胞嘧啶脱氨酶基因与前体药物5-氟胞嘧啶联合应用对人乳腺癌裸鼠模型的实验治疗

探讨胞嘧啶脱氨酶（ＣＤ）基因与前体药物５－氟胞嘧啶（５－ＦＣ）对人乳腺癌裸鼠移植瘤的抗肿瘤作用．应用细胞克隆形成实验及裸鼠移植瘤模型研究ＣＤ／５－ＦＣ体系的抗肿瘤作用．５－ＦＣ０．５和１．０ｇ·Ｌ－１对转基因人乳腺癌细胞的克隆形成抑制率分别为９０％和９５％,显著高于未转基因的人乳腺癌细胞;５－ＦＣ（０．５ｇ·ｋｇ－１·ｄ－１ｉｐ,１４ｄ）治疗组的转基因人乳腺癌裸鼠移植瘤的瘤重和生长速度均显著低于未转基因的移植瘤．结果表明ＣＤ／５－ＦＣ体系对人乳腺癌裸鼠移植瘤有显著的的抗肿瘤作用．     

5-氟胞嘧啶在体外对转导胞嘧啶脱氨酶基因的肝癌细胞的细胞毒作用

As to investigate the cytotoxic effects of 5-fluorocytosine on hepatocarcinoma cells genetically modified with cytosine deaminase gene, the gene was transduced into the tumour cells with retroviral method. The cytotoxicity and the bystanding killing effects of 5-fluorocytosine on the tumour cells were measured with MTT assay. It was found that the prodrug 5-fluorocytosine had significant cytotoxic effects on human hepatocarcinoma cells which were transduced with cytosine deaminase in vitro. The IC₅₀ value of 5-
fluorocytosine on transgenic and non-transgenic hepatocarcinoma cells were 110 and 1 249 mg·L^-1, respectively. Moreover, the result showed that cytosine deaminase gene/5-fluorocytosine system possessed bystander killing effects on hepatocarcinoma. The experiment demonstrates the potential value of the cytosine deaminase gene/5-fluorocytosine system in the treatment of human hepatocarcinoma.     

5-氟胞嘧啶在体外对转导胞嘧啶脱氨酶基因的肝癌细胞的细胞毒作用

基因治疗为肿瘤治疗开创了一个新途径,其中自杀性基因疗法是肿瘤基因治疗中的一个重要方法．该方法利用复制缺陷型病毒载体将外源基因导入肿瘤细胞,在肿瘤细胞中外源基因表达出酶蛋白,可以将无毒的前体药物转化为细胞毒药物,选择性地杀伤肿瘤细胞．研究表明,自杀性基...     

利用Internet模建IL-6Rα的三维结构

目的：模建人ＩＬ－６Ｒα的三维结构，为构建可拮抗ＩＬ－６作用的ＩＬ－６Ｒα的突变体提供理论依据。方法：以生长激素受体为模板蛋白，在Ｉｎｔｅｒｎｅｔ互联网络上利用Ｓｗｉｓ－Ｍｏｄｅｌ蛋白同源结构模建工具进行ＩＬ－６Ｒα配基结合区的三维结构模建。结果与结论：得到了人ＩＬ－６Ｒα配基结合区的三维结构，并对模型进行了评价，确定了ＩＬ－６Ｒα上与异六聚体复合物一致的作用界面，为构建ＩＬ－６Ｒα的突变体提供了理论依据，并提示双突变体Ｃ２７７Ｄ／Ｈ２８０Ｉ可能既与ＩＬ－６具有高亲和力，又可拮抗ＩＬ－６的作用     

IL—6／IL—2融合蛋白（CH925）在大肠杆菌中高效表达

本文设计重组ＩＬ－６／ＩＬ－２的嵌合基因，选取合适的中间接头，并对ＩＬ－６及ＩＬ－２功能区基因进行修饰，运用ＰＣＲ拼接技术，克隆了中间接头与ＩＬ－２功能区基因，再与ＩＬ－６基因连接后转化Ｅ．ｃｏｌｉ经序列分析证实获得ＩＬ－６／ＩＬ－２融合蛋白表达载体ｐＦＩＬ－６／２经诱导表达ＩＬ－６／ＩＬ－２占菌体总蛋白３２％，融合蛋白分子量约为３７ｋＤ，分别以ＩＬ－６及ＩＬ－２依赖株测得融合蛋白具有双功能生物活     

