基于~1H-NMR代谢组学复方柴归方干预抑郁模型大鼠血清代谢物规律分析

目的采用~1H-NMR代谢组学方法分析复方柴归方干预抑郁模型大鼠血清代谢物组的变化规律。方法采用慢性温和不可预知应激(CUMS)程序对大鼠进行造模,以复方柴归方及阳性药(文拉法辛)为干预药物,采用核磁共振方法对大鼠血清进行分析,数据预处理后导入SIMCA-P 14.1软件进行多元统计分析,从小分子代谢物角度对复方柴归方的抗抑郁药效进行验证,并寻找出潜在的疾病生物标志物和药物疗效标志物。结果 CUMS抑郁大鼠模型复制成功,代谢组学结果表明与模型组相比,CUMS抑郁大鼠经阳性药和复方柴归方干预后血清中异亮氨酸、氧化三甲胺和肌酸水平升高,N-乙酰糖蛋白、胆碱和葡萄糖水平降低,差异显著(P0.05、0.01)。结论复方柴归方干预后CUMS模型大鼠血清差异代谢物水平明显回调,该研究可为复方柴归方抗抑郁作用机制研究提供参考依据。     

黄芪建中汤及其组方单味药化学成分与体内代谢研究进展

黄芪建中汤出自东汉张仲景的《金匮要略》,全方由黄芪、白芍、桂枝、甘草、生姜、大枣、饴糖7味中药组成。临床上主要用于治疗消化性溃疡、十二指肠溃疡、胃食管反流等疾病。通过回顾近年来黄芪建中汤及其组方单味药的研究文献,对黄芪建中汤及其组方中单味药的主要化学成分及其体内代谢途径、代谢反应和代谢产物进行综述,为黄芪建中汤的物质基础研究提供科学参考。     

基于网络药理学的黄芪治疗肾病综合征的机制研究

目的运用网络药理学的方法探讨黄芪治疗肾病综合征(NS)的分子作用机制。方法通过TCMSP数据库和文献挖掘获取黄芪主要活性成分,利用Pharm Mapper服务器、GeneCards和CoolGeN数据库预测和筛选黄芪活性成分的作用靶点。采用String数据库和Cytoscape软件绘制蛋白相互作用网络,通过Systems Dock Web Site对成分与靶点进行分子对接验证。借助DAVID数据库对靶点进行GO分析和KEGG通路分析,采用Cytoscape软件构建成分-靶点-通路-疾病网络。结果筛选得到黄芪25个活性成分,涉及47个作用靶点。网络分析结果表明,靶点主要涉及氧化应激、足细胞凋亡和脂质代谢等生物过程,通过调节Ras、Rap1、MAPK、PI3K-Akt和AGE-RAGE等信号通路来发挥治疗NS的作用。结论黄芪中黄酮类、皂苷类等活性成分可能是其治疗NS的物质基础,其作用机制涉及抗细胞凋亡、抗氧化应激和调节脂质代谢等。     

基于外周血单个核细胞转录组学的柴归颗粒抗抑郁作用机制研究<

目的 通过转录组测序（RNAsequencing,RNA-seq）技术分析柴归颗粒对慢性不可预知温和应激（chronic unpredictable mild stress,CUMS）模型大鼠外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMCs）的转录组学特征，并采用qRT-PCR法验证其作用机制。方法 将大鼠随机分为对照组、模型组、盐酸文拉法辛（35 mg/kg）组和柴归颗粒低、中、高剂量（4.2、8.3、16.6 g/kg）组，造模同时给药，连续28 d。通过抑郁症传统药效学指标（体质量、旷场实验、糖水偏爱实验及强迫游泳实验）评价柴归颗粒的药效。采用RNA-seq技术对大鼠PBMCs进行转录组学分析，筛选差异基因，对其进行京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）分析；通过qRT-PCR法对筛选出的关键表达基因进行实验验证。结果 行为学指标显示柴归颗粒能显著改善CUMS模型大鼠的抑郁行为。转录组学中KEGG通路富集分析表明抑郁发生时及柴归颗粒干预后，都显著富集到嘌...     

