唾液中EB病毒抗体检出用于早诊鼻咽癌的研究

目的：建立在唾液标本中检出 EB病毒 IgA抗体的方法,以快速、特异诊断鼻咽癌。方法：人工合成 EBV-DNA酶及 EA-D多肽片段,分别作为捕捉抗原,采用 ELISA法检测鼻咽癌患者和健康人血清及唾液中 IgA/ EBV-DNA酶和 EA-D抗体。结果：通过检出 O.D值,经统计学处理,选出鼻咽癌诊断阈值为：血清 O.D值≥ 0.3,唾液 O.D值≥ 0.45（ DNA酶与 EA-D两者阈值一致）。鼻咽癌与健康者两组间 DNA酶与 EA-D的 IgA滴度均为 P< 0.0001,有非常显著性差异,与病理确诊相比,阳性符合率为 72.6％～ 77.3％。结论：证实 EBV合成肽链作为捕捉抗原,唾液为标本,用 ELISA法是可行的,方法简便,重复性好,价廉,但诊断符合率需进一步提高。     

鼻咽癌组织中 EBV-BARF0基因序列的测定

目的： EB病毒 (Epstein-Barr virus,EBV)存在的变异影响到其生物学功能（如 LMP1基因）。 BamHI A区右向框 0（ BamHI A rightward fram0, BARF0）是在鼻咽癌 (Nasopharyngeal Carcinoma,NPC)病人中检出率很高的一个 EB病毒基因,对其变异性的研究尚未见报道,本研究是为了明确广东鼻咽癌组织中 EBV-BARF0基因的序列及其变异。方法：应用 PCR技术从 20例鼻咽癌组织中,扩增 EBV基因 BARF0,并对它们的序列进行测定。结果：与标准株 B95-8相比,鼻咽癌组织中 EBV-BARF0均有 4个位点发生突变： 160473（ G→ T）、 160545（ C→ T）、 160701（ C→ A）、 160707（ G→ C）,并导致相应的氨基酸的改变： 2（ Ala→ Ser）、 26（ Leu→ Phe）、 78（ Arg→ Ser）、 80（ Ala→ Pro）。结论：由于 EBV的 BARF0基因在鼻咽癌细胞株及活检组织中 100％表达,在淋巴瘤组织及淋巴瘤细胞株中表达较低或不表达,本研究首次报道鼻咽癌组织中 EBV-BARF0的序列分析,与 B95-8相比存在变异,并导致了蛋白质的一级结构的改变,推测该基因很可能在鼻咽癌变过程中起着重要的作用。     

番荔枝内酯诱导白血病细胞凋亡的机理

目的　研究番荔枝内酯(squamocin)诱导白血病细胞凋亡的机理。方法　DNA凝胶电泳法、荧光染色等检测细胞凋亡。试剂盒检测caspase-3的活性。Westernblot法检测PARP和caspase-3的剪切片断和磷酸化的SAPK/JNK量的变化。结果　Squamocin处理HL-60细胞后,导致染色质浓缩、片断化,DNA梯形条带出现,完整PARP的116ku条带逐渐减少,而85ku的片断逐渐增加,caspase-3酶的活性也增加。Caspase-3的特异性抑制剂DEVD-CHO预处理HL-60细胞,可阻止squamocin诱导的DNA片断化、PARP的剪切和细胞死亡。Squamocin激活HL-60细胞中SAPK/JNK。结论　Squamocin诱导HL-60细胞凋亡依赖caspase-3途径的激活,squamocin激活caspase-3可能与SAPK/JNK的激活相关     

分枝杆菌在液体培养基中的L型诱导

通过对不同生长时期的卡介苗及耻垢分枝杆菌以不同组合和浓度的D-环丝氨酸(cyc)和氨苄青霉素(AMP)进行L型诱导,综合染色镜检、菌落形态观察及计数,以及对十二烷基磺酸钠(SDS)敏感性测定的结果,发现在对数生长晚期(卡介苗为OD_600=0.25～0.30,耻垢菌为OD_600=1.0～1.4)开始诱导,cyc和AMP的浓度分别为1.0mg/ml及0.lmg/ml时诱导效果最好,诱导率可达80％左右。     

