Notch3-siRNA增强结肠癌细胞对托泊替康的化疗敏感性

目的：探讨下调Notch3表达是否可增强结肠癌SW620细胞对化疗药托泊替康（topotecan）的敏感性。方法：将Notch3siRNA转染到SW620细胞中,Westernblotting检测转染后SW620细胞中Notch3的表达水平。转染后不同时间加入托泊替康,MTr法检测SW620细胞的增殖;Hoechst33342染色和流式细胞仪检测SW620细胞的凋亡;Caspase-3活化试剂盒检测SW620细胞中caspase-3的活化。结果：Notch3siRNA转染可明显抑制SW620细胞中Notch3蛋白的表达;托泊替康作用于Notch3siRNA转染组细胞的IC50较对照CtrlsiRNA转染组显著降低（P〈0．05）;流式细胞仪检测显示沉默Notch3的表达可显著增强托泊替康诱导的结肠癌细胞凋亡（P〈0．05）和caspase-3活化（P〈0．05）。结论：siRNA沉默Notch3的表达可增强SW620细胞对托泊替康的化疗敏感性。     

活化Notch1信号下调Wnt信号抑制结肠癌细胞增生

目的 构建重组反转录病毒载体pCLNRX-ICN,研究过度活化Notch1信号对人结肠癌细胞HT-29细胞增生的影响作用及机制.方法 将人Notch1基因胞内区(ICN)克隆至反转录病毒载体pCLNRX中,与包装载体pCL-10A1共转染293细胞,制备重组病毒上清,检测病毒效价.MTT法检测稳定表达外源性ICN对细胞生长的影响,RT-PCR及Western Blot检测c-Myc、β-catenin表达水平.结果 成功构建重组反转录病毒载体pCLNRX-ICN,通过共转染获得了具有较高效价的重组反转录病毒.通过表达外源性ICN而过度活化Notch1抑制HT-29的生长,并下调Wnt信号途径关键调控分子β-catenin的蛋白表达水平,但对β-catenin的mRNA水平未见明显影响.而且过度活化Notch1对c-Myc的蛋白及mRNA表达水平均无明显影响. 结论 过度活化Notch1信号部分通过下调Wnt信号而抑制HT-29的生长,且该作用不依赖c-Myc的抑制.     

药物热的临床分析

目的 了解导致发热的药物及种类，提高对药物热的认识。 方法 回顾性总结分析1998年1月～2005年12月住院且符合药物热诊断标准的患者病历资料，对致热药物的种类、临床特点及治疗措施进行分析。 结果 共10例药物所致发热患者，其中以抗生素引起发热最多，致热药物以头孢菌素类和青霉素类药最常见。热型以驰张热为主，患者多有伴随症状。结论 临床上药物热与其他发热性疾病难以鉴别，对不明原因发热的病例应辨别是否发生药物热，以免误诊。同时要坚持合理使用抗生素。     

胰蛋白酶抑制剂在肿瘤治疗中的研究进展

正胰蛋白酶是胰腺分泌后活化的一种酶,可以选择性地水解蛋白质中由赖氨酸或精氨酸的羧基所构成的肽链,进而分解为氨基酸。科学家们在豆类、谷类、油料作物等植物中发现了多种胰蛋白酶抑制剂。其中,植物来源的胰蛋白酶抑制剂具有相对分子质量较     

活化的Notch1下调NF-κB对宫颈癌细胞增殖及凋亡的影响

目的构建重组逆转录病毒表达载体pCLNRX—ICN,研究Notch1过度活化对人宫颈癌HeLa细胞生长的影响,并探讨其作用机制。方法通过逆转录病毒感染,将Notch1（ICN）基因导入并整合到HeLa细胞的基因组中。MTT法检测稳定表达ICN对HeLa细胞生长的影响,并将阳性克隆细胞皮下接种裸鼠,观察ICN基因转染前后细胞系在裸鼠体内的致瘤能力。流式细胞仪分析细胞凋亡的变化,Westem blot及EMSA检测转录因子NF—κB及相关基因的变化。结果成功建立了稳定表达ICN基因的宫颈癌细胞株HeLa-ICN。活化的Notch1显著抑制HeLa细胞体内外增殖能力。而且在诱导HeLa细胞发生凋亡的同时,活化的Notch1可上调HeLa细胞中IκBα的表达,并下调NF-κB活性及其调节基因Bcl-2、c-Myc和cyclin D1的表达。结论活化的Notch1可通过诱导细胞凋亡和下调NF—κB活性而抑制人宫颈癌细胞增殖。