...     

中药学术语规范化研究(1)

<正>本课题为"国家十一五支撑计划项目"的子课题,即"中药学术语"。本课题的研究目标与主要任务是按着中华人民共和国关于术语标准编写的要求和技术规范,起草"中药学术语"的国家标准征求意见稿(以下简称"征求意见稿")。本征求意见稿的编写,符合国家的现行法律、法规