实体瘤疗效评定最新指南

当前广泛使用的实体瘤疗效评定标准是 1 979年由世界卫生组织 (ＷＨＯ)颁布的。但在实际使用中发现 ,这一标准所采用的具体测量指标具有一定的灵活性 ,因而各研究小组的研究结果有时难以进行比较。此外 ,随着影像技术的发展 (如ＣＴ和ＭＲＩ) ,出现了一些肿瘤三维测量数据 ,它们也理应在肿瘤的疗效评定中起一定作用。为解决这些问题 ,欧洲癌症研究与治疗组织 (ＥＯＲＴＣ)、美国国立癌症研究所 (ＮＣＩ)和加拿大国家癌症研究所临床试验小组于 1 994年以来就ＷＨＯ标准的修订工作广泛征求了有关专家的意见 ,并于最近制订了本疗效评定新指南以…     

重组人内皮抑素腺病毒抑制肝癌裸鼠移植瘤生长

目的 观察重组人内皮抑素腺病毒(Ad/hEndo)对人肝癌裸鼠移植瘤生长的影响。方法 人脐静脉内皮细胞ECV-304经Ad/hEndo感染后,western印迹检测人内皮抑素的表达。人肝癌BEL-7402细胞移植到裸鼠背脊部后,检测Ad/hEndo对肝癌移植瘤生长的抑制作用。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肿瘤组织中内皮抑素mRNA的表达。分析人内皮抑素在裸鼠体内的表达分布。结果 Western印迹检测到人内皮抑素基因在ECV-304细胞内高效表达。Ad/hEndo明显抑制人肝癌BEL-7402裸鼠移植瘤生长(F=4.061,P<0.05)。Ad/hEndo组血管密度计数为6.88±1.08,DMEM组为13.60±1.71(t=9.216,P<0.01)。瘤内注射Ad/hEndo后3d,RT-PCR在肿瘤组织检测到内皮抑素mRNA的表达,7d后表达不明显。人内皮抑素蛋白主要分布在肿瘤组织。结论 腺病毒介导的人内皮抑素基因在体内、体外获得高效表达,并明显抑制肝癌裸鼠移植瘤的生长与血管生成。     

医学教育必须是精英教育

北京协和医学院作为中国最著名的医学高等学府曾创造了无数的辉煌与奇迹,也一直引领着中国医院教育发展的方向.如今,社会的发展、人类生活方式的变化,极大地改变了人类的健康状况.随着新的医学模式应运而生,医学教育是否也要作出相应的改变? 一、医学人才应该是复合型多学科的人才 疾病是由某种生物医学原因(一个病毒、一个细菌)引起的,医生的责任就是想方设法把这个病毒杀掉.过去几十年来,这种把病人看成一种生物学现象的生物医学模式,把医学机械化、简单化,忽略了人性的因素.     

细胞色素P450 CYP1A1基因多态与鼻咽癌易感性的关联分析

Objective To investigate the association between CYP1A1 gene polymorphisms and susceptibility of nasopharyngeal carcinoma in Cantonese nuclear families through family-based association study. Methods A total of 457 Cantonese nuclear families, consisting of 2134 members, were recruited as subjects. Each family included two parents and at least one offspring with nasopharyngeal carcinoma. Two single nucleotide polymorphisms (SNP) in CYP1A1 named m1 (rs4646903) and m2 (rs1048943) , were genotyped by PCR-RFLP assay and verified by directly sequencing. The genotype data were analyzed with family-based association test (FBAT) software to check the linkage and association between the two genetic markers and susceptibility of nasopharyngeal carcinoma. Results FBAT analysis showed that the minor allele frequencies (MAF) of the two SN P were 0. 442 (C) and 0. 339 (G) respectively. For m1 polymorphism in CYP1A1 gene was not significantly associated with nasopharyngeal carcinoma in our study population whether stratified with VCA-IgA or not (without stratification : X2=2. 399, P=0. 301 ; with stratification : Iow-titer group (VCA-IgA<1 : 80), MAF=0. 457 (C), X2=1.221, P=0.543 ; high-titer group (VCA-IgA ≥1 : 80), MAF=0. 427 (C), X2=2. 832, P=0. 243). For m2 polymorphism, when VCA-IgA<1 : 80, the G allele showed decreased transmission under additive and dominant model (MAF=0. 347 (G) ; Zadditive=-2. 120,Padditive=0. 034;Zdominant=-2. 303,Pdominant=0.021)and a boundary P value was got with global statistic (X2=5. 394, P=0. 067). Haplotype TG (0. 057), constructed by ml and m2, might decrease nasophargneal carcinoma risk (Z=-2. 002,P=0. 045). A boundary P value was also got with global statistic (X2=7. 067 ,P=0. 070). Conclusion There was no statistical significance between ml polymorphism and susceptibility of nasopharyngeal carcinoma in Cantonese nuclear families. And this study showed that m2 polymorphism might associated with the decrease of nasopharyngeal carcinoma in Cantonese nuclear families.     

