卵巢切除对大鼠睑板腺雌激素受体亚型表达的影响

流行病学调查显示老年妇女干眼症患病率高达40%,提示干眼病的发生可能与绝经期妇女卵巢功能减退,雌激素水平降低有关[1].雌激素要发挥生物学效应,必须通过与靶组织上的雌激素受体结合才能完成.雌激素受体分为Erα和Erβ两种亚型.我们选择44例成年SD雌性大鼠采用免疫组织化学技术检测了睑板腺腺泡上皮的雌激素受体亚型表达,并探讨其临床意义.     

丹红注射液治疗急性脑梗死的疗效观察

目的观察丹红注射液治疗急性脑梗死的疗效。方法患者随机分为2组:治疗组(n=60)和对照组(n=55)。对照组仅用常规治疗,治疗组在常规治疗基础上加用丹红注射液治疗。结果治疗组有效率达86.7%.与对照组对比在统计学上有显著差异(P<0.01)。结论早期丹红注射液治疗急性脑梗死可明显降低血黏度,有利于脑梗死的恢复,减少复发。     

羊膜上皮细胞和羊膜间充质干细胞构建组织工程皮肤

背景：由于人胎盘来源的间充质干细胞具有多方面的优点,近年来已成为干细胞研究的热点。 目的：分析鉴定羊膜间充质干细胞和羊膜上皮细胞的生物学特性,探讨其作为皮肤种子细胞在三维气液培养构建组织工程皮肤中的应用情况。 方法：用胰酶胶原酶多步消化法获取羊膜间充质干细胞和羊膜上皮细胞,通过流式细胞术、反转录-聚合酶链反应和免疫荧光染色技术,鉴定两种细胞的表面分子标记、干细胞特性、与皮肤角质形成细胞的相似性,并利用两种细胞为种子细胞以鼠Ⅰ型胶原为基质进行三维气液培养。 结果与结论：①流式细胞术检测体外培养羊膜间充质干细胞和羊膜上皮细胞均高表达CD90、CD73、CD105,不表达造血干细胞标志CD34以及MHC-Ⅱ类分子HLA-DR。②反转录-聚合酶链反应检测到羊膜间充质干细胞表达干细胞特性基因CMCY和NANOG,羊膜上皮细胞表达干细胞特性基因CMCY和 KLF4,两种细胞均有干细胞特性。③反转录-聚合酶链反应检测羊膜间充质干细胞表达皮肤角质形成细胞特性基因K19、β1-integrin、K8,羊膜上皮细胞表达K19、β1-integrin、K5、K8,免疫荧光染色见羊膜上皮细胞表达与角质形成细胞增殖相关的的特性蛋白K14,说明羊膜上皮细胞与皮肤角质形成细胞更具相似性, 在特定条件下更易于分化为皮肤角质形成细胞。④利用两种细胞成功构建组织工程皮肤,苏木精-伊红染色切片显示其具有一定的皮肤结构,且羊膜上皮细胞发生了初步分化。以上结果说明羊膜间充质干细胞与羊膜上皮细胞通过三维培养构建人皮肤组织是可行的。     

Integrin β1在出生前后大鼠中脑黑质的表达

为了检测integrinβ1在出生前后大鼠中脑黑质的表达,并探索其在大鼠黑质神经细胞发育过程中的可能作用,本实验采用RT-PCR、Western blot和免疫组织化学染色方法,来测定胚龄(embryonic day,E)E16d、E18d、E20d的健康SD胎鼠及出生后1d(postnatal day1,P1)、P3d、P7d、P14d、P21d的健康仔鼠中脑黑质组织中integrinβ1的表达情况。RT-PCR和Western blot结果显示,在检测的各时间点,大鼠中脑黑质integrinβ1都有明显表达,且其mRNA和蛋白质水平变化一致。在E16时,integrinβ1mRNA和蛋白质出现高表达,此高表达一直持续到P7时;而至P14时,integrinβ1mRNA和蛋白质表达水平明显降低,且此低水平表达随发育而持续;P21时与P14时相比无明显差异。而免疫组织化学染色结果显示,在各时间点,大鼠中脑黑质一直有大量integrinβ1阳性细胞存在。在E16~P14各时间点,integrinβ1阳性细胞胞体逐渐增大,P21时与P14时相比,阳性细胞胞体大小无明显变化。而单位面积内integrinβ1阳性细胞数,在E16~P7各时间点无明显差异,但至P14时,单位面积内integrinβ1阳性细胞数则明显降低,且此降低随发育而持续,P21时与P14时相比无明显变化。以上结果表明,在大鼠中脑黑质发育过程中,integrinβ1在E16~P7期间持续高表达,而至P14~P21期间,其表达量明显降低。这种表达变化与大鼠发育期间黑质多巴胺(DA)能神经元的自然凋亡时程相一致,提示integrinβ1的表达与此期间黑质DA能神经元的凋亡有关。     