B7介导基因治疗恶性肿瘤进展

B7分子在免疫基因治疗恶性肿瘤中发挥重要作用 ,利用B7免疫基因治疗恶性肿瘤包括制备肿瘤疫苗 ,使B7+ 肿瘤细胞本身成为抗原提呈细胞 ,制备B7抗体融合蛋白以及制备抗B7抗体免疫毒素等 ,这些方法均可以增强机体对肿瘤细胞的免疫杀伤作用。本文就近几年在这方面的研究进展作简要综述     

基于UHPLC-QqQ-MS和网络药理学的二冬汤潜在活性成分含量测定及作用机制分析

目的 建立二冬汤中活性成分含量测定的超高效液相色谱-串联三重四级杆质谱法（UHPLC-QqQ-MS），并对该方进行抗胰岛素抵抗作用靶点和通路的预测。方法 采用ACQUITY UPLC BEH C₁₈色谱柱（2.1 mm×100 mm，1.7 μm），流动相0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）梯度洗脱（0~3 min，90%~87%A；3~6 min，87%~86%A；6~9 min，86%~83%A；9~11 min，83%~75%A；11~18 min，75%~70%A；18~19 min，70%~52%A；19~22 min，52%A；22~25 min，52%~5%A；25~27 min，5%~90%A；27~30 min，90%A）；利用电喷雾离子源（ESI），多反应监测（MRM）模式，正、负离子模式检测其含量。在此基础上，运用网络药理学方法预测二冬汤发挥抗胰岛素抵抗作用的靶点和通路。结果 二冬汤中20个活性成分在一定质量浓度范围内线性关系良好，精密度、稳定性、重复性及加样回收率良好。含量测定结果显示，15批样品中高质量浓度的成分为黄芩素（1 259.39~1 635.78 mg·L^-1）、黄芩苷（1 078.37~1 411.52 mg·L^-1）；中质量浓度的成分为知母皂苷BⅡ（245.10~604.89 mg·L^-1）、芒果苷（148.59~217.04 mg·L^-1）、槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷（89.30~423.26 mg·L^-1）、芦丁（46.91~1 553.61 mg·L^-1）、甘草酸（55.97~391.47 mg·L^-1）、新芒果苷（37.45~127.03 mg·L^-1）、荷叶碱（0.89~63.48 mg·L^-1）、金丝桃苷（6.96~136.78 mg·L^-1）、甘草苷（30.89~122.78 mg·L^-1）、甘草素（26.64~110.67 mg·L^-1）、原薯蓣皂苷（58.57~284.26 mg·L^-1）；低质量浓度的成分为伪原薯蓣皂苷（5.49~22.96 mg·L^-1）、汉黄芩素（7.16~20.74 mg·L^-1）、人参皂苷Rb₁（7.31~23.87 mg·L^-1）、人参皂苷Rg₁（10.78~28.33 mg·L^-1）、甲基麦冬黄烷酮A（0.74~1.67 mg·L^-1）、人参皂苷Re（7.78~24.76 mg·L^-1）、麦冬皂苷D（2.08~4.29 mg·L^-1）。网络药理学结果表明，二冬汤发挥抗胰岛素抵抗作用机制可能与磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路有关。结论 建立的UHPLC-QqQ-MS可为二冬汤复方制剂的开发奠定基础。网络药理学研究结果可为二冬汤治疗2型糖尿病的作用机制研究提供参考。     

白血病细胞B7-1分子表达的研究

Ｂ7 1分子是目前研究较多 ,较重要的共刺激分子 ,它的缺乏或封闭可抑制Ｔ细胞的活化、增殖 ,诱导克隆无能。许多动物实验转染外源Ｂ7 1分子基因给肿瘤细胞后 ,成功地诱导了抗肿瘤免疫反应。大多数肿瘤细胞无Ｂ7 1分子的表达。但是一些Ｂ细胞起源的造血干细胞肿瘤有Ｂ7分子的表达。我们分别用逆转录 聚合酶链反应 (ＲＴ ＰＣＲ)和流式细胞术两种方法检测Ｂ7 1ｍＲＮＡ和ＣＤ80 抗原在白血病细胞中的表达 ,并初步探讨其意义。对象和方法1　研究对象　本院门诊和住院患者 5 8例 ,其中急性髓系白血病 (ＡＭＬ) 19例 ,混合性白血病 1例 ,慢性髓系…     

