经EB病毒转染建立阵发性睡眠性血红蛋白尿症永生细胞系的方法改进

为提高EB病毒(Epstein-Barr virus)转染阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)异常细胞建立永生性细胞株的成功率及加快建株时间,在改进培养方法方面进行了一些初步探索性研究。根据PNH异常细胞易受氧化损伤的原理,在培养体系中加入一种抗氧化剂AA_2保护PNH异常细胞的生存。研究结果表明:2例PNH患者细胞均建株成功,不加药对照组有1例失败;建株时间明显缩短,并且建株后CD59~-细胞百分率无明显下降。实验结果提示,氧化损伤是PNH细胞建株困难的重要原因;在培养初期加抗氧化剂可提高建株的成功率及缩短建株时间,这是一个重要的改进;因观察例数尚少,有待进一步证实。     

为毒素休克大鼠红细胞蛋白激酶C活性的变化

大鼠注射内毒紊后0.5h,红细胞浆蛋白激酶C活性明显降低,细胞膜蛋白激酶C活性显著增高。由正常红细胞浆提纯的蛋白激酶C在体外能增加红细胞膜蛋白区带1、区带2、区带4.2、区带4.5以及区带4.9的~(32)P参入量。结果提示,内毒素休克早期大鼠红细胞蛋白激酶C被激活;激活的蛋白激酶C引起红细胞膜骨架蛋白的磷酸化,进而可能影响红细胞变形性。     

人红细胞抗氧化酶类的测定

我们曾用H_2O_2处理正常及PNH红细胞,然后测定膜脂质的过氧产物丙二醛(MDA),并发现PNH红细胞产生的MDA远较正常人的为多,共原因可能是:(一)膜脂质组分异常;(二)细胞内抗氧化机能减退。本文报告PNH及正常红细胞中SOD、GSH-Px及过氧化氢酶活性,以探讨红细     

阿魏酸钠对补体溶血的影响

本文以正常人及阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者的红细胞为对象,观察阿魏酸钠对补体溶血的影响及其机理。结果说明阿魏酸钠可明显降低补体溶血,抑制补体3b(C_3b)与红细胞膜的结合;对补体激活及红细胞变形性无影响。     

朊蛋白研究进展

朊蛋白 (prion protein,Pr Pc)是一个非传统的感染原 ,尚未发现含核酸 ,可引起人和动物的传染性脑退化病。 Pr Pc 是一个正常的蛋白 ,主要分布于神经元表面 ,属于肌醇磷脂锚蛋白类。由 Pr Pc向 Pr Psc转变即产生疾病。本综述简单介绍了朊蛋白结构、功能及发病机理 ,并提出了目前尚待研究的问题     

经化学和酶处理的红细胞膜对恶性疟原虫裂殖子入侵的抑制作用

红细胞经胰蛋白酶处理后,海南株恶性疟原虫(Fcc-1/HN)裂殖子入侵明显抑制,经神经氮酸酶和麦胚凝集素(WGA)处理后裂殖子入侵受到部分抑制,而植物凝集素(PHA)处理对裂殖子入侵没有影响。经二酰胺(Diamide)、秋水仙碱和马来酰亚胺(NEM)处理的红细胞,裂殖子的入侵均受到显著抑制,以NEM的作用最强,当其浓度为2mM时,裂殖子的入侵完全被抑制。结果表明,应用化学与酶修饰的方法改变红细胞膜表面及膜骨架蛋白的结构和性质,恶性疟原虫裂殖子对红细胞的入侵作用出现变化。     

人老化红细胞膜磷脂含量及蛋白激酶C活性的测定

测定了老化红细胞膜各磷脂占总磷脂的百分含量及胞浆与膜的蛋白激酶Ｃ的活性，并与年轻红细胞相比较。结果表明：老化红细胞膜上除磷脂酯胆碱的百分含量（１４．０％±２．２％）明显低于年轻红细胞（２０．０％±３．０％）（Ｐ＜０．０１）外，其它磷脂成分的百分含量未见有统计学差异；老化红细胞胞浆中蛋白激酶Ｃ活性（１８１．８±３．０ｐｍｏｌＰｉ／ｍｇ蛋白·分）明显低于年轻红细胞（２５７．８±２９．８ｐｍｏｌＰｉ／ｍｇ蛋白·分），而膜上蛋白激酶Ｃ的活性（２８６．３±１１．３ｐｍｏｌＰｉ／ｍｇ蛋白·分）则明显高于年轻红细胞（２５６．２±１７．５ｐｍｏｌＰｉ／ｍｇ蛋白·分）（Ｐ＜０．０１）。     

红细胞感染恶性疟原虫后抗氧化体系的变化

将体外培养的海南株恶性疟原虫感染宿主红细胞后,发现感染红细胞抗氧化体系中的超氧化物岐化酶和过氧化氢酶的活性明显降低,还原型谷胱甘肽的含量明显下降,过氧化氢显著增加,表明疟原虫感染可使宿主红细胞内抗氧化体系的抗氧化能力下降。     

阵发性睡眠性血红蛋白尿症补体不敏感红细胞囊泡化现象的观察

经蛇毒因子溶血法纯化阵发性睡眠性血红蛋白尿症补体不敏感红细胞，用过氧化氢、中性多形核白细胞和卵黄磷脂酰胆碱人工脂质体分别与之孵育，通过检测上清乙酰胆碱脂酶活性了解红细胞囊泡化释放情况。结果显示阵发性睡眠性血红蛋尿症红细胞用过氧化氢或中性多形核白细胞诱导后上清中乙酰胆碱脂酶活性与正常对照无明显差别（Ｐ＞０．０５）；而在卵黄磷脂酰胆碱人工脂质体诱导下，随孵育时间延长，可见明显囊泡释放，第４小时乙酰胆碱