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11.
目的介绍一种简易、经济、高效的肝库普弗细胞分离方法,为研究库普弗细胞在肝病及全身性疾病中的作用提供细胞模型。方法参照国内外文献方法加以改良,采用前灌流液在体灌流肝脏后,再用Ⅳ胶原酶离体灌流消化,Percoll分离液行密度梯度离心分离库普弗细胞,贴壁培养;锥虫蓝测定细胞活度,并用荧光显微镜、免疫组织化学以及吞噬功能实验行细胞纯度鉴定。结果肝库普弗细胞的获得量为(5~10)×107/肝,细胞活度为90%以上,细胞纯度95%以上。贴壁后细胞呈典型的星型或三角型,免疫组织化学染色显示CD163(ED2)阳性,显微镜下可见细胞质内被吞噬的碳素颗粒。结论本方法简便、高效,不需要特殊的设备,便于推广使用;获得的细胞活度和纯度较高,可用于库普弗细胞进一步的实验研究。 相似文献
12.
肝癌细胞中PI3K信号通路对VEGF表达的影响 总被引：2，自引：0，他引：2
目的:研究磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)信号通路在肝癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达调控中的作用.方法: 体外培养高转移性人肝癌细胞株HCCLM3,分为对照组、PI3K特异性抑制剂LY294002浓度5μmol/L组,LY294002浓度10μmol/L及20μmol/L组,处理6小时后,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测VEGF mRNA表达的变化.结果: LY294002可使肝癌细胞HCCLM3的VEGF mRNA的表达下降,且这种抑制作用随着LY294002浓度增大而增大(P<0.01),呈现剂量移赖性关系.结论: LY294002可以抑制肝癌细胞株HCCLM3中VEGF的表达,肝癌细胞VEGF的表达调控受PI3K信号通路调控. 相似文献