逍遥散与文拉法辛联用抗抑郁的网络药理学机制研究

目的 运用网络药理学技术探讨逍遥散与文拉法辛联用抗抑郁的作用机制。方法 通过TCMSP、PubChem、OMIM、GeneCards以及UniProt等数据库获得逍遥散和文拉法辛治疗抑郁症的作用靶点；利用STRING网站得到蛋白互作网络；并通过Metascape网站对潜在作用靶点进行富集分析；使用Cytoscape软件绘制“靶点-成分-通路”可视化网络图。结果 逍遥散主要通过芍药苷、刺槐素、儿茶素、槲皮素等化学成分和文拉法辛联合作用发挥抗抑郁作用。逍遥散和文拉法辛治疗抑郁症的相关靶点共208个，主要为酪氨酸蛋白激酶（SRC）、信号转导和转录激活器3（STAT3）、转录因子AP-1（JUN）、丝裂原活化蛋白激酶3（MAPK3）等。这些主要靶点作用于糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路（AGE-RAGE signaling pathway in diabetic complications）、癌症通路（pathways in cancer）等43条通路，调节对受损的应答（response to wounding）、对无机物的应答（response to inorganic substance）以及细胞成分运动的正向调节（positive regulation of cellular component movement）、血液循环（blood circulation）和有机羟基化合物代谢过程（organic hydroxy compound metabolic process）等生物学过程发挥抗抑郁作用。结论 逍遥散与文拉法辛联用通过多靶点、多通路发挥抗抑郁作用，利用网络药理学预测中西药联合治疗疾病的作用机制值得深入探讨。     

柴归颗粒对慢性不可预知温和刺激抑郁大鼠模型肠道菌群的作用

目的利用16S rRNA高通量测序技术研究柴归颗粒对慢性不可预知温和刺激(chronic unpredicted mild stress,CUMS)抑郁大鼠模型肠道菌群的调节作用,探讨柴归颗粒的抗抑郁作用及机制。方法SD大鼠随机分为对照组、模型组和柴归颗粒(8.3 g/kg)组,给药1 h后造模,持续28 d。收集大鼠肠道内容物,提取总DNA,根据细菌16S rRNA V3~V4区设计引物进行扩增,利用Illumina Miseq平台进行高通量测序。结果与对照组比较,模型组大鼠肠道菌群栖热菌门(Thermi)、变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)和放线菌门(Actinobacteria)相对丰度水平显著降低(P<0.05),乳酸杆菌属Lactobacillus相对丰度水平显著升高(P<0.05),栖热菌属Thermus、不动杆菌属Acinetobacter、甲基杆菌属Methylobacterium、青枯菌Ralstonia、纤毛菌属Leptothrix、假单胞菌属Pseudomonas、棒状杆菌属Corynebacterium和苍白杆菌属Ochrobactrum相对丰度水平显著降低(P<0.05)。与模型组比较,柴归颗粒可调节CUMS大鼠肠道菌群的构成,显著回调栖热菌门、变形菌门、拟杆菌门和放线菌门相对丰度水平(P<0.05、0.01),显著降低乳酸杆菌属相对丰度水平(P<0.01),显著升高栖热菌属、不动杆菌属、甲基杆菌属、青枯菌属、纤毛菌属和苍白杆菌属相对丰度水平(P<0.01)。结论柴归颗粒可能通过调节参与精氨酸代谢途径的肠道菌群发挥抗抑郁作用。     

基于整合药理学的柴胡不同部位抗癫痫作用研究

目的研究柴胡Bupleuri Radix的抗癫痫活性及其发挥药效的物质基础和潜在的分子作用机制。方法采用活性追踪的方法,考察柴胡低、中、高极性部位分别对戊四唑诱导的小鼠致癫痫模型的影响。并采用LC-MS技术对柴胡抗惊厥活性部位化学成分进行全面表征。通过整合药理学方法对柴胡抗癫痫活性部位潜在作用机制进行初步预测,并构建柴胡潜在靶标与癫痫疾病靶标相互作用网络。最后,对于其中重要的通路进行验证。结果通过小鼠造模剂量筛选,选择戊四唑55.18mg/kg造模,发现柴胡高极性部位(20 g/kg)可以显著延长癫痫小鼠的阵挛潜伏期与强直潜伏期,并能显著减少惊厥次数。化学成分鉴定结果表明,在正、负离子模式下从柴胡抗惊厥活性部位共鉴定出32种化学成分,主要为柴胡皂苷类成分,还包括脂肪酸类、糖类和香豆素类等成分。通过整合药理学平台筛选出柴胡抗癫痫的关键靶标22个,其中疾病与药物共有主要靶点有10个,包括ATP5A1、ATP5B、ATP1A1、ATP5C1、PPP3CA、PTGS2、AR等;其富集的通路包括帕金森病、能量代谢、亨廷顿氏病、卵母细胞减数分裂、神经退行性疾病等。最终,验证了能量代谢中关键节点,结果发现柴胡高极性部位能明显回调癫痫小鼠海马和肝脏中三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)含量。结论柴胡高极性部位具有显著抗惊厥活性,其主要通过调节能量代谢通路来抑制癫痫的发生,其中柴胡皂苷类成分主要调节能量代谢,并通过改善ATP含量水平起到抗癫痫的作用,这可能是柴胡治疗癫痫的主要机制。