抗坏血酸体外诱导人胚胎生殖细胞向心肌细胞分化

目的 探讨抗坏血酸作为诱导剂诱导人胚胎生殖细胞(hEGC)体外分化为心肌细胞.方法 取5～10周人胚胎生殖腺嵴,进行组织块体外培养,用直接悬浮法使hEGC形成拟胚体(EBs),用不同浓度抗坏血酸的培养基对其进行诱导分化.然后取不同时间的细胞做免疫细胞化学染色,鉴定细胞的心肌特异转录因子GATA-4和心肌肌钙蛋白T(cTnT)表达情况.结果 抗坏血酸诱导hEGC分化为心肌细胞的最佳浓度为0.1 mg/ml,诱导第3周时分化率达(85.2±1.8)%,显著高于不添加任何诱导剂的对照组.诱导后细胞形态变成梭形,4周时细胞突起相互连接成条索状,且排列方向趋于一致;诱导后1周即开始出现GATA-4弱表达,第3周时表达最强;诱导后2周,细胞内开始表达cTnT,3周强阳性表达,4周表达明显增强.结论 抗坏血酸能够促进hEGC向心肌细胞分化,可用以建立体外诱导hEGC分化为心肌细胞的方法.     

利多卡因雾化吸入治疗重症喘息型支气管炎的疗效观察

慢性支气管炎（喘息型）患者在急性发作时,往往气急明显,重症者呈哮喘样发作,并有窒息感,需要积极治疗,迅速缓解症状。利多卡因雾化吸入可快速平喘,改善病情,且副作用小,简单易行,是抢救该类重症病人的一种有效方法。     

抗生殖免疫抗体与女性不孕的关系

在女性不孕症的病因中，目前认为免疫因素尤为重要。其中直接干扰生殖过程的抗生殖抗体有抗精子抗体(AsAb)、抗子宫内膜抗体(EmAb)、抗卵巢抗体(AovAb)、抗绒毛膜促性腺激素抗体(AhCGAb)和抗心磷脂抗体(AcA)等。本研究通过用免疫酶联吸附试验(ELISA法)，测定女性不孕症患者血清中抗生殖免疫抗体的含量变化，探讨与不孕症患者的关系，为临床上女性不孕症的诊断治疗提供理论依据。     

持续静注恬尔心治疗急性重症脑血管疾病

目的:探讨控制急重症脑血管病人的血压的治疗措施。方法:当患者血压>24/14kPa时,静注恬尔心10mg加生理盐水20ml,5min内注完,再将恬尔心50mg或100mg加少量生理盐水稀释至50ml,用微量静脉推注泵24h维持静注,剂量根据血压、心率变化调整,最大剂量20mg/h,持续最长者达16d,累计量大用量3850mg。结果:均能达到控制血压的目的。结论;持续静注大剂量恬尔心能有效控制急重症脑血管病时的高血压,且副反应小。     

人胚胎生殖干细胞移植及心肌再生

目的 探讨直接注射移植人胚胎生殖(EG)细胞对大鼠心肌梗死的影响.方法 40只SO大鼠经缝扎左冠状动脉前降支,建立急性心肌梗死(AMI)模型,分干细胞移植组和对照组.取5～10周人胚胎牛殖腺嵴,组织块体外培养,生物学鉴定证实为人EG细胞,将其直接注入大鼠急性心肌梗死区边缘.移植后1 d,1、2、4周处死大鼠,采用免疫组化法观察心肌形成转录因子Nkx 2.5在移植细胞的表达.结果 移植组鼠抗人细胞核抗体MAB1281检测刚性,心肌形成转录因子Nkx2.5在移植细胞阳性表达.结论 人EG细胞胞接注入移植大鼠心肌梗死处,细胞能存活并呈现向心肌细胞分化的表型.