pHUK-8质粒DNA及其PstI酶切片段的分离与纯化

获得高纯质粒DNA与高纯酶切片段,为DNA体外重组、分子杂交以及序列分析等研究所必需。分离不纯或回收不当常使实验结果无法分析。为了从人胚肾培养细胞cDNA文库中筛选含人尿激酶(HUK)基因的重组克隆,我们利用氯化铯-溴化乙锭(CsCl-EB)密度梯度超离心法分离纯化pHUK-8质粒DNA,并经制备电泳从中回收PstI酶切的含HUK基因1500bp的片段。结果得到了较纯的制品,现将我们的实验介绍如下。材料与方法菌株与试剂 pHUK-8质粒转化的E.coli HB101菌株系NIH Fogarty中心F.Blasi     

IGF结合蛋白1抑制IGF-Ⅰ对人脐静脉内皮细胞的增殖作用

以四甲基偶氮唑盐 (MTT)法观察胰岛素样生长因子Ⅰ (IGF Ⅰ )和 (或 )IGF结合蛋白 (BP) 1对人脐静脉内皮细胞 (ECV3 0 4细胞株 )生长的影响。结果显示IGF Ⅰ在低浓度时 (0 .1～ 1mg/L)促进ECV3 0 4细胞增殖 (均P <0 .0 5 ) ,高浓度时 (4mg/L)抑制ECV3 0 4细胞增殖 (P <0 .0 5 ) ;IGFBP 1(0 .5～ 2mg/L)抑制ECV3 0 4细胞增殖且呈剂量依赖性 ;IGF Ⅰ和IGFBP 1混合液抑制ECV3 0 4细胞增殖 ,提示IGF Ⅰ的促生长作用被IGFBP 1抑制。     

人白细胞介素15基因的分离及其在大肠杆菌中的克隆与表达

目的：分离编码人ｈＩＬ－１５的ｃＤＮＡ并大肠杆菌中克隆与表达，方法：采用ＰＨＡ刺激人外周血白细胞提取ｍＲＮＡ，并利用ＲＴ－ＰＣＲ方法获得ｈＩＬ－１５的ｃＤＮＡ将其定向插入ＰＵＣ１９载体中，ＤＮＡ序列分析表明分离的ｈＩＬ－１５的序列与文献报道一致，以ｐＢＶ２２０为表达载体构建并筛选出重组于ｐＢＶｈＩＬ－１５；重组子转化Ｅ．ｃｏｌｉＤＨ５α菌株，经４２℃诱导表达。结果：相对分子质量为１４０００的ｈＩＬ     

肾综合征出血热病毒的分子生物学研究进展

肾综合征出血热(HFRS)是一组分布于世界各地的动物原性病毒性疾病,严重地威胁着人民的生命与健康。本文以Hantaan病毒为代表概述了近年来在HFRS病毒的分子特征、抗原性、核酸与基因组结构、病毒基因的表达及其应用的研究以及疫苗的研制等方面的进展。这些研究进展为HFRS的预防与治疗提供了理论及实验基础。     

白细胞介素-13嵌合假单胞菌外毒素对胰腺癌细胞的靶向毒杀作用

目的：探讨白细胞介素（IL)-13嵌合假单胞菌外毒素（PE）对多种胰腺癌细胞系的靶向治疗作用。方法：用噻唑蓝（MTT）法分析IL-13嵌合假单胞菌外毒素（IL-13-PE38QQR）对胰腺癌细胞ASPC-1、CAPAN-1、COLO-357、MIA PaCa-2、PANC-1、T3M4的靶向毒杀作用,并分析IL-13对胰腺癌细胞系的增殖作用和与IL-13-PE38QQR的竞争结合作用。结果：IL-13对ASPC-1、CA-PAN-1、COLO-357有明显促增殖作用;对PANC-1作用次之;对MIA PaCa-2、T3M4不明显;IL-13-PE38QQR对6个胰腺癌细胞都有明显抑制作用;IL-13与IL-13-PE38QQR有竞争抑制作用。结论：IL-13-PE38QQR嵌合蛋白对胰腺癌有靶向治疗作用。