siRNA抑制外源绿色荧光蛋白在neuro-2a细胞株中的表达

目的：用RNAi技术抑制哺乳动物神经元中外源报告基因的表达，并探讨该过程中RNAi的时间及剂量效应，为利用RNAi技术研究神经元基因功能提供参考。方法：采用神经细胞来源的细胞系neuro-2a小鼠神经瘤细胞为模型，将外源绿色荧光蛋白（GFP）基因转染到neuro-2a细胞内，利用体外转录法合成siRNA，分为3个剂量组对其进行干扰。结果：Neuro-2a细胞可以被有效地转染，而且siRNA在neuro-2a细胞内可以有效发挥干扰作用。这种干扰作用呈现出一定的剂量效应。结论：RNAi技术可以成功用于neuro-2a细胞抑制基因的表达，这种对GFP表达规律及RNAi剂量效应的研究为利用RNAi技术研究神经元基因功能提供了一定的理论参考和依据。     

cTnI( 28-110aa)-linker-TnC融合蛋白基因的构建、表达及鉴定

目的构建及表达人cTnI（28-110aa）-linker-TnC融合蛋白。方法应用PCR技术从人心脏cDNA文库中扩增出cTnI（28-110aa）和TnC基因，通过引物设计在两者之间加上linker序列即编码19个中性氨基酸残基TS-（G4S）3-AC的序列，克隆PCR产物，并构建成pET28a-cTnI（28-110aa）-linker-TnC表达质粒，转化人大肠杆菌表达菌株BL21（DE3），用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（IPTG）诱导目的蛋白的表达，NTA树脂亲和层析纯化后检测其纯度和免疫反应性。结果成功构建了cTnI（28-110aa）-linker-TnC融合蛋白的基因，并在大肠杆菌中实现可溶性高表达，在摇瓶中的表达量为20mg／L．经一步NTA树脂亲和层析纯化，获得条带单一的目的蛋白，采用进口全自动免疫检测系统鉴定证实．目的蛋白有较高的免疫反应性。结论采用原核表达方法获得了具有高纯度和高免疫反应活性的cTnI（28-110aa）-linker-TnC融合蛋白。     

兔肾缺血再灌注损伤时TNF-α、IL-6和bFGF的变化及当归的影响

目的:探讨当归对兔肾缺血再灌注损伤的防治作用及其机制。方法:健康成年日本大耳白兔25只, 随机均分为假手术对照(control)组、单纯缺血再灌注(IR)组和缺血再灌注+当归(RAS+IR)组。在肾缺血1h再灌注48h后取肾组织作电镜检查, 并测血清肌酐(Cr)、肾组织肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)含量。结果:IR组肾组织变性改变显著, RAS+IR组病变轻微;IR组Cr、TNF-α和IL-6含量显著高于control组(P<0.05, P<0.05和P<0.01);RAS+IR组上述指标显著低于IR组。IR组bFGF含量显著低于control组(P<0.01), RAS+IR组bFGF含量显著高于IR组(P<0.01)和control组(P<0.05).结论:当归具有防治肾IR损伤的作用, 其机制可能与其对TNF-α、IL-6和bFGF等细胞因子的调控有关。     

雄黄对乳腺癌MCF-7/ADM细胞多药耐药的逆转及机制研究

目的　探讨中药雄黄对乳腺癌多药耐药细胞系 (MCF 7/ADM )的逆转作用及可能的逆转机制。方法　药物敏感试验采用四氮唑蓝 (MTT)比色法 ,细胞内药物浓度测定采用荧光分光光度法 ;基因表达水平检测采用RT -PCR法。结果　雄黄在 0～ 2 5 μg/ml浓度范围内对MCF 7/ADM细胞未见明显毒副作用 ;15 μg/ml、2 5 μg/ml雄黄逆转倍数分别为 2 0倍和 2 8倍 ,并能明显抑制mdr 1基因的转录水平。 结论　雄黄可以逆转MCF 7/ADM细胞的多药耐药性 ,并呈剂量依赖性 ;可能的逆转机制为下调mdr 1基因的表达     

Griffith精神发育量表在山西0-7岁儿童中的修订

目的:修订Griffith精神发育量表(0～7岁),并建立适合中国国情的常模。方法:采用对城市级别、年龄、性别、父亲职业等因素按比例分层随机抽样的方法,从山西省十二个城市共抽取了2022例0～7岁儿童,样本人群中上述几个因素的构成与山西省人口资料相吻合,由经过专门培训的测试员对抽样点当地的每个儿童进行单独测试,并填写测查量表。结果:年龄分组样本和总样本各分测验以及总发育商的均数都在100上下浮动,总发育商服从正态分布;项目分析显示,各分测验及总量表平均难度在0.5左右,鉴别指数0.62～0.78;对原量表个别项目的排序进行调整;测试者信度0.953,重测信度0.798～0.948,各分测验之间及分测验与总发育商之间相关系数在0.481～0.854之间,探索性因素分析的结果得到思维推理、知觉组织、意动因子三个因素,解释方差比率总计79.8%。结论:引进和修订后的Griffith量表具有较好的信度和效度,可用于评定儿童的智力水平,可以在山西省应用。     

