致肾盂肾炎大肠杆菌粘附素papG基因克隆及序列分析

目的　克隆F13型致肾盂肾炎大肠杆菌 (UPEC) 132株的粘附素基因papG并作序列分析。 方法　根据Ⅰ型papG(papGJ96 )和Ⅱ型 papG(papGIA2 )基因序列设计 3条引物 ,PG2和PG3分别为下游 3’端引物 ,PG1为两型papG上游 5’端共用引物 ,并在各引物 5’端加入限制性内切酶位点。以UPEC132染色体DNA为模板进行PCR扩增 ,将扩增产物克隆入质粒载体 ,筛选阳性重组质粒作序列分析。结果　UPEC132株以Ⅰ型 papG引物扩增时为阴性结果 ,以Ⅱ型 papG引物扩增时可获得约 110 0bp的DNA片段。扩增产物经克隆获得阳性重组质粒 pGC39和pGC10 3,对其序列分析显示 papG132编码337个氨基酸 ,与 papGJ96的同源性仅为 4 5 % ,而与 papGIA2的同源性为 98.6 %。与papGIA2比较 ,papG132核苷酸序列 +3位缺失 1个三联体密码 ,并在特异性受体结合域 +49位、+16 0位和PapD蛋白亚单位作用区 +2 72位、+314位存在错义突变 ,此外还存在 7处同义突变。结论UPEC132株的P菌毛不同于相同血清型的UPECJ96株 ,前者为F13型papA与Ⅱ型papG组合 ,后者为F13型 papA与Ⅰ型papG组合。Ⅱ型PapG粘附力较强 ,具有重要的临床意义。     

避孕知情选择

“知情选择”是指人们对其生殖保健方面作出决定的一个动态的过程。在这一过程中 ,个人可以自主地、知情地决定是否接受或拒绝服务以及选择什么样的服务。避孕知情选择是知情选择在计划生育领域的应用 ,是计划生育服务质量的核心内容。本文回顾了全世界范围内的避孕现状以及实施避孕知情选择的必要性和紧迫性 ,以及中国实行避孕知情选择所面临的挑战和问题。     

PapG重组蛋白免疫血清抗UPEC粘附作用的研究

目的探讨尿道致病性大肠埃希菌(UPEC)P菌毛粘附素PapG重组蛋白免疫血清的体外抗细菌粘附作用。方法建立UPEC的Vero细胞感染模型,制备PapG重组蛋白和谷胱甘肽S-转移酶(GST)担体蛋白免疫血清,检测这两种抗血清在血凝和细胞粘附抑制试验中的作用。结果重组蛋白免疫血清可抑制UPEC野生株所产生的甘露糖抗性血凝;可明显降低细菌对Vero细胞的粘附率,减轻或延缓细菌对细胞的毒性作用。而担体蛋白免疫血清则无上述作用。结论由PapG粘附素与GST构成的重组融合蛋白(GST-PapG)诱导产生的免疫血清在体外具有抵抗UPEC粘附的能力,而且这种抗粘附作用主要针对P菌毛的PapG粘附素。     

产超广谱β-内酰胺酶细菌微量表型确证试验及其应用评价

目的 建立产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)确证的快速微量检测法,评价该方法在筛检工作中的应用效果.方法 以灭菌的96孔酶标板建立ESBL微量快速确证试验,用已知59株产ESBL大肠埃希菌、33株非产ESBL大肠埃希菌和质控菌株进行试验的真实性、可靠性和收益评价.结果 重复试验符合率100%;用酶标仪自动判读敏感度达到或超过94.92%,特异度和阳性预测值均为100%,与美国国家实验室标准化研究所(CLSI)推荐标准检测方法所得到的结果差别无统计学意义(P＞0.05).结论 ESBL微量确证试验具有良好的真实性、可靠性和检测效益;操作简便、经济、快捷.     

