抗白血病树突状细胞疫苗的制备

目的探索抗白血病异体树突状细胞疫苗的制备方法.方法从健康者外周血中诱生DC,用不同方法负载K562抗原(化学融合法,冻融抗原冲击法,肿瘤与DC共培养法),比较这些DC疫苗在递呈抗原激活T细胞增殖及杀伤功能方面的差异.结果从健康者外周血中可诱生出具有正常免疫表型和抗原递呈功能的DC.不同抗原负载方法致敏的DC均能激活T细胞特异性杀伤K562细胞.冻融抗原负载的DC能有效刺激T细胞增殖,其活化的CTL对K562的杀伤毒性最强.结论异体DC可有效递呈肿瘤抗原,激活T细胞杀伤肿瘤,冻融抗原负载的DC激活T细胞对肿瘤的杀伤最强,为今后临床DC疫苗的选择提供了实验依据.     

老年直肠癌临床特征及治疗的变迁

目的 了解近年来老年直肠癌临床特征及治疗的变迁。方法 回顾性分析10年间313例老年直肠癌患者的临床特征及治疗情况，对比第一个5年和第二个5年的临床特征及治疗方法的变迁。结果发病年龄后延，误诊率降低，早期病例增多；Dixon手术增多，辅助治疗由简单变为综合治疗方法；5年生存率明显提高，术后的复发率明显减低。结论 老年直肠癌发病年龄后延，误诊率降低，早期病例逐渐增多；治疗上更趋有效、合理。     

后程适形放射治疗Ⅲ期非小细胞肺癌

目的评价三维适形放射治疗对Ⅲ期非小细胞肺癌患者局部控制率和生存率的影响。方法26例Ⅲ期非小细胞肺癌患者先采用6／15MV X线常规外放疗DT38-40Gy，后采用三维适形放疗2．5—3Gy／次．1次／d，累计量70—74GY。结果1、2年生存率分别为69．2％、46．1％，1、2年局部控制率分别为88．5％、76．4％。结论后程三维适形放射治疗可提高Ⅲ期非小细胞肺癌患者近期生存率及局部控制率，并未增加毒副反应。     

探讨HBV X、TGF-alpha,c-myc及beta-catenin基因与高发区肝癌的相关性

目的　研究HBVX基因、TGF alhpa、c myc、beta catenin等癌变相关基因及 2 49密码子突变的p5 3蛋白在高发区肝细胞癌癌变发生及其恶性表型维持所发挥的作用。方法　以肝癌高发区启东的肝癌细胞株 770 1和 770 3标本作为研究对象 ,以PCR及DNA测序分析方法确定HBVX基因在细胞DNA水平的整合。以RT PCR及Western blot检测HBVX基因的转录与表达。用PCR RFLP方法确定 p5 3基因 2 49密码子的错义突变。应用免疫组织化学法分析TGF alhpa ,c myc ,beta catenin的表达。结果　 2株细胞在DNA水平都存在HBVX基因片断的整合 ,但未见完整的转录和蛋白水平表达。序列分析显示 2株细胞的HBVX基因的序列各有特异性 ,并存在 13 0、13 1密码子的热点突变。PCR RFLP分析说明 2个细胞株中p5 3基因 2 49密码子均属野生型。免疫组化显示 2株细胞中TGF alpha ,c myc和beta catenin蛋白均有显著的积累。 结论　本实验的结果显示HBVX基因对这 2株细胞恶性表型的维持并不存在必然的关联 ,而是 1种HBV感染的遗传标志。未见HBVX基因蛋白表达 ,可能由于X基因 3′端缺失变异所致。免疫组化的结果显示TGF alpha ,c myc和beta catenin蛋白的显著积累 ,说明多种癌基因的相互协同 ,可能与肝癌的发生、发展及恶性表型的维持相关联     

蛋白酶体抑制剂Z-LLL-CHO对人骨肉瘤细胞株MG-63作用的体外研究

目的　探讨蛋白酶体抑制剂Z LLL CHO对人骨肉瘤细胞株MG 63的作用 ,并探讨其作用机制。方法　将不同浓度的Z LLL CHO作用于骨肉瘤细胞株MG 63 ,采用荧光显微镜观察细胞形态改变、电镜观察细胞超微结构变化、MTT法检测细胞增殖活力、琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡、流式细胞仪分析细胞凋亡率及细胞周期改变。结果　Z LLL CHO可有效抑制MG 63细胞株的生长 ,并诱导细胞发生凋亡。凋亡细胞表现为浓染致密的颗粒块状荧光 ,胞核固缩、染色质凝聚并边缘化 ,DNA呈“阶梯状”排列的条带。流式细胞仪分析显示 ,Z LLL CHO在 1.0 μmol/L作用 2 4h、3 6h、48h后 ,细胞凋亡率分别为 5 .4%、2 0 .5 %、5 2 .7%。随药物浓度增高及作用时间延长 ,细胞周期被阻滞于G2 /M期。结论　蛋白酶体抑制剂Z LLL CHO可有效抑制人骨肉瘤MG 63细胞株的生长增殖 ,阻滞细胞周期及诱导细胞凋亡可能起重要作用。     