慢性粒细胞白血病p53基因功能检测

目的：通过以ｐ２１作为标志物的功能检测方法了解慢性粒细胞白血病中ｐ５３基因功能状况。方法：采用ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ方法检测未经阿霉素诱导及阿霉素诱导后慢粒患者白血病细胞中ｐ５３及ｐ２１蛋白表达。结果;对２５例慢性患者白血病细胞进行了检测,显示５例ｐ５３基因功能异常,其中１例为慢性期,显示ｐ５３基因为野生型,但无功能;１例加速期;３例急变期,分别为急粒变,急单变和多克隆急变,在急淋变中未见。     

乳腺癌患者血清蛋白质芯片检测

背景与目的:乳腺癌的早期诊断是取得满意治疗效果的关键,目前临床常用的乳腺癌检查方法有近红外线乳腺扫描,乳腺X线钼靶及数字化摄片、针吸细胞学检查、乳腺穿刺活检、外科手术活检或冰冻切片检查等,但这些方法的检测出来的多数已非早期肿瘤.本研究就是应用蛋白质芯片技术,分析乳腺癌患者与乳腺非癌患者和正常妇女、Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅲ期乳腺癌之间血清蛋白质表达的差异.方法:我们选择IMAC3和WCX2两种芯片,对64例乳腺癌、52例乳腺非癌患者及12名正常妇女血清进行研究.统计学分析采用Ciphergen ProteinChip3.0和Biomark Wizard软件分析乳腺癌、乳腺非癌患者和正常人血清的蛋白质谱差异.结果:在WCX-2蛋白芯片,分子量为9 116Da、8 905 Da、8 749 Da、9 470 Da和9 692 Da的5个位点,在乳腺癌患者与乳腺非癌患者及正常妇女血清之间WCX-2蛋白峰表达有差异,乳腺癌患者蛋白质峰的表达较乳腺非癌和正常妇女表达高,敏感性为54.7%～92.2%;特异性为53.1%～81.3%;分子量为9 405Da和6 424Da的2个位点,Ⅰ期乳腺癌与Ⅲ期乳腺癌患者血清蛋白峰表达有差异,敏感性为73.7%～78.9%,特异性为61.9%～71.4%.在IMAC3蛋白芯片,分子量分别为5 236 Da、7 823 Da、7 464 Da、5 213 Da、5 334 Da、5 063 Da、5 374 Da、7 756 Da和7 623 Da有9个位点位置,乳腺癌患者与乳腺非癌患者及正常妇女血清蛋白峰表达有差异,蛋白质峰的表达乳腺癌患者较乳腺非癌和正常妇女表达低,敏感性为56.3%～82.8%;特异性为48.4%～78.1%;分子量为7 922Da、4641Da和5 910Da位置,Ⅰ期乳腺癌与Ⅲ期乳腺癌患者血清蛋白峰表达有差异,敏感性为63.2%～84.2%,特异性为47.6%～66.7%.结论:乳腺癌患者与乳腺非癌及正常妇女血清蛋白峰表达存在差异,这些差异蛋白有可能成为新的乳腺癌分子标志物,有助于乳腺癌的早期诊断及术后的随访.