肝细胞癌组织中HBx基因缺失型突变体真核表达载体的构建和鉴定

目的 构建缺失型突变体HBx-d382和HBx-d431真核表达载体.方法 以pGM-T/HBx-d382和pGM-T/HBx-d431质粒为模板,PCR扩增含Kpn Ⅰ和Apa Ⅰ酶切位点的HBx基因片段.双酶切后再与载体pcDNA3载体重组连接.重组质粒转化到大肠杆菌DH5a后,经酶切鉴定和DNA序列测定,筛选出重组pcDNA3/HBx-d382和pcDNA3/HBx-d431真核表达载体.结果 成功构建了重组pcDNA3/HBx-d382和pcDNA3/HBx-d431真核表达载体,经DNA序列测定与比对,重组前后HBx基因片段序列一致.结论 pcDNA3/HBx-d382和pcDNA3/HBx-d431真核表达载体构建成功,可为HBx基因缺失型突变体,特别是HBx-d382基因的生物学功能研究提供基因材料.     

乙肝病毒突变体HBx-d382 PCR检测方法的建立及临床应用

目的建立检测乙肝病毒突变体HBx-d382的PCR方法,探讨HBx-d382突变体在诊断HBV相关肝细胞癌中的应用价值。方法运用生物信息学和核苷酸合成的方法,设计和合成检测乙肝病毒突变体HBx-d382的特异性引物。采用PCR方法对82份HBV相关肝细胞癌病人血清、96份慢性HBV感染者血清和20份正常对照者血清中HBx基因进行检测。采用基因测序法对HBx基因进行分析,并与PCR结果进行比较。结果在慢性HBV感染者和肝细胞癌病人血清中,HBx-d382的检出率分别为2.1%与17.1%。与慢性HBV感染者相比,肝细胞癌病人血清中HBx-d382检出率较高(χ2=4.21,P0.05),且PCR检测结果与基因测序结果相符。结论肝细胞癌病人血清中存在乙肝病毒突变体HBx-d382,采用PCR方法检测HBx-d382突变体对早期诊断HBV相关肝细胞癌有一定的价值。     

日本血吸虫未成熟虫卵糖蛋白抗原生物学特性的初步分析

目的 分析日本血吸虫未成熟卵糖蛋白抗原的生物学特性。方法 利用SDS－PAEG、银染色、PAS及脂类染色对SIEA组分进行分析，并根据标准分子量迁移率Rf值，用半对数坐标纸绘图，测算各区带的分子量。结果 SIEA有10种糖蛋白分子，其分子量为101、97、91、87、77、74、66、62、56、50kDa；1条37kDa脂蛋白区带。结论 SIEA含有蛋白、糖蛋白、脂蛋白等抗原分子，可能在宿主的免疫应答中发挥不同的作用。     

乙型肝炎免疫球蛋白聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒抑制HBsAg、HBV DNA分泌的体外实验

Objective To investigate the inhibitive activities of hepatitis B immunoglobulin(HBIG)poly(butylcynaoacrylate)nanoparticles(HBIG-PBCA-NP)to hepatitis B surface antigen(HBsAg)and hepatitis B virus(HBV)DNA secretions using HBV infected cell model in vitro.Methods HepG 2.2.15 cells were cultured with media containing HBIG-PBCA-NP or HBIG for several days,or cultured with HBIG-PBC-NP and HBIG for 2 days and without HBIG-PBCA-NP and HBIG from day 3.The supernatants at different time points were collected for quantitative detection of HBsAg and HBV DNA.The comparisons between groups were done by variance analysis.Resalts Secretions of HBsAg and HBV DNA in supernatants of HepG2.2.15 cultured with 0.1-10.0 IU/mL of HBIG-PBCA-NP and HBIG were inhibited significantly compared with control group.HBsAg titers and HBV DNA levels in supernatants of HBIG-PBCA-NP group and HBIG group cultured with media without HBIG-PBCA-NP and HBIG kept decreasing at day 5 and 7,then rebounded at day 9 and 11.HBsAg titera in supernatants of 0.1,1.0,5.0 IU/mL HBIG-PBCA-NP group were all significantly different from those in HBIG group at day 9[(31.31±1.98)μg/L vs(40.62±2.99)μg/L,(23.79±1.31)μg/L vs(36.51±2.12)μg/L,(19.91±1.74)μg/L vs(33.03±1.65)μg/L;F=412.24,P＜0.01].Couclusion HBIG-PBCA-NP can inhibit secretions of HgsAg and HBV DNA in vitro,which is more effective than HBIG.     