中性彗星分析法检测肿瘤细胞的放射敏感性

[目的]研究中性彗星分析法检测肿瘤细胞内在放射敏感性的可靠性和影响因素.[方法]人鼻咽高分化鳞癌细胞株CNE-1和人纤维肉瘤细胞株HT1080细胞,用6MV X线以0、100、200、300、400、600、800、1000cGy等不同剂量点照射,克隆形成法制定存活曲线,比较其放射敏感性的差异.然后进行两种细胞于600cGy照射后1、2、4、8h的中性彗星分析,以尾力矩为指标,动态检测不同时间点残留的DNA双链断裂,并与克隆形成分析结果相比较.[结果]克隆形成分析法显示CNE-1细胞的放射敏感性低于HT1080细胞,其2Gy照射后存活分数(SF2)和平均致死剂量D0值分别为0.397、0.331和1.898、1.287.两种细胞在照射后1、2、4h的中性彗星尾力矩分别为0.148±0.106、0.100±0.083、0.058±0.043和0.297±0.179、0.157±0.092、0.092±0.060,各时间点之间有显著性差异(P＜0.05),但差别逐渐减小;照射后2h和4h的尾力矩比值分别为0.637和0.630,与SF2比值和D0比值的倒数(0.834和0.678)较接近;两种细胞照射后8h的尾力矩比较差异无显著性.[结论]中性彗星分析法与克隆形成分析法的检测结果有确切的相关性,照射后一定时间内的残留DNA双链断裂有可能成为检测肿瘤细胞放射敏感性的指标.     

PTEN、p27~(kip1)、VEGF在子宫内膜癌中的表达及意义

 目的　探讨抑癌基因PTEN、p2 7kip1、VEGF在子宫内膜癌中的表达、意义及三者之间的相关性。方法　采用免疫组化SP法检测 32例子宫内膜腺癌 ,13例子宫内膜不典型增生和 10例正常子宫内膜石蜡切片中PTEN、p2 7kip1及VEGF的表达。结果　子宫内膜腺癌组织与子宫内膜不典型增生、正常子宫内膜组织比较 ,PTEN、p2 7kip1阳性表达率明显降低 ,差异有非常显著性 (χ2 =11.0 9,χ2 =9.4 6 6 ,P <0 .0 1) ,VEGF表达率明显增加 ,差异有非常显著性 (χ2 =2 1.2 5 3,P <0 .0 1)。PTEN表达与肿瘤分化、肌层浸润程度、淋巴结转移有关 (P <0 .0 5 ) ,与临床分期无关 (P >0 .0 5 )。在子宫内膜腺癌组织中 ,PTEN与p2 7kip1表达呈正相关 (r=0 .74 4 ,P <0 .0 1) ,与VEGF表达呈负相关 (r =- 0 .738,P <0 .0 1)。结论　PTEN、p2 7kip1的失表达与VEGF的过表达在子宫内膜腺癌的发生发展中起着一定的作用 ,PTEN与 p2 7kip1、VEGF的异常表达密切相关 ...     

宫颈鳞癌survivin与VEGF表达的相关性研究

 目的　探讨宫颈鳞癌发生发展中survivin表达及其与VEGF表达的相关意义。方法　采用免疫组化SP法检测 4 6例宫颈鳞癌 ,17例宫颈上皮内瘤样病变 (CIN)和 2 1例慢性宫颈炎组织中survivin、VEGF的表达水平。结果　从慢性宫颈炎组到宫颈癌组 ,survivin、VEGF表达率逐渐升高。宫颈癌组的survivin、VEGF阳性表达显著高于慢性宫颈炎组及CIN组 (P <0 .0 5 )。survivin表达与VEGF表达呈显著正相关 (r=0 .35 8,P <0 .0 5 )。结论　survivin在宫颈鳞癌组织中表达上调 ,与VEGF在宫颈癌的发生中可能存在协同作用。     

核因子-κB p65在宫颈癌组织中的表达及意义

 目的　探讨NF κBp6 5蛋白在宫颈鳞癌及宫颈腺癌组织中表达的意义。 方法　采用免疫组织化学方法 ,用NF κBp6 5单克隆抗体检测 6 4例宫颈鳞癌组织 ,6例宫颈腺癌组织 ,11例宫颈上皮内瘤样病变 (CIN)组织 ,16例慢性宫颈炎组织中NF κBp6 5的表达。 结果　NF κBp6 5在宫颈鳞癌和腺癌中的阳性表达明显高于CIN和慢性宫颈炎组织 ,有淋巴转移的癌组织中NF κBp6 5的阳性表达率高于无淋巴转移的癌组织。结论　NF κBp6 5蛋白在宫颈癌的发生发展中起重要作用     

鼻咽癌骨转移的发生及预后因素分析

目的分析鼻咽癌骨转移的发生和治疗因素.方法回顾性分析我院1990～1999年间初治的935例鼻咽癌患者骨转移的发生、疗效及对预后的影响.结果本组骨转移的发生率为10%.应用单因素分析发现1992年福州分期Ⅲ～Ⅳ期、T4、N2-3、AKP＞70为影响骨转移增加的因素,多因素分析发现仅N2-3、AKP＞70为影响骨转移增加的独立因素.通过生存率分析治疗手段对预后影响发现放疗 化疗组比单纯放疗组或单纯化疗组的中位生存期延长.结论N分期增高是鼻咽癌骨转移的高危因素,放射治疗加化疗有可能改善鼻咽癌骨转移的预后.