吻合器痔上黏膜环切术与传统外剥内扎术的对比研究

目的 探讨吻合器痔上黏膜环切术(procedure for proplapse and hemorrhoids,PPH)的适应证、方法、临床应用价值.方法 总结41例PPH手术(Ⅰ组)和62例传统外剥内扎术(Milligan-Morgan手术)(Ⅱ组)临床资料,对手术时间、术后止痛次数、住院时间、术后并发症及住院费用等进行对比研究.结果 总的症状改善满意率分别为95%(Ⅰ组)及82%(Ⅱ组),除住院费用外,Ⅰ组其手术时间、术后止痛次数、住院时间明显优于Ⅱ组,并发症发生率除术后便血、早期大便失禁、早期排尿困难外,余无统计学意义.结论 PPH治疗Ⅲ°～Ⅳ°痔的近期疗效优于Milligan-Morgan手术,且具有安全、有效、手术时间短、住院时间少、恢复快等优点.     

抗心肌β1与α1受体自身抗体在糖尿病心肌病患者中的检测结果分析

目的探讨抗心肌β 1与α 1受体自身抗体是否与糖尿病心肌病发病有关.方法以合成的α 1受体和β 1受体多肽片段为抗原,应用酶联免疫吸附测定( ELISA)技术,检测 196例,其中糖尿病心肌病患者 46例, 2型糖尿病 52例,高血压无靶器管受损患者 58例及正常对照组 40例血清中抗 G蛋白偶联型α 1和β 1受体自身抗体.结果糖尿病心肌病组抗β 1和α 1受体自身抗体阳性率分别为 45.6%和 39.1% ,明显高于糖尿病无心肌病组的 17.3%和 17.3%,高血压组的 19%和 12.1%及正常对照组的 15%和 17.5%,差异有极显著性 (P<0.01).不同亚组糖尿病心肌病心功能分级抗β 1和α 1受体自身抗体阳性检出率比较,心功能Ⅱ、Ⅲ级者受体自身抗体阳性率分别 55.6%和 44.4%,而心功能Ⅳ级分别为 (1/10)10%和( 2/10) 20% 明显低于心功能Ⅱ、Ⅲ级者.结论免疫学机制可能参与糖尿病心肌病病理生理过程.     

三氧化二锑诱导急性早幼粒细胞白血病细胞凋亡的研究

目的 研究锑剂三氧化二锑（Sb2O3)对早幼粒细胞白血病细胞株NB4凋亡的诱导作用，以寻求早幼粒细胞白血病治疗的新方法。方法 采用细胞生长曲线，形态学及硝基四氮唑蓝（NBT）还原试验，判定NB4细胞的生长，分化及功能。采用细胞周期分析和DNA电泳研究细胞凋亡。结果 Sb2O3能诱导早幼粒白血病细胞凋亡，且具有时间，剂量依赖性。结论 Sb2O3能有效地诱导早幼粒白血病细胞凋亡，提示锑剂诱导细胞半亡的疗法，有望成为临床治疗早幼粒细胞白血病的新方法。     

CD3+木瓜提取物对ApoE基因缺陷小鼠血脂及炎性相关因素的影响

目的观察木瓜提取物对ApoE基因缺陷小鼠血脂水平、主动脉窦斑块中巨噬细胞活化及肿瘤坏死因子(TNF-α)水平的影响。方法30只雄性ApoE基因缺陷小鼠随机分为3组:对照组、低剂量组和高剂量组,低剂量组和高剂量组分别在基础饲料上添加5%和10%的木瓜提取物喷雾干燥颗粒,饲养16周后经小鼠眼眶静脉取血后处死动物,酶法测定血脂水平、采用免疫组化分析主动脉窦斑块中TNF-α的表达水平和采用免疫荧光反映斑块CD68阳性表达水平与巨噬细胞阳性表达率。结果低剂量组和高剂量组的血清TC和LDL-C显著低于对照组(P<0.05),木瓜提取物能显著下调斑块中TNF-α的表达水平以及减少巨噬细胞的阳性率。结论木瓜提取物降低了血清脂蛋白胆固醇水平(TC和LDL-C),减少了炎性因子TNF-α表达以及减弱巨噬细胞参与程度,预示其可能具有减缓动脉斑块发生发展的抗动脉粥样硬化作用。     

贵州白纹伊蚊对登革病毒易感性的研究

目的 用细胞、分子生物学技术进行贵州省白纹伊蚊不同地理株对登革病毒(DEN)易感性的研究。方法 采集贵州省9个地(州)市共计15个县(区)白纹伊蚊幼虫标本，饲养为成蚊；取羽化后3～5日龄期的贵州不同地理株白纹伊蚊，用不同型别的DEN分别经口连续感染3d，于首次感染后的4、7、10、14d收集感染成蚊标本；制备蚊悬液，碘化钠法提取RNA，用DENNS1基因区通用引物经逆转录．聚合酶链反应(RT-PCR)检测DEN核酸；蚊悬液接种C6／36细胞进行病毒分离，制作细胞抗原片，经间接免疫荧光法检测DEN抗原；同时感染白纹伊蚊海南株作为对照。结果 DEN1-4型国际参考株感染白纹伊蚊贵州省不同地方株，其感染比率分别为12／15、12／15、8／15和13／15。结论 白纹伊蚊贵州省不同地方株对DEN1-4型国际参考株普遍易感，表明贵州省具备引起登革热流行的条件。