彭祖文化是武夷山养生文化的集中体现

在武夷山,彭祖是一个家喻户晓、耳熟能详的神话人物,有关彭祖的文化遗迹更是随处可见。从某种意义上说,彭祖文化乃是武夷山神仙文化的代表和养生文化的集中体现。     

46例糖尿病并发急性心肌梗死病例分析

糖尿病（DM）并发急性心肌梗死（AMI）是糖尿病病人严重并发症之一，临床表现复杂、多变，容易误诊和漏诊，延误治疗。其并发症多，病发率高，预后差。现对1998年2月-2004年8月住院治疗的DM并发AMI病人46例，以及同期治疗的非DM的心肌梗死病人52例的临床资料进行了回顾性分析，并报道如下。     

血吸虫糖蛋白研究进展

有关血吸虫疫苗的研究迄今已有70余年的历史.90 年代中期WHO/TDR 选定了6 种曼氏血吸虫候选疫苗分子,它们是28kDaGST、97kDa 副肌球蛋白、62kDaIrv-5、28kDa磷酸丙糖异构酶(TPI)、23kDa表膜抗原和14kDa脂肪酸结合蛋白.但这些候选疫苗分子单独免疫尚不足诱导40%以上的免疫保护力.因而,对血吸虫疫苗保护性抗原及其效应机制的研究还需要进行大量的基础性工作.糖蛋白是血吸虫主要抗原物质,大量存在于童虫和虫卵阶段,在血吸虫免疫应答及免疫调节方面起着十分重要的作用.现已证明,血吸虫糖蛋白不仅可以诱导保护性抗体,亦可诱导封闭性抗体的产生[1].因此,研究血吸虫糖蛋白的结构、功能及免疫机制,可为血吸虫疫苗的发展提供新的策略.本文就血吸虫糖蛋白及其在疫苗研究中的进展概述如下.     

肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶及耐药性监测

目的 :对本院 2 0 0 1年 7月至 2 0 0 2年 5月收集到的 2 0 0株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中ESBLS阳性菌进行研究 ,了解超广谱 β -内酰胺酶的三种检测技术及其产ESBLS耐药现状。方法 :对2 0 0株肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌用VITEKAMS32测定ESBLS ,同时用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐纸片筛选法和确认法进行对照监测。结果 :仪器法、确认法、纸片筛选法检测ESBLS菌株阳性率分别为 18.97%、18.5 8%、16 .4 1% ,产ESBLS菌对大多数抗生素的耐药率显著高于非产ESBLS菌 ,且多重耐药显著 ,但对泰能均敏感。结论 :ESBLS菌阳性率高 ,耐药性强 ,耐药谱广 ,临床检验室应重视对其选择准确快速的检测方法     

乙型肝炎免疫球蛋白聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒抑制HBsAg、HBV DNA分泌的体外实验

Objective To investigate the inhibitive activities of hepatitis B immunoglobulin(HBIG)poly(butylcynaoacrylate)nanoparticles(HBIG-PBCA-NP)to hepatitis B surface antigen(HBsAg)and hepatitis B virus(HBV)DNA secretions using HBV infected cell model in vitro.Methods HepG 2.2.15 cells were cultured with media containing HBIG-PBCA-NP or HBIG for several days,or cultured with HBIG-PBC-NP and HBIG for 2 days and without HBIG-PBCA-NP and HBIG from day 3.The supernatants at different time points were collected for quantitative detection of HBsAg and HBV DNA.The comparisons between groups were done by variance analysis.Resalts Secretions of HBsAg and HBV DNA in supernatants of HepG2.2.15 cultured with 0.1-10.0 IU/mL of HBIG-PBCA-NP and HBIG were inhibited significantly compared with control group.HBsAg titers and HBV DNA levels in supernatants of HBIG-PBCA-NP group and HBIG group cultured with media without HBIG-PBCA-NP and HBIG kept decreasing at day 5 and 7,then rebounded at day 9 and 11.HBsAg titera in supernatants of 0.1,1.0,5.0 IU/mL HBIG-PBCA-NP group were all significantly different from those in HBIG group at day 9[(31.31±1.98)μg/L vs(40.62±2.99)μg/L,(23.79±1.31)μg/L vs(36.51±2.12)μg/L,(19.91±1.74)μg/L vs(33.03±1.65)μg/L;F=412.24,P＜0.01].Couclusion HBIG-PBCA-NP can inhibit secretions of HgsAg and HBV DNA in vitro,which is more effective than HBIG.