03型假结核菌毒力质粒的限制性内切酶分析

应用计算机程序计算PstI和Sma1对03型假结核杆菌毒力质粒酶解电泳可见片段的分子量。BamHI、SalI、Xba1单酶和SalI-Xba1双酶酶解该毒力质粒,其指纹图谱与美国YPIII株假结核杆菌的毒力质粒的物理图谱比较推测两者DNA序列基本一致。双酶切结果提示:假结核菌毒力质粒的外膜蛋白I基因应位于SalI-Xda1双酶切的第二片段上。本研究为今后分子克隆毒力质粒的PI基因研究提供了重要数据。     

柴油车尾气颗粒物对孕鼠和胎鼠肺脏的病理损伤

目的探讨柴油车尾气颗粒物暴露对孕鼠和胎鼠肺组织可能造成的病理组织学损害。方法 24只清洁级ICR孕鼠随机分为4组:高剂量染毒组(170mg/kg)、中剂量染毒组(17mg/kg)、低剂量染毒组(1.7mg/kg)和PBS对照组;按规定程序以腹腔途径染毒,染毒结束后取孕鼠和胎鼠肺组织经HE染色,行组织病理学检查。结果与对照组相比,各实验组孕鼠和胎鼠的肺脏组织均发生不同程度病理损伤(P<0.05),主要表现为肺泡腔不规则扩大,肺泡间隔破裂,甚至融合成肺大泡;肺泡壁伴有轻中度增宽及炎症细胞的浸润或淤血。此外,组织病理学检查还提示,随着染毒剂量的增加,各实验组孕鼠和胎鼠肺组织的损伤程度也随之加重,呈现一定的剂量反应关系。结论腹腔途径柴油车尾气颗粒物暴露对孕鼠和胎鼠的肺组织均造成一定程度的损伤。     

致肾盂肾炎大肠杆菌P菌毛粘附素基因的型别鉴定

目的 从基因水平鉴定致肾盂肾炎大肠杆菌P菌毛粘附素的类型。方法 根据P菌毛I型（PapGJ96)、Ⅱ型（PapGIA2)和Ⅲ型（PrsGJ96)粘附素的基因序列，选择非同源区设计合成三对引物。以全菌DNA样品为模板，应用普通PCR和复合PCR技术获得三型papG的扩增。结果 UPEC J96分别产生461bp和258bp的DNA片段；UPEC132和UPEC136均产生190bp的DNA片段。无P菌毛对照株为阴性扩增。复合PCR结果与普通PCR完全一致。PapG132扩增产物的序列分析表明其与PapGIA2之间具有97．9％的同源性，但存在4处点突变。结论 UPEC132株P菌毛粘附素为Ⅱ型PapG，但与国外同型PapG比较，存在基因变异。复合PCR技术用于papG基因分型具有很高的敏感性和特异性。     

大气污染对过敏性气道疾病影响的研究进展

在过去几年里,大气污染对人类健康影响的了解有了长足的发展,特别是大气污染物对哮喘等变应性疾病的效应方面,近年涌现出大量的研究报道。这一领域的主要研究方法有流行病学调查、接触观察和动物实验。流行病学调查可显示大气污染混合物与健康结局的统计学关系,如疾病发生率、住院次数等,但不能提供其成因,且常常不能避开混淆因素的干扰;接触观察可在特定空气环境下检测特殊群体的反应性,从而不受混淆因素的影响;动物模型以及组织、细胞等离体样本为健康效应机制提供了深入研究的方法,但其结果并非总是和人的作用效果相同,因此必须综合利用…     

大气污染对心血管疾病影响的研究进展

许多证据表明大气污染与心血管疾病有关,其中以颗粒物的影响最为人们所关注。长期效应研究表明,长期接触污染空气与缺血性心脏病、心律失常、心力衰竭和心脏猝死等心血管疾病死亡率的升高有关,其对人群的健康效应不存在明确的最低浓度阈值;短期效应研究表明,心血管疾病住院率和死亡率随大气颗粒物浓度的增加而升高,并存在地域性差异。SO2、NO2、CO和O3的升高与心血管病住院率上升也有关。大气污染对心血管疾病的影响机制包括血管紧张性变化、氧化应激反应、炎性介质的参与等。